公开(公告)号：CN104498479A

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201510019776.2

申请日：2015-01-15

申请人： 淮海工学院 ,  连云港市高公岛黄窝捕捞养殖公司 ,  连云港赣榆佳信水产开发有限公司 ,  连云港市海洋与水产科学研究所

发明人： 董志国 ,  陈百尧 ,  张庆起 ,  赵帅 ,  伏光辉 ,  安健 ,  张立祥

IPC分类号： C12N15/10

摘要： 本发明是一种刺参免提DNA的 PCR快速扩增方法，其步骤是：将刺参处死后用微量注射器肌肉内抽取体液0.02-1μL入200μL PCR管中，置于冰浴备用；当不能立即PCR时将其置-20℃下保存，1周内有效；一步法PCR：以上述PCR管的体液为模板，进行25μL体系下的PCR扩增：反应条件为普通PCR条件，扩增程序为：94 ℃预变性4 min；94 ℃变性40 s，50-60 ℃退火40 s，72 ℃延伸40 s，共35个循环；72 ℃延伸6 min，4 ℃保存；再按照常规的琼脂糖凝胶电泳检测。本发明方法设计简便合理，可操作性强，无需经过DNA抽提过程，即可获得理想的扩增效果。

公开(公告)号：CN104404166B

公开(公告)日：2016-09-28

申请号：CN201410826860.0

申请日：2014-12-25

申请人： 连云港市海洋与水产科学研究所 ,  连云港市海珍品增养殖试验场 ,  淮海工学院 ,  连云港赣榆佳信水产开发有限公司 ,  连云港海浪水产养殖有限公司 ,  连云港帅森海水养殖专业合作社

发明人： 陈百尧 ,  程子桉 ,  伏光辉 ,  薛学坤 ,  安健 ,  张庆起 ,  张立祥 ,  董志国 ,  孙苗苗

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明是一种仿刺参种质鉴定方法，所述的鉴定方法步骤如下：（1）样本提取：将疑似仿刺参样本，随机取样，加液氮在研砵中研成粉末，分装到2mL EP管中；提取DNA；（2）PCR鉴定；（3）鉴定标准：产物8%聚丙烯酰胺凝胶电泳2.5h，银染显色后扫描仪成像；引物Aja2‑111的结果为111bp的一条带；引物Aja13‑144的结果为144bp的一条带；引物Aja15‑185的结果为185bp和384bp的2条带；（4）结果判定：用引物扩增出如步骤（3）所述的条带时，判定样本是仿刺参。本发明方法设计合理，操作方便快捷，准确度高，有效地克服现有经验性鉴定和利用刺参分类专家才可鉴定的缺陷。

公开(公告)号：CN104630207A

公开(公告)日：2015-05-20

申请号：CN201510072067.0

申请日：2015-02-11

申请人： 淮海工学院 ,  连云港赣榆佳信水产开发有限公司 ,  连云港市海洋与水产科学研究所 ,  连云港帅森海水养殖专业合作社

发明人： 李晓英 ,  陈百尧 ,  张庆起 ,  赵帅 ,  伏光辉 ,  安健 ,  董志国 ,  阎斌伦

IPC分类号： C12N15/10 ,  A01N1/00

摘要： 本发明是一种海洋动物标本保存与DNA提取一体化方法，其步骤如下：将海洋动物处死后的全体或者部分放入标本瓶，或者同时按每份动物组织0.05-1g分装到2mL EP管中；向标本瓶与/或2mL EP管中加入标本固定与DNA提取一体化试剂；将标本瓶中的组织样本取0.05-1g移入2mL EP管，并吸取原标本瓶中的固定液0.6mL，或者直接取分装并加入试剂的2mL EP管，在55℃下消化1-4h，然后按照常规的酚－氯仿法提取DNA。本发明方法设计合理，操作方便，可以实现海洋动物标本保存与DNA提取一体化操作。

公开(公告)号：CN107381778A

公开(公告)日：2017-11-24

申请号：CN201710707476.2

申请日：2017-08-17

申请人： 连云港市海洋与渔业发展促进中心 ,  淮海工学院

发明人： 冯志华 ,  路吉坤 ,  陈百尧 ,  徐加涛 ,  孙苗苗 ,  安健 ,  伏光辉

IPC分类号： C02F3/00 ,  C02F103/08

CPC分类号： C02F3/00 ,  C02F2003/001 ,  C02F2103/08

摘要： 本发明公开一种改性竹质生物填料的制备方法及应用，包括步骤如下：S1:制备竹环填料；S2:制备复合粉末材料，所述粉末材料含有活性炭、沸石和磁粉；S3:将复合粉末材料利用静电喷涂，粘附在S1中获得的简易改性的竹环填料表面，进行最终的喷涂改性，得到最终的改性竹质生物填料；相比传统的生物填料，本发明方法制备的填料为新型改性天然植物载体填料，既保留了天然生物材质填料固有的经济性、安全性和快速附着性上的优势，又通过竹环形态的选择，以及浸泡改性和喷涂改性的处理，提高了孔隙率、比表面积、耐腐蚀性、机械稳定性和处理效率，获得经济、稳定、高效、安全的新型生物填料。

公开(公告)号：CN102140504A

公开(公告)日：2011-08-03

申请号：CN201010569644.4

申请日：2010-11-29

申请人： 淮海工学院

发明人： 高焕 ,  阎斌伦 ,  于飞 ,  陈百尧 ,  董志国

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明是一种三疣梭子蟹微卫星SSR-18检测技术，其特征是首先提取三疣梭子蟹基因组DNA，然后建立三疣梭子蟹富含微卫星的基因组文库，再对文库进行测序获得富含微卫星的序列；挑选出基因组文库中的SSR-18序列，并在其序列两端设计适合PCR扩增的特异性引物，并对三疣梭子蟹基因组DNA进行PCR扩增，将获得的PCR产物在变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离，利用产物出现的条带进行分析，确定每个个体的基因型。本发明适用于三疣梭子蟹系谱认证、遗传图谱构建和遗传结构分析等研究。

公开(公告)号：CN108935257A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201811111159.5

申请日：2018-09-22

申请人： 淮海工学院

发明人： 王兴强 ,  崔春辉 ,  曹梅 ,  陈百尧 ,  伏光辉 ,  孙苗苗

IPC分类号： A01K61/59 ,  A01K61/00 ,  A01K61/30 ,  A23K50/80 ,  A23K10/22 ,  A23K20/158 ,  A23K20/174 ,  A23K10/12 ,  A23K10/37 ,  A23K20/20 ,  A23K10/30 ,  A23K20/111 ,  A23K10/26 ,  A23K20/26 ,  A23K20/163

CPC分类号： A01K61/59 ,  A01K61/00 ,  A01K61/30 ,  A23K10/12 ,  A23K10/22 ,  A23K10/26 ,  A23K10/30 ,  A23K10/37 ,  A23K20/111 ,  A23K20/158 ,  A23K20/163 ,  A23K20/174 ,  A23K20/20 ,  A23K20/26 ,  A23K50/80

摘要： 本发明是一种虾池网箱组合养殖方法：它包括虾池改造和网箱投放，脊尾白虾抱卵亲虾投放，斑节对虾苗投放，幼乌投放，参苗投放，饵料分阶段投喂等步骤。本发明方法通过网箱的保护作用，将脊尾白虾、斑节对虾、乌贼和刺参引入同一养殖池塘，提高生态系统稳定性，有效的控制了脊尾白虾和斑节对虾病害的发生率，同时充分利用水体，提高水域生产力，增加经济效益，适合在中国北方室外虾池推广。

公开(公告)号：CN104404166A

公开(公告)日：2015-03-11

申请号：CN201410826860.0

申请日：2014-12-25

申请人： 连云港市海洋与水产科学研究所 ,  连云港赣榆佳信水产开发有限公司 ,  连云港帅森海水养殖专业合作社 ,  淮海工学院

发明人： 陈百尧 ,  伏光辉 ,  薛学坤 ,  安健 ,  张庆起 ,  张立祥 ,  董志国 ,  孙苗苗

IPC分类号： C12Q1/68

CPC分类号： C12Q1/686 ,  C12Q2565/125

摘要： 本发明是一种仿刺参种质鉴定方法，所述的鉴定方法步骤如下：（1）样本提取：将疑似仿刺参样本，随机取样，加液氮在研砵中研成粉末，分装到2mLEP管中；提取DNA；（2）PCR鉴定；（3）鉴定标准：产物8%聚丙烯酰胺凝胶电泳2.5h，银染显色后扫描仪成像；引物Aja2-111的结果为111bp的一条带；引物Aja13-144的结果为144bp的一条带；引物Aja15-185的结果为185bp和384bp的2条带；（4）结果判定：用引物扩增出如步骤（3）所述的条带时，判定样本是仿刺参。本发明方法设计合理，操作方便快捷，准确度高，有效地克服现有经验性鉴定和利用刺参分类专家才可鉴定的缺陷。