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公开(公告)号：CN114807256B
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202210439130.X
申请日：2022-04-25
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12P7/6432 , C12N1/14 , C12N1/38 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及发酵领域，公开了一种海藻酸钠和阿魏酸在提高产油微生物的EPA产量中的应用和微生物油脂的制备方法。其中，提高产油微生物的EPA产量的方法包括：将产油微生物接入含有海藻酸钠的培养基中进行发酵，并在发酵过程中加入阿魏酸。海藻酸钠和阿魏酸的添加能够有效提高EPA产量。
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公开(公告)号：CN114561434B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210328681.9
申请日：2022-03-30
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12P7/6432 , C12P7/6434 , C12N1/15 , C12N15/79 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N1/38 , C12R1/645
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种裂殖壶菌发酵生产EPA和DHA的方法，该方法是以裂殖壶菌为生产菌株，在发酵培养基中添加恩西地平，发酵生产多不饱和脂肪酸。本发明通过激活裂殖壶菌部分ELO/DES途径，提高裂殖壶菌发酵产物中EPA和DHA含量，采用裂殖壶菌工程菌EDG为生产菌株，使发酵产物中EPA含量提高8.73倍，DHA含量提高1.15倍。
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公开(公告)号：CN114426985B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202111401206.1
申请日：2021-11-23
申请人： 南京师范大学
摘要： 本发明公开了一种农杆菌转化裂殖壶菌的方法和应用，所述转化方法是将外源基因导入农杆菌，利用农杆菌将外源基因导入裂殖壶菌，使裂殖壶菌获得相关外源基因的功能。本发明将转入G418抗性基因表达盒的农杆菌AGL‑1与裂殖壶菌HX‑308共培养，使得外源基因成功转化到裂殖壶菌HX‑308，并实现基因的定点敲除。本发明实验操作非常简单，有效节约了时间和成本，不仅可以实现农杆菌转化裂殖壶菌，更重要的可以实现基因敲除，通过基因敲除，可以在裂殖壶菌体内构建了一套完整的遗传操作系统。本发明使用较短的同源臂即可完成定点整合，在一般的真菌转化中可能需要2‑3kb的同源臂，为简化裂殖壶菌的遗传操作奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112662569B
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202011563470.0
申请日：2020-12-25
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N1/14 , C12P7/6434 , C12P23/00 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了一种吗啡啉在控制裂殖壶菌发酵过程中不皂化物含量、提高DHA油脂的含量中的应用，本发明通过在裂殖壶菌发酵过程中外源添加吗啡啉来降低裂殖壶菌发酵过程中甾醇含量且提高油脂含量，并通过裂殖壶菌的细胞生长的生物量、油脂产量以及不皂化物含量指标来确定吗啡啉的最佳添加浓度，与未添加相比，添加1.8g/L的吗啡啉的甾醇含量降低了64.86％，油脂产量提高了67.51％，DHA含量提高了25.5％，虾青素含量提高了85％，显著提高了裂殖壶菌产DHA油脂和虾青素的含量。本发明首次将吗啡啉应用到裂殖壶菌不皂化物含量的调控中，为提高裂殖壶菌中油脂的含量提供了新的思路，在工业化生产方面存在巨大的潜力。
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公开(公告)号：CN112592843B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN202011574323.3
申请日：2020-12-25
申请人： 南京师范大学
摘要： 本发明公开了一种生产α‑蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用，所述重组解脂耶氏酵母菌是在解脂耶氏酵母基因组中插入优化的α‑蛇麻烯合酶编码基因ACHS2和tHMGR编码基因后得到。本发明重组解脂耶氏酵母菌能够高效合成α‑蛇麻烯，构建方法高效，操作简单，此外本发明提供的收集产物的方法采用边发酵边萃取的方法，及时的将生产的α‑蛇麻烯萃取至有机相中，缓解了胞内溶解α‑蛇麻烯的压力，有效提高α‑蛇麻烯的产量，为人工细胞合成α‑蛇麻烯奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112481318B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202011564867.1
申请日：2020-12-25
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12P7/6434 , C12P23/00 , C12N1/14 , C12N1/38 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了一种儿茶素在提高裂殖壶菌DHA油脂产量中的应用，通过利用儿茶素培养裂殖壶菌提高油脂产量，本发明通过在裂殖壶菌发酵体系中外源添加少量特定比例的儿茶素以抑制PEPC酶的产生，从而扰动代谢网络减少碳流向脂质的生物合成，可有效提高裂殖壶菌发酵产生油脂的含量，其中DHA产量提高70％以上，DHA占生物量的比提高40％以上，总油脂提高70％以上，β胡萝卜素产量也显著提高。本发明通过简单的发酵调控，可显著提高微生物裂殖壶菌中DHA油脂、β胡萝卜素含量，使生产成本降低，具有经济效益。
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公开(公告)号：CN114774484B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202210507438.3
申请日：2022-05-10
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12P7/6463 , C12P7/6472 , C12N1/14 , C12N1/38 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及微生物发酵领域，公开了一种提高油脂中多不饱和脂肪酸含量的方法和微生物油脂的制备方法。提高油脂中多不饱和脂肪酸含量的方法包括：将产油微生物接入添加有调控因子的培养基中进行培养；所述调控因子含有主调控剂，所述主调控剂选自丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、特丁基对苯二酚和对羟基苯甲酸酯中的至少一种。微生物油脂的制备方法包括：将产油微生物采用上述的方法进行培养得到培养液，将所述培养液进行破壁、提取。本发明提供的方法能够有效提高微生物油脂中多不饱和脂肪酸的含量，简单高效且成本低。
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公开(公告)号：CN117210341A
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202310946666.5
申请日：2023-07-31
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N1/15 , C12N15/80 , C12N15/113 , C12P5/02 , C12R1/645
摘要： 本发明属于因工程领域和生物化工技术领域，公开了一种高效生产角鲨烯的重组裂殖壶菌基因工程菌株，所述工程菌株是通过在裂殖壶菌野生型中更换不同强度的启动子筛选获得的。本发明构建的重组裂殖弧菌的基因组中包含启动子P3626的重组裂殖弧菌，通过增强角鲨烯合成酶基因SQS4098，增强角鲨烯合成途径的效果最佳，从而提高重组裂殖壶菌中角鲨烯的积累量，进而提高角鲨烯产量，产率较野生型裂殖壶菌提高2.79倍。
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公开(公告)号：CN116622514A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202310899251.7
申请日：2023-07-21
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N1/12 , C12N1/14 , C12N1/38 , C12P7/6434 , C12P7/6427 , C12P7/6432 , C12R1/645 , C12R1/89
摘要： 本发明涉及微生物发酵领域，公开了一种提高微生物菌体和/或微生物油脂中多不饱和脂肪酸含量的调控方法及应用。该调控方法包括：将所述产油微生物进行发酵培养，在所述发酵培养的过程中添加调节剂，其中，所述调节剂选自替格列卡、马来酸哌克昔林、丙二酰辅酶A锂盐、帕莫酸甲酯、卡巴环素、哌克昔林、乙莫克舍和乙莫克舍钠盐中的至少一种。本发明还提供微生物菌粉的制备方法以及微生物油脂的制备方法。本发明提供的调控方法能够促进微生物生长过程中甘油三酯的重排，提高油脂产量和油脂中多不饱和脂肪酸的含量。
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公开(公告)号：CN116179584A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211125899.0
申请日：2022-09-16
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N15/74 , C12N15/54 , C12N15/66 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/38 , C12P7/6432 , C12P7/6434 , C12R1/19 , C12R1/01
摘要： 本发明公开了一种高效生产EPA的裂殖壶菌基因工程菌株、方法和应用，所述工程菌株是通过在裂殖壶菌野生型中过表达MetE‑like结构域中的基因AT、KS或AT‑KS获得的；其中，所述基因AT的基因序列为SEQIDNO.13，所述基因KS的基因序列为SEQIDNO.14，所述基因AT‑KS的基因序列为SEQIDNO.15。本发明通过在裂殖壶菌野生型中过表达MetE‑like结构域中的AT、KS和AT‑KS基因获得裂殖壶菌基因工程菌株，可以明显提高EPA积累，这为该菌株工业化定向合成EPA提供了基础。
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