公开(公告)号：CN101538577B

公开(公告)日：2011-12-07

申请号：CN200910077645.4

申请日：2009-02-10

申请人： 汪兵

发明人： 汪兵 ,  王小娟 ,  杨建国

IPC分类号： C12N15/56 ,  C12N15/63 ,  C12N15/74 ,  C12N9/34 ,  C12R1/685

摘要： 本发明公开了一种嗜热糖化酶表达盒及其应用。本发明所提供的嗜热糖化酶表达盒，依次含有黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区、嗜热糖化酶基因、黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区、启动子、筛选标记基因、终止子和所述黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区；所述黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区选自黑曲霉糖化酶基因5’端至少1500的DNA片段；所述黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区选自黑曲霉糖化酶基因3’端至少1500的DNA片段；所述黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区含有黑曲霉糖化酶基因启动子。本发明的嗜热糖化酶表达载体导入黑曲霉中可生产嗜热糖化酶。

公开(公告)号：CN101503660B

公开(公告)日：2011-07-27

申请号：CN200910077646.9

申请日：2009-02-10

申请人： 汪兵

发明人： 汪兵 ,  王小娟 ,  杨建国

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N9/34 ,  C12R1/685

摘要： 本发明公开了表达嗜热糖化酶的工程菌及其应用。该工程菌是是将黑曲霉的糖化酶基因灭活，并将硫磺矿硫化叶菌的糖化酶基因插入到黑曲霉的基因组中，筛选得到表达嗜热糖化酶的重组工程菌；黑曲霉的糖化酶基因具有GENBANK Accession Number为AM270061.1的5′端第92183-94360位核苷酸序列；所述硫磺矿硫化叶菌的糖化酶基因具有GENBANK Accession Number为AE006718的5′端第6228-8096位核苷酸序列。利用该工程菌株可直接发酵得到嗜热糖化酶，表达量高达3000U/ml发酵液，生产成本低，生产的糖化酶容易分离和纯化。