公开(公告)号：CN103588874B

公开(公告)日：2015-06-17

申请号：CN201310557164.X

申请日：2013-11-11

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

发明人： 梁米芳 ,  毕胜利 ,  孙丽娜 ,  郭瑜 ,  刘洋 ,  张福顺 ,  李川 ,  李德新

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  C12N15/866 ,  C12N5/10 ,  A61K39/42 ,  A61K48/00 ,  A61P31/20 ,  A61P1/16 ,  G01N33/569

摘要： 本发明公开了一种人源抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体、其制备方法及应用。本发明运用噬菌体表面呈现技术，采集乙肝疫苗免疫后具有高滴度表面抗体者的外周血淋巴细胞，通过基因工程手段构建了人源抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体文库，并筛选获得特异抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体Fab段。获得的Fab段抗体命名为HBFab21。HBFab21轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明不仅为阻止乙肝病毒感染，同时也为其治疗的研究奠定了基础；以此为基础，可以获得具有中和乙肝病毒感染的抗体产物，制成临床上用于乙肝病毒相关肝病的药物或诊断试剂中的应用。

公开(公告)号：CN102863527B

公开(公告)日：2014-03-19

申请号：CN201210167834.2

申请日：2012-05-25

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

发明人： 梁米芳 ,  毕胜利 ,  孙丽娜 ,  郭瑜 ,  刘洋 ,  张福顺 ,  李川 ,  李德新

IPC分类号： C07K16/08

摘要： 本发明提供了利用噬菌体表面展示技术筛选获得的人源抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体HBIgG03(轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示)和HBIgG12(轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示)。所述抗体能够特异性识别乙肝病毒表面抗原，可与乙肝病毒表面抗原发生显著的酶联免疫反应且具有抗乙肝病毒感染的中和活性功能。此外，可将本发明的抗体制成预防和治疗乙肝病毒相关肝病的特异性抗体药物，从而在临床中用于预防和治疗由乙肝病毒引起的肝病。

公开(公告)号：CN102337289A

公开(公告)日：2012-02-01

申请号：CN201110302066.2

申请日：2011-09-30

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

发明人： 李德新 ,  张福顺 ,  梁米芳 ,  张硕 ,  张全福 ,  李川

IPC分类号： C12N15/70 ,  A61K39/125 ,  A61P31/14 ,  C12R1/19

CPC分类号： Y02A50/472

摘要： 本发明提供了一种肠道病毒71型VP1蛋白的原核表达方法，其是将肠道病毒71型的VP1基因序列克隆至原核表达载体中，并转化至大肠杆菌中进行诱导表达，然后对表达的VP1蛋白进行纯化和复性。将获得的VP1蛋白与免疫佐剂配伍制备疫苗。本发明首次利用大肠杆菌表达系统表达基因工程重组VP1蛋白，具有操作简单，成本低，易于实现大规模生产等优点。通过将原核表达的基因工程重组VP1蛋白与壳聚糖佐剂配伍后免疫小鼠，并评价其免疫学效果，初步证明了VP1蛋白不仅可以诱导产生体液免疫保护性反应，还可以诱导产生细胞免疫反应，为进一步研制人用基因工程重组VP1蛋白和灭活全病毒口服疫苗奠定了基础。

公开(公告)号：CN103588874A

公开(公告)日：2014-02-19

申请号：CN201310557164.X

申请日：2013-11-11

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

发明人： 梁米芳 ,  毕胜利 ,  孙丽娜 ,  郭瑜 ,  刘洋 ,  张福顺 ,  李川 ,  李德新

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  C12N15/866 ,  C12N5/10 ,  A61K39/42 ,  A61K48/00 ,  A61P31/20 ,  A61P1/16 ,  G01N33/569

摘要： 本发明公开了一种人源抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体、其制备方法及应用。本发明运用噬菌体表面呈现技术，采集乙肝疫苗免疫后具有高滴度表面抗体者的外周血淋巴细胞，通过基因工程手段构建了人源抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体文库，并筛选获得特异抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体Fab段。获得的Fab段抗体命名为HBFab21。HBFab21轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明不仅为阻止乙肝病毒感染，同时也为其治疗的研究奠定了基础；以此为基础，可以获得具有中和乙肝病毒感染的抗体产物，制成临床上用于乙肝病毒相关肝病的药物或诊断试剂中的应用。

公开(公告)号：CN102863527A

公开(公告)日：2013-01-09

申请号：CN201210167834.2

申请日：2012-05-25

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

发明人： 梁米芳 ,  毕胜利 ,  孙丽娜 ,  郭瑜 ,  刘洋 ,  张福顺 ,  李川 ,  李德新

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  A61K39/42 ,  A61P1/16 ,  A61P31/20 ,  G01N33/569

摘要： 本发明提供了利用噬菌体表面展示技术筛选获得的人源抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体HBIgG03(轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示)和HBIgG12(轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示)。所述抗体能够特异性识别乙肝病毒表面抗原，可与乙肝病毒表面抗原发生显著的酶联免疫反应且具有抗乙肝病毒感染的中和活性功能。此外，可将本发明的抗体制成预防和治疗乙肝病毒相关肝病的特异性抗体药物，从而在临床中用于预防和治疗由乙肝病毒引起的肝病。