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公开(公告)号：CN108267590A
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201611270257.4
申请日：2016-12-31
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
CPC分类号： G01N33/68 , G01N1/38 , G01N2550/00
摘要： 本发明涉及PEG修饰蛋白的PEG结合数检测方法，包括以下步骤：待测PEG修饰蛋白样品处理后将PEG全部释放出来，检测PEG的质量，通过蛋白及PEG的摩尔比推算出PEG修饰蛋白中PEG结合数的步骤。本发明方法适用于不同的蛋白类型及不同PEG修饰剂类型，尤其是由立体结构复杂、分子量庞大，空间位阻较大的PEG修饰的蛋白，其用其他现有方法难以准确分析PEG结合数。并且，本发明方法操作简单、重复性好、能准确分析PEG修饰蛋白PEG结合数。
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公开(公告)号：CN108267534A
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201611267294.X
申请日：2016-12-31
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
IPC分类号： G01N30/89
CPC分类号： G01N30/89
摘要： 本发明涉及聚乙二醇修饰蛋白肽图分析方法，该方法首先需要破坏蛋白的高级结构以充分暴露酶切位点，随后再进行蛋白酶解；其次本发明方法通过选择合适的色谱填料孔径，获得了针对PEG修饰蛋白的分析性能理想的肽图分析方法。本方法的有效使用，可以在肽图中有效检出PEG修饰肽段，克服传统方法中无法区分修饰蛋白与未修饰蛋白的技术难题。
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公开(公告)号：CN108265065A
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201711379683.6
申请日：2017-12-20
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
CPC分类号： C07K14/415 , A61K39/00 , C12N15/85 , C12N2800/22
摘要： 本发明涉及一种哺乳动物细胞表达的黄花蒿主要致敏蛋白Art a1，编码基因、表达方式、纯化工艺，以及重组蛋白检测方法和应用。黄花蒿致敏蛋白本身属于植物蛋白，在现有常用的原核或真核表达系统中表达都有一定困难，也并见相关文献公开；而传统的提取方式常存在着成分复杂、质量难以控制、易受到外源性有毒物质、病原体微生物的污染等问题。为此，本发明提供了如SEQ ID NO：1所示的重组Art a1的编码基因，以及专为此设计的表达、纯化、重组蛋白检测方法及应用，与现有技术相比，本发明的重组Art a1具有较高的表达量及活性，同时也为该药品开发过程中细胞株开发、工艺优化、临床前和临床研究以及工业化生产建立了基础。
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公开(公告)号：CN108265044A
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201711379689.3
申请日：2017-12-20
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
CPC分类号： C12N9/78 , A61K38/00 , C12Y305/03006
摘要： 本发明涉及一种聚乙二醇定点修饰的精氨酸脱亚胺酶及其制备方法与应用，所述聚乙二醇在ADI的1或2个亚基的N端氨基上偶联，所述聚乙二醇分子量为30-40kDa，聚乙二醇为分支型。本发明提供的聚乙二醇定点修饰的ADI，在具有结构稳定均一等优点的基础上，更大程度的提高了其生物活性。并且，本发明所采用的ADI为基因工程重组表达得到，质量更可控，来源更有保障。这些都使得本发明中的聚乙二醇定点修饰的ADI各方面效果优于目前市场上同类产品，因此本发明的聚乙二醇定点修饰的ADI更具有药用前景及产业化生产可能性。
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公开(公告)号：CN103710367B
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201310718972.X
申请日：2013-12-23
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
摘要： 本发明提供了一种重组人激肽释放酶1(Homo sapiens kallikrein1，hKLK1)及其编码基因、表达、纯化和包涵体复性方法，属于生物基因工程领域。KLK1对心脑血管疾病、糖尿病并发症等多种疾病均具有治疗作用，但是动物组织及人体液中提取的KLK1产量较低，且可能涉及安全性问题。本发明采用大肠杆菌表达系统对密码子优化后的重组人激肽释放酶1基因进行异源表达。此外，针对原核表达体系中的人激肽释放酶1多以包涵体的形式表达的问题，本发明还提供了重组人激肽释放酶1包涵体复性和纯化的方法，经一步纯化人激肽释放酶1纯度达到95%以上，并且具有较高活力。
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公开(公告)号：CN105802947A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201410837314.7
申请日：2014-12-29
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
摘要： 本发明公开了一种PEG修饰蛋白及纯化的工艺过程，包括：将蛋白质溶于缓冲溶液1中，将蛋白溶液吸入离子交换层析柱，用平衡缓冲液平衡、用洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱蛋白等步骤。和传统的PEG修饰及纯化工艺比较，本发明提供的工艺步骤更简单，产物收率更高，且对蛋白的活性影响较小。
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公开(公告)号：CN103641917B
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201310662363.7
申请日：2013-12-09
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
摘要： 本发明提供一种新的可与CD26特异性结合的高亲和力全人源抗体、制备方法及其应用，属于基因工程抗体技术领域。CD26是一种普遍存在的多功能Ⅱ型跨膜糖蛋白，具有多种生物学功能，可以和多种蛋白相互作用，如ADA、CD45、FAP-alpha等。本发明提供的一种来源于人源的抗体或其片段，所述抗体或其片段特异性结合人CD26，优选特异性结合CD26胞外区，所述抗体或其片段的氨基酸序列包括选自含有SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8一组序列的6个互补决定区的任何区域的单克隆抗体或其片段或其片段的偶联物，或通过氨基酸置换或者修饰得到的氨基酸序列。本发明得到的抗CD26单链抗体与CD26具有高特异性结合，同时也可以明显抑制肿瘤细胞的增殖。
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公开(公告)号：CN103059124B
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201210593705.X
申请日：2012-12-31
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
IPC分类号： C07K14/57 , C12N15/23 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12P21/02 , C07K1/14 , A61K38/21 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12R1/19
摘要： 本发明提供了一种重组猪干扰素γ及其编码基因、表达、纯化和包涵体复性方法，属于生物基因工程领域。重组猪干扰素γ作为一种非特异性广谱抗病毒生物制剂在兽药领域具有广阔的药用前景，但是与大多基因工程兽药一样，猪干扰素γ也存在着产量不足、价格昂贵、质量参差不齐等问题。本发明采用大肠杆菌表达系统对密码子优化后的重组猪干扰素γ基因进行异源表达。此外，针对原核表达体系中的猪干扰素γ多以包涵体的形式表达的问题，本发明还提供了重组干扰素γ包涵体纯化和复性的方法，使得制得的重组干扰素γ具有较高活力，达到了产业化生产的标准。
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公开(公告)号：CN103265637A
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201310222553.7
申请日：2013-06-04
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
摘要： 本发明提供了一种重组猪IL4-Fc融合蛋白及其编码基因、表达、纯化和包涵体复性方法，属于生物基因工程领域。猪IL4可用于猪的慢性传染病和寄生虫病的治疗，还可进一步推广应用至猪的过敏反应等与免疫相关的疾病防治中。然而，猪IL4存在血浆中清除速度快、产业化成本高的缺陷。本发明采用大肠杆菌原核表达体系提供了一种长效的重组猪IL4-Fc融合蛋白。其中，猪IL4部分为猪IL4胞外区的全部序列，Fc片段部分包括抗体的铰链区、CH2区和CH3区，二者之间为直接融合。本发明提供的重组猪IL4-Fc融合蛋白，不仅提高IL4的生物活性，而且极大的延长了其半衰期，为低成本大量表达及其产业化提供了保障。
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公开(公告)号：CN103087200A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310030102.3
申请日：2013-01-28
申请人： 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 , 常州京森生物医药研究所有限公司
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N7/01 , A61K38/21 , A61K47/48 , A61P31/12 , A61P37/02 , A61P35/00 , A23K1/16
摘要： 本发明提供了一种依据家蚕反应系统优化的猪IFNγ-Fc融合蛋白及其编码基因和利用家蚕生物反应器表达猪IFNγ-Fc融合蛋白的方法，属于生物基因工程领域。猪干扰素γ作为一种非特异性广谱抗病毒生物制剂在兽药领域具有广阔的药用前景，但是与大多基因工程兽药一样，猪干扰素γ也存在着产量不足、价格昂贵、质量参差不齐、作用时间较短等问题。本发明利用家蚕表达体系对优化后的猪IFNγ-Fc融合蛋白基因进行表达，得到了表达效率较高活性较强的目的蛋白。此外，Fc片段的添加延长了猪干扰素γ的作用时间，增强了整体免疫调节作用，且便于后期纯化，从而使采用基因工程方法大规模生产猪IFNγ-Fc融合蛋白制剂成为可能，也为开发含有该融合蛋白的新型饲料创造了条件。
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