公开(公告)号：CN115261446B

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202210980928.5

申请日：2022-08-16

申请人： 贵州省烟草科学研究院

发明人： 王兵 ,  雷波 ,  王丰 ,  任学良 ,  焦雨铃 ,  田彩环 ,  余婧 ,  赵会纳 ,  余世洲

IPC分类号： C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6895

摘要： 本申请公开了抽核缓冲液、缓冲液组合、制备方法和应用，用于抽提烟草幼嫩组织单细胞核测序样本，以便对其进行snRNA‑seq测序。该抽核缓冲液包含：0.5～1.5M DTT，0.3～0.75％Triton×‑100，0.5～1.5tablet/50mL蛋白酶抑制剂，0.3～0.6U/μL RNA酶抑制剂，0.05～0.15mM精胺和0.3～0.7mM亚精胺的PBS溶液，pH值为6.5～7.5。通过本申请的抽核缓冲液、缓冲液组合及采用该缓冲液组合制备而成的烟草单细胞核样品具有背景纯度高、结团率低，保持细胞核形态完整和细胞核RNA质量满足snRNA‑seq测序的优点。

公开(公告)号：CN115261446A

公开(公告)日：2022-11-01

申请号：CN202210980928.5

申请日：2022-08-16

申请人： 贵州省烟草科学研究院

发明人： 王兵 ,  雷波 ,  王丰 ,  任学良 ,  焦雨铃 ,  田彩环 ,  余婧 ,  赵会纳 ,  余世洲

IPC分类号： C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6895

摘要： 本申请公开了抽核缓冲液、缓冲液组合、制备方法和应用，用于抽提烟草幼嫩组织单细胞核测序样本，以便对其进行snRNA‑seq测序。该抽核缓冲液包含：0.5～1.5M DTT，0.3～0.75％Triton×‑100，0.5～1.5tablet/50mL蛋白酶抑制剂，0.3～0.6U/μL RNA酶抑制剂，0.05～0.15mM精胺和0.3～0.7mM亚精胺的PBS溶液，pH值为6.5～7.5。通过本申请的抽核缓冲液、缓冲液组合及采用该缓冲液组合制备而成的烟草单细胞核样品具有背景纯度高、结团率低，保持细胞核形态完整和细胞核RNA质量满足snRNA‑seq测序的优点。