公开(公告)号：CN106967159A

公开(公告)日：2017-07-21

申请号：CN201710149680.7

申请日：2017-03-14

申请人： 莲花健康产业集团股份有限公司 ,  天津科技大学

发明人： 李燕军 ,  陈宁 ,  韩洪军 ,  袁启发 ,  高立栋 ,  张顺棠 ,  赵岩 ,  黄龙辉 ,  王婷 ,  谢希贤 ,  张成林 ,  徐庆阳

IPC分类号： C07K14/34 ,  C12N15/77 ,  C12N1/21 ,  C12R1/15

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及肌醇转运蛋白iolT1和iolT2在木糖转运中的新应用的专利申请。在谷氨酸棒状杆菌中，肌醇转运蛋白iolT1和iolT2能够转运肌醇和葡萄糖，同时具有转运木糖的能力；该转运能力与谷氨酸棒状杆菌中的PTS系统（PtsG）的木糖转运能力相当，且与PTS系统对木糖的转运具有互补的作用，并且其对木糖的转运不受葡萄糖转运的抑制。该发现将有利于高效利用木糖的谷氨酸棒状杆菌工程菌株的构建，尤其有益于构建同步利用葡萄糖和木糖的工程菌株。这将为开发高效利用木质纤维素水解液等原料的基因工程菌株奠定了良好的基础，具有较好的开发利用前景。

公开(公告)号：CN106520652A

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201611067957.3

申请日：2016-11-29

申请人： 天津科技大学 ,  莲花健康产业集团股份有限公司

发明人： 李燕军 ,  陈宁 ,  韩洪军 ,  袁启发 ,  高立栋 ,  张顺棠 ,  李娟 ,  谢希贤 ,  张成林 ,  徐庆阳 ,  范晓光 ,  马倩

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P13/22 ,  C12R1/15

CPC分类号： C12N9/1077 ,  C12N9/88 ,  C12N9/90 ,  C12P13/227 ,  C12Y204/02018 ,  C12Y401/01048 ,  C12Y402/0102 ,  C12Y503/01024

摘要： 本发明属于微生物育种和发酵工程领域，具体涉及一株谷氨酸棒杆菌及其合成色氨酸的关键基因。所述高产菌株为是在谷氨酸棒杆菌CGMCC No.12302的基础上通过基因工程手段，对该菌株的基因组进行编辑，将色氨酸操纵子上trpDCB的突变位点整合到CGMCC No.12302的基因组上得到的。本发明一方面为色氨酸合成有关基因提供了新的突变位点，为色氨酸的生物合成提供了新的研究方向；另一方面，通过摇瓶发酵发现，所得菌株的色氨酸产量约为原始的3.4倍，极大地提高了菌株产色氨酸的性能。

公开(公告)号：CN106520652B

公开(公告)日：2019-07-05

申请号：CN201611067957.3

申请日：2016-11-29

申请人： 天津科技大学 ,  莲花健康产业集团股份有限公司

发明人： 李燕军 ,  陈宁 ,  韩洪军 ,  袁启发 ,  高立栋 ,  张顺棠 ,  李娟 ,  谢希贤 ,  张成林 ,  徐庆阳 ,  范晓光 ,  马倩

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P13/22 ,  C12R1/15

摘要： 本发明属于微生物育种和发酵工程领域，具体涉及一株谷氨酸棒杆菌及其合成色氨酸的关键基因。所述高产菌株为是在谷氨酸棒杆菌CGMCC No.12302的基础上通过基因工程手段，对该菌株的基因组进行编辑，将色氨酸操纵子上trpDCB的突变位点整合到CGMCC No.12302的基因组上得到的。本发明一方面为色氨酸合成有关基因提供了新的突变位点，为色氨酸的生物合成提供了新的研究方向；另一方面，通过摇瓶发酵发现，所得菌株的色氨酸产量约为原始的3.4倍，极大地提高了菌株产色氨酸的性能。

公开(公告)号：CN106967159B

公开(公告)日：2020-10-13

申请号：CN201710149680.7

申请日：2017-03-14

申请人： 莲花健康产业集团股份有限公司 ,  天津科技大学

发明人： 李燕军 ,  陈宁 ,  韩洪军 ,  袁启发 ,  高立栋 ,  张顺棠 ,  赵岩 ,  黄龙辉 ,  王婷 ,  谢希贤 ,  张成林 ,  徐庆阳

IPC分类号： C07K14/34 ,  C12N15/77 ,  C12N1/21 ,  C12R1/15

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及肌醇转运蛋白iolT1和iolT2在木糖转运中的新应用的专利申请。在谷氨酸棒状杆菌中，肌醇转运蛋白iolT1和iolT2能够转运肌醇和葡萄糖，同时具有转运木糖的能力；该转运能力与谷氨酸棒状杆菌中的PTS系统（PtsG）的木糖转运能力相当，且与PTS系统对木糖的转运具有互补的作用，并且其对木糖的转运不受葡萄糖转运的抑制。该发现将有利于高效利用木糖的谷氨酸棒状杆菌工程菌株的构建，尤其有益于构建同步利用葡萄糖和木糖的工程菌株。这将为开发高效利用木质纤维素水解液等原料的基因工程菌株奠定了良好的基础，具有较好的开发利用前景。

公开(公告)号：CN113462623B

公开(公告)日：2022-11-29

申请号：CN202110572350.5

申请日：2021-05-25

申请人： 天津科技大学

发明人： 李燕军 ,  赵桂红 ,  张成林 ,  徐庆阳 ,  马洪坤 ,  苏蕊 ,  袁梦 ,  姜灏 ,  吴晨 ,  薄泰东

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/61 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12P13/06 ,  C12R1/15

摘要： 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种微生物发酵法制备D‑丙氨酸的方法。本发明首先构建一株生产D‑丙氨酸的基因工程菌，所述工程菌以谷氨酸棒杆菌ATCC 13032为出发菌株，通过敲除丙氨酸消旋酶基因alr和L‑丙氨酸转氨酶alaT；过表达meso‑二氨基庚二酸脱氢酶编码基因；敲除iolR阻遏蛋白基因同时基因组整合表达葡萄糖激酶基因glk1；整合来自大肠杆菌的edd和eda基因获得。该菌株以葡萄糖为底物直接发酵法生产D‑型氨基酸，成本低，技术简单，5L发酵罐中D‑丙氨酸产量能够达到50‑60g/L。另外，发酵法高效合成D‑型氨基酸属于开创性研究，借此方法，可以对发酵法进行无限扩展，低成本、高效率合成多种D‑型氨基酸。

公开(公告)号：CN112430562B

公开(公告)日：2022-02-22

申请号：CN202011398296.9

申请日：2020-12-04

申请人： 天津科技大学

发明人： 马倩 ,  孙全伟 ,  谭淼 ,  夏利 ,  张颖 ,  杨蒙雅 ,  谢希贤 ,  陈宁 ,  徐庆阳 ,  张成林 ,  李燕军 ,  范晓光

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其是一种基于复合碳源代谢分工产N‑乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用。通过构建强化N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径，并敲除6‑磷酸果糖激酶基因，定向点突变甘油激酶表达基因，对甘油葡萄糖复合碳源的利用进行了代谢分工，使葡萄糖主要用于目标产物N‑乙酰氨基葡萄糖的生产，甘油主要用于细胞生长，以提高N‑乙酰氨基葡萄糖的合成效率。混合碳源培养基摇瓶发酵48h后N‑乙酰氨基葡萄糖的产量最高达到107.8g/L，复合碳源转化率最高达到49％，相比于葡萄糖利用菌株，产量提升了151.7％，转化率提升了60.2％，具有较强的工业化生产潜力。

公开(公告)号：CN113462623A

公开(公告)日：2021-10-01

申请号：CN202110572350.5

申请日：2021-05-25

申请人： 天津科技大学

发明人： 李燕军 ,  赵桂红 ,  张成林 ,  徐庆阳 ,  马洪坤 ,  苏蕊 ,  袁梦 ,  姜灏 ,  吴晨 ,  薄泰东

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/61 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12P13/06 ,  C12R1/15

摘要： 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种微生物发酵法制备D‑丙氨酸的方法。本发明首先构建一株生产D‑丙氨酸的基因工程菌，所述工程菌以谷氨酸棒杆菌ATCC 13032为出发菌株，通过敲除丙氨酸消旋酶基因alr和L‑丙氨酸转氨酶alaT；过表达meso‑二氨基庚二酸脱氢酶编码基因；敲除iolR阻遏蛋白基因同时基因组整合表达葡萄糖激酶基因glk1；整合来自大肠杆菌的edd和eda基因获得。该菌株以葡萄糖为底物直接发酵法生产D‑型氨基酸，成本低，技术简单，5L发酵罐中D‑丙氨酸产量能够达到50‑60g/L。另外，发酵法高效合成D‑型氨基酸属于开创性研究，借此方法，可以对发酵法进行无限扩展，低成本、高效率合成多种D‑型氨基酸。

公开(公告)号：CN112877270A

公开(公告)日：2021-06-01

申请号：CN202110148120.6

申请日：2021-02-03

申请人： 天津科技大学

发明人： 马倩 ,  夏利 ,  谢希贤 ,  陈宁 ,  谭淼 ,  孙全伟 ,  张颖 ,  杨蒙雅 ,  徐庆阳 ,  张成林 ,  李燕军 ,  范晓光

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12N15/113 ,  C12N15/31 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种生产羟基四氢嘧啶基因工程菌的构建及其应用。本发明在基因组上对羟基四氢嘧啶合成途径中的关键基因进行强化，并减弱羟基四氢嘧啶竞争抑制途径，构建羟基四氢嘧啶合成途径，并过表达异柠檬酸脱氢酶编码基因icd以增加前体物α‑酮戊二酸的供应，同时通过esaI/esaR群体感应线路策略对前体物质α‑酮戊二酸的供应进行动态调控，根据细胞密度自动调节α‑酮戊二酸在三羧酸循环中的代谢，得到一株羟基四氢嘧啶高产菌。所构建菌株可以在不添加α‑酮戊二酸的发酵条件下，实现羟基四氢嘧啶的高效合成，且无副产物四氢嘧啶的积累，具有重要的工业应用价值。

公开(公告)号：CN112553135B

公开(公告)日：2021-05-28

申请号：CN202110188665.X

申请日：2021-02-19

申请人： 天津科技大学

发明人： 徐庆阳 ,  梅漫莉 ,  李燕军 ,  张成林

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N15/56 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12P19/40 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种腺苷工程菌及其构建方法与应用，在E.coli w3110的基因组中整合嘌呤核苷操纵子purEKBCSQLFMNHD，并由强启动子Ptrc启动；另外在大肠杆菌基因组上整合了腺苷琥珀酸合酶基因purA，用Ptrc启动子启动；还在mbhA位点整合了核苷酸磷酸酯酶基因yfkN，并用启动子Ptrc启动；同时缺失IMP脱氢酶,AMP核苷酸酶,腺苷脱氨酶和嘌呤核苷磷酸化酶活性，从而重构了腺苷合成途径，为利用大肠杆菌生产嘌呤类物质奠定了基础；另外利用该基因工程菌进行摇瓶发酵生产腺苷，发酵24 h生产腺苷4.3 g/L,优化了大肠发酵生产腺苷的培养基成分，从而使腺苷发酵得到最优的效果。这为后续发酵生产腺苷奠定了基础。

公开(公告)号：CN109456987B

公开(公告)日：2021-05-25

申请号：CN201811256143.3

申请日：2018-10-26

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  崔毅 ,  刘晓倩 ,  马跃超 ,  徐庆阳 ,  马倩 ,  陈宁 ,  李燕军

IPC分类号： C12N15/54 ,  C12N15/113 ,  C12N1/21 ,  C12P13/06 ,  C12R1/15

摘要： 本发明涉及一种高产L‑亮氨酸的相关基因及工程菌构建方法与应用，⑴将leuA突变基因整合至cgl1135假基因位点，leuA突变基因见序列1；⑵将ilvBN突变基因整合至cgl1890假基因位点，ilvBN突变基因件序列2；⑶PCP_2928特异性启动子替换柠檬酸合酶原始启动子，PCP_2928特异性启动子序列见序列3。采用本发明所提供的技术方案在摇瓶发酵30h可生产L‑亮氨酸32g/L，在5L发酵罐发酵50h左右可生产亮氨酸60g/L，最大生产强度可达1.5g/(L×h)，糖酸转化率为30％，是目前报道的发酵法生产L‑亮氨酸的最高水平。