单链接头预连接方法、高通量测序文库的建库方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN116287124A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310589723.9

    申请日:2023-05-24

    发明人: 徐炜 孙长斌

    摘要: 本发明提供了一种单链接头预连接方法、高通量测序文库的建库方法及试剂盒。其中,该单链接头预连接方法包括:a)利用末端转移酶将样本DNA的3'端进行延伸形成外延的单链DNA结构,获得延伸DNA;b)在夹板的作用下,将延伸DNA和单链接头进行连接,获得预连接缺刻DNA,单链DNA结构3'端和单链接头的5'端相邻并存在缺刻;c)利用DNA连接酶以磷酸二酯键连接缺刻,获得单链接头预连接DNA;其中,单链接头从5'端至3'端依次包括:夹板互补区域、条形码区域和测序接头区域。能够解决现有技术中对于特殊形态的DNA结构基于双链DNA的建库方法难以进行标记建库的问题,实现多样本同步建库,适用于高通量测序领域。