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公开(公告)号：CN112553155A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011578876.6
申请日：2020-12-28
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0775 , A01N1/02
摘要： 本发明提供的一种脐带血间充质干细胞培养方法，通过脐带血的采集和验收、脐带血的洗涤、自体脐带血富血小板血浆的制备与活化、脐带血单个核细胞的分离、Transwell小室预处理后培养脐带血间充质干细胞、脐带血间充质干细胞的纯化及扩增步骤。解决了现有技术必须用一定浓度的胎牛血清培养带来的各种弊端，并且用自己储存的富血小板血浆经过活化后培养自己的细胞，效率高、更安全和容易接受。整个过程免去添加各类因子等繁琐步骤，不仅操作简便，而且能够大大节省培养成本。
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公开(公告)号：CN112075416A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011024650.1
申请日：2020-09-25
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： A01N1/02 , C12N5/0775
摘要： 本发明公开了一种脐带间充质干细胞组织的冻存及复苏方法，所述冻存方法包括以下操作步骤：(11)脐带展平后，将血管及羊膜从脐带中剥离，制备得脐带华通氏胶；(12)将洗涤后的脐带华通氏胶小块离心处理，离心后去除上清液体得到组织块；(13)制备脐带间充质干细胞；(14)将脐带间充质干细胞加入至冻存液中进行冻存处理。复苏方法包括以下操作步骤：(21)将冻存管温水浴解冻；(22)离心得到脐带间充质干细胞；(23)向脐带间充质干细胞中加入完全培养基，进行培养。本发明提供的脐带间充质干细胞组织的冻存及复苏方法，直接对脐带间充质干细胞组织进行冻存处理，操作步骤简单，能有效的提升医治效率。
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公开(公告)号：CN112021304A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010982440.7
申请日：2020-09-17
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： A01N1/02 , C12N5/0775
摘要： 本发明公开了一种脐带间充质干细胞的冻存方法，包括以下步骤：(1)取间充质干细胞，培养基重悬后，重铺至培养瓶中，待培养瓶中的细胞融合达90％以上时收获；(2)将培养瓶中的培养基倒掉，洗涤后加入胰蛋白酶消化，消化完成后加入混合生理盐水终止消化；(3)将消化后的细胞转入离心管中，离心处理后，弃上清，将沉淀重悬后再次离心，弃上清后得到间充质干细胞；(4)将间充质干细胞加入至冻存液中重悬后分装至冻存管中，梯度降温，转移至深低温冰箱后，冻存完成。本发明提供的一种脐带间充质干细胞的冻存方法，其中所用的冻存液对脐带间充质干细胞具有良好冻存效果，高效且不含任何动物源成分的可直接进行临床输注的MSCs冻存液。
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公开(公告)号：CN114891744B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN202210820210.X
申请日：2022-07-13
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0783
摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，尤其是NK细胞扩增技术领域，特别涉及一种冷冻脐带血NK细胞体外扩增方法。本发明提供了一种冷冻脐带血NK细胞体外扩增方法，其通过优化冻存脐血复苏技术，同时使用活化的富血小板血浆代替胎牛血清，由此建立了一套稳定可靠且规范化的NK细胞制备体系，可显著提高NK细胞的数量和纯度，且具有较强的杀伤能力。
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公开(公告)号：CN114891744A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210820210.X
申请日：2022-07-13
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0783
摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，尤其是NK细胞扩增技术领域，特别涉及一种冷冻脐带血NK细胞体外扩增方法。本发明提供了一种冷冻脐带血NK细胞体外扩增方法，其通过优化冻存脐血复苏技术，同时使用活化的富血小板血浆代替胎牛血清，由此建立了一套稳定可靠且规范化的NK细胞制备体系，可显著提高NK细胞的数量和纯度，且具有较强的杀伤能力。
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公开(公告)号：CN114015650A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111258827.9
申请日：2021-10-28
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0783
摘要： 本发明公开一种从脐血中诱导培养CIK细胞的试剂盒，包含三种试剂组分，具体为：试剂1：诱导培养基为500ml的X‑VIVO15培养基；试剂2：扩增培养基；试剂3：基础培养基。本发明还公开了一种从健康产妇的脐带血中诱导培养CIK细胞的方法，通过将脐带血中单个核细胞进行诱导，并经过相关体系培养，得到的CIK细胞不含胎牛血清等异源动物物质，细胞增殖倍数高，在培养第18天，可以达到细胞数量增殖90倍，并且细胞活率在90％以上。
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公开(公告)号：CN112391342A
公开(公告)日：2021-02-23
申请号：CN202011415728.2
申请日：2020-12-07
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0775
摘要： 本发明公开一种脐带血干细胞高效复苏方法，包括以下操作步骤：(1)将脐带血复苏保护液预冷处理，然后将冻存脐带血从液氮罐里取出，将脐带血放入水浴锅中缓慢摇晃水浴复苏；(2)将融化后的复苏脐带血加入至复苏保护液中，进行离心；(3)离心后吸弃上清，去除红细胞与冻存液后再次加入复苏保护液，再次离心；(4)离心后吸弃上清，去除红细胞后加入复苏保护液重悬，取样记录细胞活率并计数；(5)继续向其中加入复苏保护液进行离心、弃上清，将复苏后的脐带血干细胞加入培养基中培养。本发明提供的一种脐带血干细胞高效复苏方法，可保证脐带血干细胞在复苏的过程中具有较高的成活率，有效的提升了脐带血干细胞复苏后的活性。
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公开(公告)号：CN107475201A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710903010.X
申请日：2017-09-29
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0797
摘要： 本发明提供了一种神经干细胞贴壁培养的方法，先将前脑组织细胞进行原代培养获得神经干细胞球悬液；然后将神经干细胞球消化为悬浮神经干细胞，再接种于包被有人纤维连接蛋白的培养皿中培养，细胞生长至一定融合度进行传代；后续传代培养时将细胞用消化酶消化，待细胞皱缩后，将细胞吹下后，离心获得细胞沉淀后进行传代培养。本发明的神经干细胞贴壁培养方法，使细胞在有限的培养面积上单层贴壁培养，单位面积的细胞收获量明确，可以保证收获后的细胞量。而且贴壁培养细胞易消化，减小了对细胞的损伤，获得的细胞活率高。使用的促进神经干细胞贴壁的人纤维连接蛋白价格低廉且可反复利用，其余试剂均为常见试剂，单位细胞量的成本较低。
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公开(公告)号：CN112522190A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011424213.9
申请日：2020-12-08
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
IPC分类号： C12N5/0775 , A01N1/02
摘要： 本发明公开一种脐带组织高成活率的储运方法，包括以下操作步骤：(1)取间充质干细胞，培养基重悬后，平均重铺至四瓶，待细胞融合达90％以上时进行收获；(2)将培养瓶中的旧培养基倒掉，用生理盐水洗涤后去除剩余培养基，加入胰蛋白酶消化后，再加入生理盐水清终止消化，得到细胞消化液；(3)将细胞消化液进行离心，弃上清，洗去胰蛋白酶，得到间充质细胞；(4)将间充质细胞重悬后重复步骤(3)操作，得到间充质细胞沉淀，然后加入细胞储运液混匀后，放入储运箱中，进行细胞运输。本发明提供的一种脐带组织高成活率的储运方法，操作简单，成本低廉，可有效的保证脐带间充质干细胞在储运过程中的细胞成活率。
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公开(公告)号：CN214142302U
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202023116130.1
申请日：2020-12-22
申请人： 山东省齐鲁干细胞工程有限公司
摘要： 本实用新型公开了一种新型六孔板，包括装置本体、孔板结构、载板和防滑片，所述孔板结构上侧覆盖有盖板，且孔板结构底部是底板，底板表面中间粘接有防滑垫，同时防滑垫底部放置在桌面的上方，并且盖板内部开设有空槽，所述载板的外侧壁表面设置有第一玻璃纤维层，且载板的表面均匀开设有六组培养孔。该新型六孔板，盖板与孔板结构之间的接触通过第一玻璃纤维层、第二玻璃纤维层进行接触，保证盖板与孔板结构接触位置紧密结合；孔板结构的底部增加一圈防滑垫，防滑垫通过粘接与孔板结构的底板牢固结合；从而增加孔板结构与桌面之间的摩擦力，增加装置本体在工作时候的稳定性。
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