发明公开
EP0334283A2 Verfahren zur Selektion grosser DNA-Abschnitte
失效
Verfahren zur Selektion grosser DNA-Abschnitte。
- 专利标题: Verfahren zur Selektion grosser DNA-Abschnitte
- 专利标题(英): Process for the selection of large DNA segments
- 专利标题(中): Verfahren zur Selektion grosser DNA-Abschnitte。
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申请号: EP89105013.0申请日: 1989-03-21
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公开(公告)号: EP0334283A2公开(公告)日: 1989-09-27
- 发明人: Wohlleben, Wolfgang, Dr. , Muth, Günter, Dr. , Pühler, Alfred, Prof. Dr.
- 申请人: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT
- 申请人地址: 65926 Frankfurt am Main DE
- 专利权人: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT
- 当前专利权人: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT
- 当前专利权人地址: 65926 Frankfurt am Main DE
- 优先权: DE3809691 19880323
- 主分类号: C12N15/10
- IPC分类号: C12N15/10
摘要:
DNA-Abschnitte aus Mutanten lassen sich sehr einfach dadurch gewinnen, daß man aus dem zu mutierenden Stamm die gesamte DNA isoliert, diese nach Spalten in kleine Fragmente in ein temperatursensitives Plasmid mit einem weiteren Selektionsmarker, der in E. coli selektierbar ist, integriert, die so erhaltene Hybridplasmid-Population in den Ausgangsstamm transformiert, durch Selektion auf den Marker die Transformanten selektiert, durch Erhöhung der Temperatur über den Schwellenwert des temperatursensitiven Plasmids die Hybridplasmide eliminiert und durch erneute Selektion auf den Marker die Mutanten selektiert. Legt man nun mit der DNA dieser Mutanten eine Cosmid-Genbank an, so erhält man durch Selektion auf den eingeführten, in E. coli selektionierbaren Marker und den Cosmid-eigenen Marker direkt Cosmide, die das mutierte Gen enthalten.
公开/授权文献
- EP0334283B1 Verfahren zur Selektion grosser DNA-Abschnitte 公开/授权日:1993-09-22
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