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公开(公告)号：CN113462623B
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202110572350.5
申请日：2021-05-25
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种微生物发酵法制备D‑丙氨酸的方法。本发明首先构建一株生产D‑丙氨酸的基因工程菌，所述工程菌以谷氨酸棒杆菌ATCC 13032为出发菌株，通过敲除丙氨酸消旋酶基因alr和L‑丙氨酸转氨酶alaT；过表达meso‑二氨基庚二酸脱氢酶编码基因；敲除iolR阻遏蛋白基因同时基因组整合表达葡萄糖激酶基因glk1；整合来自大肠杆菌的edd和eda基因获得。该菌株以葡萄糖为底物直接发酵法生产D‑型氨基酸，成本低，技术简单，5L发酵罐中D‑丙氨酸产量能够达到50‑60g/L。另外，发酵法高效合成D‑型氨基酸属于开创性研究，借此方法，可以对发酵法进行无限扩展，低成本、高效率合成多种D‑型氨基酸。
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公开(公告)号：CN113462623A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110572350.5
申请日：2021-05-25
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种微生物发酵法制备D‑丙氨酸的方法。本发明首先构建一株生产D‑丙氨酸的基因工程菌，所述工程菌以谷氨酸棒杆菌ATCC 13032为出发菌株，通过敲除丙氨酸消旋酶基因alr和L‑丙氨酸转氨酶alaT；过表达meso‑二氨基庚二酸脱氢酶编码基因；敲除iolR阻遏蛋白基因同时基因组整合表达葡萄糖激酶基因glk1；整合来自大肠杆菌的edd和eda基因获得。该菌株以葡萄糖为底物直接发酵法生产D‑型氨基酸，成本低，技术简单，5L发酵罐中D‑丙氨酸产量能够达到50‑60g/L。另外，发酵法高效合成D‑型氨基酸属于开创性研究，借此方法，可以对发酵法进行无限扩展，低成本、高效率合成多种D‑型氨基酸。
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公开(公告)号：CN112779204A
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN202110103820.3
申请日：2021-01-26
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种生产L‑高丝氨酸的基因工程菌及其应用，属于代谢工程领域。所述菌株以Escherichia coli MG1655为宿主，敲除乳糖操纵子阻遏蛋白编码基因lacI，弱化编码高丝氨酸激酶基因thrB，并通过系统代谢工程策略包括增强高丝氨酸合成通量、提高NADPH的再生以及精准调控高丝氨酸输出，最终构建了一株非营养缺陷型，无需诱导剂，不携带质粒的高丝氨酸高产菌株。该菌株经过48h发酵，L‑高丝氨酸产量达125.7g/L，生产强度达2.62g/L/h。该方法采用的发酵工艺简单，无需额外添加营养物质，不携带质粒，无需诱导，易于控制，更加稳定，生产成本低，有利于工业化生产的推广和应用。
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公开(公告)号：CN112779204B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202110103820.3
申请日：2021-01-26
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种生产L‑高丝氨酸的基因工程菌及其应用，属于代谢工程领域。所述菌株以Escherichia coli MG1655为宿主，敲除乳糖操纵子阻遏蛋白编码基因lacI，弱化编码高丝氨酸激酶基因thrB，并通过系统代谢工程策略包括增强高丝氨酸合成通量、提高NADPH的再生以及精准调控高丝氨酸输出，最终构建了一株非营养缺陷型，无需诱导剂，不携带质粒的高丝氨酸高产菌株。该菌株经过48h发酵，L‑高丝氨酸产量达125.7g/L，生产强度达2.62g/L/h。该方法采用的发酵工艺简单，无需额外添加营养物质，不携带质粒，无需诱导，易于控制，更加稳定，生产成本低，有利于工业化生产的推广和应用。
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