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公开(公告)号：CN113564117B
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202110967022.5
申请日：2021-08-23
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0783
摘要： 本发明公开了一种冻存脐带血来源调节性T细胞体外扩增优化方法，包括以下步骤：冻存脐带血复苏后经离心洗涤获得总有核细胞，之后将总有核细胞接种于预包被Anti‑human CD3抗体的培养皿中，添加诱导培养基进行诱导培养。在培养至第8天时经CD4磁珠分选纯化获得CD4+调节性T细胞，再继续进行第二阶段诱导培养扩增，最终获得高纯度调节性T细胞。本发明提供的方法能够自冻存脐带血中经体外扩增优化获得高纯度的调节性T细胞。本方法同样适用于新鲜脐带血调节性T细胞体外扩增优化培养。
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公开(公告)号：CN117126808A
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202311347363.8
申请日：2023-10-18
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/078
摘要： 本发明涉及单个核细胞的提取储运技术领域，特别涉及一种冻存脐带血提取单个核细胞的方法。本发明是采用快速稀释冻存液并重复离心洗涤的方式去除多余红细胞，通过添加人血清白蛋白（HSA）、葡聚糖40(DEXTRAN40)、肝素钠等保护细胞，避免长时间储运产生絮状沉淀的问题。本发明技术方案与现有技术相比，在保证细胞活性的前提下，储运时间明显提高，从冻存20年以上的脐血中提取的MNC由原来的2‑6小时，增加到储运20小时不产生不可重悬的沉淀，提取单个核细胞的提取回收率也有所提高。
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公开(公告)号：CN116218966A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310299802.6
申请日：2023-03-25
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12Q1/6895 , C12R1/445 , C12R1/125 , C12R1/19 , C12R1/145 , C12R1/46 , C12R1/42 , C12R1/225 , C12R1/01 , C12R1/265 , C12R1/685 , C12R1/725
摘要： 本发明涉及血液快速检测方法技术领域，特别涉及一种脐带血细菌和真菌快速检测的方法。本发明提出的针对脐带血中细菌和真菌污染的检测方法，首先进行脐血中人源DNA去除以及去人源DNA的微量提取，再使用数字PCR方法对提取得到的微量细菌和真菌DNA进行高精度检测，以此实现对脐血中微量细菌和真菌的检测。
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公开(公告)号：CN112553155A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011578876.6
申请日：2020-12-28
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0775 , A01N1/02
摘要： 本发明提供的一种脐带血间充质干细胞培养方法，通过脐带血的采集和验收、脐带血的洗涤、自体脐带血富血小板血浆的制备与活化、脐带血单个核细胞的分离、Transwell小室预处理后培养脐带血间充质干细胞、脐带血间充质干细胞的纯化及扩增步骤。解决了现有技术必须用一定浓度的胎牛血清培养带来的各种弊端，并且用自己储存的富血小板血浆经过活化后培养自己的细胞，效率高、更安全和容易接受。整个过程免去添加各类因子等繁琐步骤，不仅操作简便，而且能够大大节省培养成本。
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公开(公告)号：CN115058391B
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202210989888.0
申请日：2022-08-18
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0775
摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种低氧型脐带间充质干细胞的培养方法。本发明的一种低氧型脐带间充质干细胞的培养方法，其通过对人类脐带间充质干细胞进行低氧培养处理的相关工艺和质量控制标准进行明确，低氧处理结果显著增加了细胞存活期，显著提高了间充质干细胞中VEGF分泌水平，延长了细胞进入机体后可发挥效用作用的时间，进一步达到改善治疗效果的作用。
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公开(公告)号：CN114874982B
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN202210792607.2
申请日：2022-07-07
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0775 , A61K35/28 , A61P17/02 , A61P9/00
摘要： 本发明涉及生物医药领域，尤其是细胞治疗技术领域，特别涉及一种增强脐带间充质干细胞分泌血管内皮生长因子的培养方法。本发明是在传统的脐带间充质干细胞培养基中加入不同浓度和比例的TNF‑α、IFN‑γ因子进行激发，生长一段时间后，与未进行激发UC‑MSCs相比，细胞因子均有不同程度的增高，尤其是VEGF的分泌量增加了数十倍，细胞中VEGF基因含量增加数倍。本方法简单易行，对实验或生产条件要求不高并且适合不同来源的间充质干细胞进行大规模生产制备，为脐带间充质干细胞分泌更多的生长因子尤其是VEGF应用于治疗血管或皮肤修复方面提供了一种新的治疗手段。
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公开(公告)号：CN113564117A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110967022.5
申请日：2021-08-23
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0783
摘要： 本发明公开了一种冻存脐带血来源调节性T细胞体外扩增优化方法，包括以下步骤：冻存脐带血复苏后经离心洗涤获得总有核细胞，之后将总有核细胞接种于预包被Anti‑human CD3抗体的培养皿中，添加诱导培养基进行诱导培养。在培养至第8天时经CD4磁珠分选纯化获得CD4+调节性T细胞，再继续进行第二阶段诱导培养扩增，最终获得高纯度调节性T细胞。本发明提供的方法能够自冻存脐带血中经体外扩增优化获得高纯度的调节性T细胞。本方法同样适用于新鲜脐带血调节性T细胞体外扩增优化培养。
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公开(公告)号：CN118078858A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410474406.7
申请日：2024-04-19
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
摘要： 本发明涉及干细胞外泌体冻干粉及口腔含漱液的特定治疗技术领域，特别涉及一种外泌体冻干粉的制备方法及其含漱液。本发明提供了一种外泌体冻干粉的制备方法及其含漱液，其采用脐带间充质干细胞来源的外泌体，制备成外泌体冻干粉，复配溶媒液，用于复溶冻干粉，外泌体冻干粉和溶媒液组成外泌体口腔含漱液套装，用于治疗放疗化疗引起的口腔黏膜炎，具有良好的治疗效果。
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公开(公告)号：CN115058391A
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202210989888.0
申请日：2022-08-18
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0775
摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种低氧型脐带间充质干细胞的培养方法。本发明的一种低氧型脐带间充质干细胞的培养方法，其通过对人类脐带间充质干细胞进行低氧培养处理的相关工艺和质量控制标准进行明确，低氧处理结果显著增加了细胞存活期，显著提高了间充质干细胞中VEGF分泌水平，延长了细胞进入机体后可发挥效用作用的时间，进一步达到改善治疗效果的作用。
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公开(公告)号：CN114058584B
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202210011909.1
申请日：2022-01-07
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0783 , C12N5/0789 , C12N5/078 , C12N5/09
摘要： 本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种临床用自然杀伤细胞的制备方法，主要包括以下步骤：步骤一、从脐带血中分选CD34+标记的脐带血造血干细胞，并获得剩余单个核细胞；步骤二、剩余单个核细胞成份的优化；步骤三、NK细胞的培养和扩增；步骤四、细胞数量及细胞表型鉴定。本发明首先分离出脐带血中的自体血浆及单个核细胞，其次利用磁珠法分选出单个核细胞中以CD34+为表面标记的造血干细胞，获得造血干细胞的同时，也收获了除造血干细胞以外的剩余成份，用此剩余成份及自体血浆培养NK细胞，实现了资源的合理利用，使得同一份脐带血既可以进行造血干细胞回输，又可以培养出符合临床需求的具有抗肿瘤活性的NK细胞，适于广泛推广应用。
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