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    基于电刺激的活体水蛭提取水蛭素的提取方法
    91.
    发明公开
    基于电刺激的活体水蛭提取水蛭素的提取方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN115975007A

    公开(公告)日：2023-04-18

    申请号：CN202211640263.X

    申请日：2022-12-20

    申请人： 江西康宝医药生物科技有限公司

    发明人： 聂建群 ,  聂亚臻

    IPC分类号： C07K14/815 ,  A01K61/40

    摘要： 本发明公开了水蛭素提取技术领域的基于电刺激的活体水蛭提取水蛭素的提取方法，包括提取池、隔板、盖板、多个细孔机构、第一电极板和第二电极板，所述细孔机构用于供水蛭穿过隔板并在水蛭穿过隔板的过程中刮蹭水蛭表面；使得电刺激过程中细孔机构能够将水蛭表面的粘液刮下（同时能够进一步的刺激水蛭表皮，促使水蛭分泌粘液），防止电刺激结束后，捞出的水蛭表面残留较多的附着粘液（粘液从水蛭表面刮下后，即使后续捞出水蛭过程中，液体中的粘液搭在水蛭表面，由于粘液的连接性，使得粘液只会简单的搭在水蛭表面，用水进行简单的漂洗，即可去除），造成粘液浪费。

    一种乳状液膜法纯化水蛭素方法
    92.
    发明授权
    一种乳状液膜法纯化水蛭素方法 有权

    公开(公告)号：CN112321703B

    公开(公告)日：2023-03-28

    申请号：CN202011328312.7

    申请日：2020-11-24

    申请人： 山东沃华医药科技股份有限公司

    发明人： 王炯 ,  程世娟 ,  周万辉 ,  曾英姿 ,  王冬梅 ,  赵磊

    IPC分类号： C07K14/815 ,  C07K1/14

    摘要： 本发明涉及一种乳状液膜法纯化水蛭素方法，所述方法，包括以下步骤：1)水蛭用水煎煮1‑3次，每次1‑3小时，合并煎液，浓缩加入乙醇至含醇量为80‑90％，静置，离心，取上清液调节pH＝4‑6，备用；2)大豆油，表面活性剂，液体石蜡混合，取此混合物加入NaOH水溶液，搅拌即制得稳定的乳状液；3)将步骤1)得到的备用液与步骤2)得到的乳状液混合搅拌提取，静置分层，分离出乳液，水浴加热乳液进行破乳，静置后分离得到的水层，即为水蛭素溶液。

    一种比伐卢定的合成方法
    94.
    发明授权
    一种比伐卢定的合成方法 有权

    公开(公告)号：CN113845587B

    公开(公告)日：2022-02-18

    申请号：CN202111449570.5

    申请日：2021-12-01

    申请人： 浙江湃肽生物有限公司南京分公司

    发明人： 刘志国 ,  魏祝宇 ,  潘海良 ,  叶有志 ,  汪岳斌

    IPC分类号： C07K14/815 ,  C07K1/04 ,  C07K1/06

    摘要： 本发明公开了一种比伐卢定的合成方法，属于多肽药物制备技术领域。比伐卢定的合成方法，包括：步骤（1），活化树脂，采用活化液对树脂进行活化处理获得活化树脂，所述活化液包括二氯甲烷、B‑丁内酯、纳迪克酸酐；步骤（2），Leu‑树脂的合成，采用固相合成法将溶胀后的活化树脂和Fmoc‑Leu合成Leu‑树脂；步骤（3），比伐卢定‑树脂的合成，采用固相合成法合成比伐卢定‑树脂；步骤（4），脱保护，将比伐卢定‑树脂脱保护得到比伐卢定。本发明合成方法合成的比伐卢定得率更高。

    一种高产天然水蛭素的大肠杆菌工程菌株及其应用
    95.
    发明公开
    一种高产天然水蛭素的大肠杆菌工程菌株及其应用 有权

    公开(公告)号：CN113789293A

    公开(公告)日：2021-12-14

    申请号：CN202111351835.8

    申请日：2021-11-16

    申请人： 江苏省中国科学院植物研究所

    发明人： 汪仁 ,  周正雄 ,  高萌 ,  李洁 ,  孙彬

    IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/15 ,  C12P21/02 ,  C07K14/815 ,  C12R1/19

    摘要： 本发明公开了一种高产天然水蛭素的大肠杆菌工程菌株及其应用，属于生物医药技术领域。本申请以模式生物大肠杆菌为基础，通过游离质粒共表达编码水蛭素的基因hv和编码水蛭酪氨酸磺酸转移酶的基因TPS，构建天然水蛭素的合成途径，获得天然水蛭素的积累菌株。hv的核苷酸序列如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示，TPS的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明为天然水蛭素的合成提供了新的策略，其生产效率比酶法合成天然水蛭素及从动物组织中提取天然水蛭素明显提高，生产成本大大降低，为天然水蛭素的工业化大规模生产奠定了基础。

    一种基于亲和层析的水蛭素分离纯化方法
    97.
    发明授权
    一种基于亲和层析的水蛭素分离纯化方法 有权 转让

    公开(公告)号：CN108395475B

    公开(公告)日：2021-09-10

    申请号：CN201810268931.8

    申请日：2018-03-29

    申请人： 苏州至汇生物科技有限公司

    发明人： 虞龙

    IPC分类号： C07K14/815 ,  C07K1/22

    摘要： 本发明公开了一种基于亲和层析的水蛭素分离纯化方法，用生理盐水喂饱水蛭活体后，物理挤压使其分泌唾液并收集，将获得的水蛭唾液样本，加入预冷三氯乙酸提取液混匀，浸提，离心取上清，调节pH3.0‑5.0后加入预冷的丙酮混匀静置过夜，回收上清中丙酮，离心，取沉淀，备用；将所述沉淀加入蒸馏水，充分溶解，调节pH 6.0‑8.0，用凝血酶Sepharose 4FF亲合柱进行分离纯化，高效液相色谱检测水蛭素含量，取水蛭素含量峰值处纯化液，将上述纯化液进行透析，并且过程中重复加水2‑4次，持续10‑15h，将超滤后的上清液进行旋转蒸发，去除水分70‑80%后，取浓缩液冻干机冻干，得水蛭素产品。本发明方法纯化所得的天然水蛭素纯度高，活性高，成本低，操作简单，易重复。

    森林山蛭抗血栓肽Sylvestin及其基因和应用
    98.
    发明授权
    森林山蛭抗血栓肽Sylvestin及其基因和应用 有权 转让

    公开(公告)号：CN108059672B

    公开(公告)日：2021-06-11

    申请号：CN201610979895.7

    申请日：2016-11-08

    申请人： 中国科学院昆明动物研究所

    发明人： 赖仞 ,  刘伟慧 ,  龙承波 ,  吕秋敏

    IPC分类号： C07K14/815 ,  C12N15/15 ,  A61K38/58 ,  A61P7/02 ,  A61P9/10

    摘要： 本发明涉及一种森林山蛭(Haemadipsa sylvestris)抗血栓肽Sylvestin及其基因和应用，属于生物医学技术领域。森林山蛭抗血栓肽Sylvestin是森林山蛭镇痛肽基因编码的一种单链多肽，分子量4790.5道尔顿，等电点6.28。森林山蛭抗血栓肽Sylvestin由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成。编码森林山蛭抗血栓肽Sylvestin的基因，由SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列组成。本发明森林山蛭抗血栓肽Sylvestin能够抑制FXIIa和kallikrein，有极显著的抗血栓和抑制急性脑出血的作用；该抗血栓肽具有结构简单、人工合成方便、抗血栓活性强，能作为制备FXIIa、kallikrein抑制剂和抗血栓和抑制急性脑出血药物应用。