利用重组载体在丝状真菌中筛选外源基因的方法

    公开(公告)号:CN105463009A

    公开(公告)日:2016-04-06

    申请号:CN201510991914.3

    申请日:2015-12-28

    CPC classification number: C12N15/80 C12Q1/6888 C12Q1/6897 C12Q2600/158

    Abstract: 本发明公开了一种重组载体,其包括启动子、外源基因、荧光蛋白和终止子,所述外源基因位于启动子的下游,位于终止子或荧光蛋白的上游;本发明还公开了重组载体在里氏木霉中表达目的蛋白及代谢途径构建中的应用。以及利用重组载体在丝状真菌中快速筛选外源基因的方法,以判定待测外源基因是否成功表达。该方法比传统的筛选方法大大缩短了筛选时间,提高了筛选的工作效率,同时,筛选过程中获得的可表达外源基因的转化子可通过复筛,获得高产量纯系转化子,以适应实际生产的需要;通过该方法还可以建立一套检测外源基因表达以及高表达量纯系转化子的快速筛选系统,该系统可以有效加快丝状真菌的遗传改造进程,促进构建丝状真菌细胞工厂的发展。

    一种β-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶突变体及应用

    公开(公告)号:CN104531637B

    公开(公告)日:2018-06-01

    申请号:CN201410603781.3

    申请日:2014-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种组合物,其含有一种酶,该酶具有葡萄糖苷酶的活性,在纤维素降解中提供降解的功能,该酶为如下(a)或(b)的蛋白质:(a)其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有葡萄糖苷酶活性的由(a)衍生的蛋白质。编码酶的DNA分子。重组载体,其含有DNA分子和与其连接的用于表达的调节序列。宿主细胞,其含有DNA分子或重组载体。本发明的氨基酸序列SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7的β‑葡萄糖苷酶突变体,与β‑葡萄糖苷酶(氨基酸序列SEQ ID NO:1)相比,热稳定性提高,在酶系复配中能够提高复配酶液整体水解率。

    利用重组载体在丝状真菌中筛选外源基因的方法

    公开(公告)号:CN105463009B

    公开(公告)日:2019-03-22

    申请号:CN201510991914.3

    申请日:2015-12-28

    Abstract: 本发明公开了一种重组载体,其包括启动子、外源基因、荧光蛋白和终止子,所述外源基因位于启动子的下游,位于终止子或荧光蛋白的上游;本发明还公开了重组载体在里氏木霉中表达目的蛋白及代谢途径构建中的应用。以及利用重组载体在丝状真菌中快速筛选外源基因的方法,以判定待测外源基因是否成功表达。该方法比传统的筛选方法大大缩短了筛选时间,提高了筛选的工作效率,同时,筛选过程中获得的可表达外源基因的转化子可通过复筛,获得高产量纯系转化子,以适应实际生产的需要;通过该方法还可以建立一套检测外源基因表达以及高表达量纯系转化子的快速筛选系统,该系统可以有效加快丝状真菌的遗传改造进程,促进构建丝状真菌细胞工厂的发展。

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