一株三七素生产菌株及其构建和应用

    公开(公告)号:CN118562695A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410656501.9

    申请日:2024-05-24

    Abstract: 本发明提供了一株三七素生产菌株及其构建和应用,特征在于其特殊的宿主菌和转入该宿主菌的质粒载体。在上述质粒载体中,包含草酰辅酶A连接酶编码基因AAE、三七素合成酶编码基因BAHD以及乙醛酸氧化酶gloxdh。所述宿主菌以L‑2,3‑二氨基丙酸生产菌为原始菌株,同时,敲除了阻遏异柠檬酸裂解酶编码基因的iclR基因,过表达了异柠檬酸裂解酶的编码基因aceA和柠檬酸合酶编码基因gltA,弱化了α‑酮戊二酸合成酶的编码基因icdA。通过上述改造策略组合,获得了高效合成三七素的大肠杆菌工程菌。

    稳定遗传筛选元件及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN116970622A

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202210430596.3

    申请日:2022-04-22

    Abstract: 本发明提供了一种稳定遗传筛选元件的构建方法,包括先在宿主菌内敲除编码抗毒素MazE降解蛋白clpAP的基因clpP;然后再导入MazE补充质粒,同时敲除基因组中的基因mazE,即获得所述稳定遗传筛选元件。本发明还提供一种利用上述方法构建的稳定遗传筛选元件。本发明还提供一种生产目的产物的工程菌,包括上述稳定遗传筛选元件,该元件中导入了含有目的基因及mazE基因的质粒。本发明还提供一种上述工程菌在发酵培养中的应用。上述筛选元件及工程菌实现替代抗生素的筛选功能,避免了抗生素添加导致的污染以及成本增加,同时可以稳定传代,达到高效筛选的目的,对生物合成的工业化生产具有较大的应用前景。

    生产肌醇的工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN112646760B

    公开(公告)日:2023-02-14

    申请号:CN201910957229.7

    申请日:2019-10-10

    Abstract: 本发明提供了一种生产肌醇的工程菌,包括宿主菌和转入所述宿主菌的质粒载体,所述质粒载体中导入了编码肌醇‑1‑磷酸合成酶的基因,或同时导入了编码肌醇‑1‑磷酸合成酶的基因和过表达编码肌醇单磷酸酶的基因。本发明还提供了一种上述生产肌醇的工程菌的构建方法和应用。上述工程菌在利用上述外源酶的同时过表达内源酶,并结合RED重组进行基因调控,逐步提高肌醇的产量以及碳源收率,从而实现以蔗糖、葡萄糖和甘油等简单碳源为源头,通过生产与生长相互协调,实现宿主的快速生长和肌醇的高效生产。

    高效生物合成苯丙酮酸及4-羟基苯丙酮酸衍生物的方法

    公开(公告)号:CN115449526A

    公开(公告)日:2022-12-09

    申请号:CN202211147985.1

    申请日:2022-09-20

    Abstract: 本发明公开了高效生物合成苯丙酮酸衍生物的方法,涉及的苯丙酮酸衍生物包括苯甲醇、苯乙醇、尿黑酸和酪醇。合成三种产物的途径包含多种酶:分支酸变位酶(pheA),4‑羟基扁桃酸合酶(hmaS),S‑扁桃酸脱氢酶(mdlB),苯甲酰甲酸脱羧酶(mdlC),氨基酸脱羧酶(aro10),乙醇脱氢酶(adh6),4‑羟基苯丙酮酸双加氧酶(HPPD),和解除反馈抑制的预苯酸脱氢酶(tyrAfbr)。首先以苯丙酮酸作为终产物对野生大肠杆菌进行改造,通过阻断竞争途径(苯丙氨酸、酪氨酸合成途径)和调整中心碳代谢构建了高产苯丙酮酸的宿主,然后将三种产物的合成途径导入宿主,实现了三种苯丙酮酸衍生物以葡萄糖为碳源的高效从头生物合成。本发明极具工业生产前景。

    生产α-熊果苷的工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN112646762A

    公开(公告)日:2021-04-13

    申请号:CN201910968225.9

    申请日:2019-10-12

    Abstract: 本发明提供了一种生产α‑熊果苷的工程菌,包括在宿主内共表达编码α‑熊果苷合成酶、异分支酸丙酮酸裂解酶、邻氨基苯甲酸5‑羟化酶和龙胆酸脱羧酶的基因,其中,所述α‑熊果苷合成酶为α‑淀粉酶、α‑葡萄糖苷酶、淀粉蔗糖酶或其任意组合。上述工程菌还包括过表达来自大肠杆菌中的莽草酸激酶、丙酮酸激酶、转酮酶和3‑脱氧‑7‑磷酸庚酸合酶和异分支酸合成酶基因来实现α‑熊果苷的增产。本发明还提供一种上述生产α‑熊果苷的工程菌的构建方法和应用。利用上述生产α‑熊果苷的工程菌,以麦芽糖和/或甘油等碳源来生产α‑熊果苷,实现了α‑熊果苷的从头合成。

    生产β-熊果苷的工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN112646761A

    公开(公告)日:2021-04-13

    申请号:CN201910968220.6

    申请日:2019-10-12

    Abstract: 本发明提供了一种生产β‑熊果苷的工程菌,包括在宿主内共表达编码异分支酸合成酶、异分支酸丙酮酸裂解酶、邻氨基苯甲酸5‑羟化酶、龙胆酸脱羧酶和葡糖基转移酶的基因。上述工程菌还包括在所述宿主内过表达编码莽草酸激酶、丙酮酸激酶、转酮酶、3‑脱氧‑7‑磷酸庚酸合酶、葡萄糖磷酸变位酶和UTP‑葡萄糖‑1‑磷酸尿苷酰基转移酶的基因来实现β‑熊果苷的增产。本发明还提供一种上述生产β‑熊果苷的工程菌的构建方法和应用。利用上述生产β‑熊果苷的工程菌,以葡萄糖和/或甘油等碳源来生产β‑熊果苷,实现了β‑熊果苷的从头合成。

    宿主重组细胞、阿魏酸生物合成工程菌及应用

    公开(公告)号:CN118726213A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202310338274.0

    申请日:2023-03-31

    Abstract: 本发明提供了一种宿主重组细胞,包括宿主菌和导入所述宿主菌的表达SAM的再生酶基因,所述SAM的再生酶为S‑腺苷高半胱氨酸核酸酶和S‑核苷高半胱氨酸裂解酶。本发明还提供一种阿魏酸生物合成工程菌,包括上述宿主重组细胞和导入该宿主重组细胞中的表达阿魏酸合成的相关酶基因。进一步,上述宿主重组细胞中还导入所述大肠杆菌的中共表达的关键羟基供体FADH2的再生酶基因。本发明还提供一种上述工程菌的应用,利用上述工程菌发酵培养阿魏酸。上述工程菌中的宿主细胞中导入甲基供体和羟基供体,提高了阿魏酸生物合成产量,有利于工业化生产阿魏酸。

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