公开(公告)号：CN116970622A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202210430596.3

申请日：2022-04-22

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 申晓林 ,  付欢欢 ,  童贻刚 ,  袁其朋 ,  王佳 ,  孙新晓

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/65 ,  C12N15/64 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/42 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种稳定遗传筛选元件的构建方法，包括先在宿主菌内敲除编码抗毒素MazE降解蛋白clpAP的基因clpP；然后再导入MazE补充质粒，同时敲除基因组中的基因mazE，即获得所述稳定遗传筛选元件。本发明还提供一种利用上述方法构建的稳定遗传筛选元件。本发明还提供一种生产目的产物的工程菌，包括上述稳定遗传筛选元件，该元件中导入了含有目的基因及mazE基因的质粒。本发明还提供一种上述工程菌在发酵培养中的应用。上述筛选元件及工程菌实现替代抗生素的筛选功能，避免了抗生素添加导致的污染以及成本增加，同时可以稳定传代，达到高效筛选的目的，对生物合成的工业化生产具有较大的应用前景。

公开(公告)号：CN118562841A

公开(公告)日：2024-08-30

申请号：CN202410782988.5

申请日：2024-06-18

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 申晓林 ,  童贻刚 ,  付欢欢 ,  袁其朋 ,  王佳 ,  孙新晓

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/113 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/6897 ,  C02F3/34 ,  C12R1/19 ,  C02F101/30

Abstract: 构建强度范围广泄露表达低的无机磷响应元件库的方法及其应用涉及基因工程技术领域。本发明通过对结构最简单的无机磷启动子PphoA进行结构功能分析，改变上游元件的长度和与结合位点的距离，偶联RBS序列改造，理性设计了32个强度范围在4286‑95740之间梯度分布且泄露表达较低的无机磷响应元件。将本发明的元件应用到高磷条件下藻毒素的降解中，在24小时内实现了87.1％的降解；在低磷条件下，24小时内实现了大肠杆菌细胞90.7％的裂解，确保了改造系统的生物安全性。