一种利用干细胞构建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法

    公开(公告)号:CN107156059B

    公开(公告)日:2021-01-01

    申请号:CN201710436092.1

    申请日:2017-06-09

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: A01K67/027

    摘要: 本发明公开了一种利用干细胞构建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法,包括获取人干细胞,将干细胞移植入肝损伤的鼠,HBV感染人源化鼠等步骤,发现通过诱导严重肝损害并移植人干细胞,鼠肝内人来源肝细胞有50‑95%的高嵌合率,鼠脾脏、血液、肝脏、骨髓等器官内可持续分离到人源性免疫细胞,形成人源化肝脏和免疫细胞的鼠模型。再将各类嗜肝病毒感染上述人源化鼠,形成嗜肝病毒感染的人源化鼠模型。该构建人源化鼠模型技术除了用于构建研究嗜肝病毒感染的模型外,该技术方案的思路还可用于构建其他人源化器官的模型,该技术方案为临床上肝疾病治疗研究提供了方便、简单、易得的人源化模型。

    检测十种甲氧苄胺嘧啶类药物耐药基因方法及所用试剂盒

    公开(公告)号:CN108642169B

    公开(公告)日:2020-05-05

    申请号:CN201810352337.7

    申请日:2018-04-19

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12Q1/6883 C12Q1/6834

    摘要: 本发明公开了一种检测10种甲氧苄胺嘧啶类药物耐药基因的试剂盒,其包括对10种甲氧苄胺嘧啶类药物耐药基因进行特异性扩增的扩增引物组合,还包括检测10种不同甲氧苄胺嘧啶类药物耐药基因的特异性探针。本发明还同时公开了利用该试剂盒进行的检测10种甲氧苄胺嘧啶类药物耐药基因的方法。本发明所述的检测甲氧苄胺嘧啶类药物耐药基因的方法及其试剂盒,具有集成化程度高、灵敏度高、特异性好,检测结果稳定可靠,成本低的特点,可广泛用于甲氧苄胺嘧啶类药物耐药基因的分布、流行病学监测,为合理用药,有效降低和延缓耐药的发生提供有效工具。

    一种苯丙氨酸单克隆抗体的制备方法

    公开(公告)号:CN110551219A

    公开(公告)日:2019-12-10

    申请号:CN201910659912.2

    申请日:2019-07-22

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明涉及一种苯丙氨酸单克隆抗体的制备方法,包括如下步骤:步骤S1:备置纯度≥95%的半抗原D-Phe,并备置纯度≥95%的筛选原L-Tyr及L-Try;步骤S2:免疫原制备;步骤S3:动物免疫;步骤S4:细胞融合和筛选;步骤S41:初筛;步骤S42:复筛;步骤S43:竞争ELISA检测;步骤S44:阳性克隆的扩大培养和冻存;步骤S5:亚克隆;步骤S6:抗体生产。本发明用一种大分子物质与苯丙氨酸偶联,使之有抗原性,免疫小鼠,与鼠骨髓瘤细胞(sp2/0)融合,制备杂交瘤细胞,筛选和制备苯丙氨酸的单克隆抗体,可靠性好,用于试纸条的加工品质高,通过采集新生儿尿液以试纸法来筛查苯丙酮尿症。

    一种利用干细胞构建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法

    公开(公告)号:CN107156059A

    公开(公告)日:2017-09-15

    申请号:CN201710436092.1

    申请日:2017-06-09

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: A01K67/027

    摘要: 本发明公开了一种利用干细胞构建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法,包括获取人干细胞,将干细胞移植入肝损伤的鼠,HBV感染人源化鼠等步骤,发现通过诱导严重肝损害并移植人干细胞,鼠肝内人来源肝细胞有50‑95%的高嵌合率,鼠脾脏、血液、肝脏、骨髓等器官内可持续分离到人源性免疫细胞,形成人源化肝脏和免疫细胞的鼠模型。再将各类嗜肝病毒感染上述人源化鼠,形成嗜肝病毒感染的人源化鼠模型。该构建人源化鼠模型技术除了用于构建研究嗜肝病毒感染的模型外,该技术方案的思路还可用于构建其他人源化器官的模型,该技术方案为临床上肝疾病治疗研究提供了方便、简单、易得的人源化模型。

    肝硬化的生物标志物及其应用

    公开(公告)号:CN104195145B

    公开(公告)日:2017-01-18

    申请号:CN201410333927.7

    申请日:2014-07-15

    申请人: 浙江大学

    发明人: 李兰娟 秦楠

    摘要: 本发明公开了肝硬化的生物标志物及其应用。从98个肝硬化患者、83个健康对照的粪便样品开展整个肠道菌群微生物的关联分析研究描述粪便微生物群落及功能成分特征。15个基因构成生物标志物作为一个高精确的区分病人的指数。在另外独立群体中对发现进行检验,证实了其准确性,确认了检测菌群和肝硬化之间的关联鲁棒性。生物标志物选自如下一组15种基因中的至少10种。15种基因在肝硬化患者的肠道菌群中得到了富集。治疗肝硬化的药物,促进或者增加所述的基因的数量或者表达。一种生产或筛选药物的方法,所述药物促进或者增加所述的生物标志物的数量或者表达。一种检测肝硬化、监测治疗进程,或者生产、筛选药物的试剂盒,用于检测所述的生物标志物。

    HIF2A基因突变体及其检测与应用

    公开(公告)号:CN103993016B

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201410172171.2

    申请日:2014-04-25

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N15/12 C07K14/47 C12Q1/68

    摘要: 本发明涉及医学分子生物学领域,旨在提供一种HIF2A基因突变体及其检测与应用。该分离的编码HIF2A突变体核酸的基因序列如SEQ ID NO:1所示。分离的HIF2A突变体多肽是由前述突变体核酸编码的,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明研究发现人HIF2A基因的SEQ ID NO:1所示序列中第2155位核苷酸G→A突变,导致SEQ ID NO:2所示序列中的第549位谷氨酸(E)变为赖氨酸(K),使蛋白质的半衰期延长,下游基因的表达增高。基于此,本发明提供了HIF2A基因突变的检测方法。通过对该方法的应用,能够快速了解生物样品是否存在HIF2A基因突变。

    生物人工肝系统
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN103877631A

    公开(公告)日:2014-06-25

    申请号:CN201410079298.X

    申请日:2014-03-06

    申请人: 浙江大学

    发明人: 李兰娟 鹿娟 俞亮

    IPC分类号: A61M1/14 A61M1/38

    CPC分类号: A61M1/14 A61M1/38

    摘要: 本发明属于生物医学技术领域,旨在提供一种生物人工肝系统。该系统包括血浆分离/回输循环部分和生物肝循环部分。两部分通过循环管路相互连接。生物肝循环部分包括具有保温作用的恒温箱,以及依次连接成为循环系统的双腔储液袋、氧合柱、血浆循环泵、溶氧监测及温度仪和导流式微囊悬浮流化床生物反应器。该发明配备的生物反应器利用涡轮导流式进口分流进口局部的高速流体,有效减小流体力场中微囊所受的侧向剪切力,减少微囊破坏,提高生物反应器中所培养细胞与灌流液的接触效率。该生物反应器用于生物型人工肝支持治疗系统,以求在治疗重症肝炎、肝衰竭等疾病方面取得更加理想的效果。