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公开(公告)号:CN104031886B
公开(公告)日:2016-02-24
申请号:CN201410103273.9
申请日:2014-03-19
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07D493/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种免疫磁珠净化-酶联免疫试验检测莫能菌素的方法及其专用单克隆抗体。本发明提供的莫能菌素单克隆抗体杂交瘤细胞株MON(简称杂交瘤细胞株MON),保藏号为CGMCC No.8952。杂交瘤细胞株MON分泌的单克隆抗体也属于本发明的保护范围。所述单克隆抗体与磁珠偶联得到的免疫磁珠也属于本发明的保护范围。在本发明中,免疫磁珠的作用是富集净化样品中的MON分子,最后通过间接竞争ELISA检测浓缩后的样品,推算出待检MON含量。此法实现了对超出常规免疫检测方法检测限(1ng/mL)的MON样品进行检测,有效提高了检测灵敏度。
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公开(公告)号:CN105137086A
公开(公告)日:2015-12-09
申请号:CN201510455259.X
申请日:2015-07-29
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/558 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了用于检测磺胺药物的试剂盒和试纸条及其应用。采用利用保藏菌株大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21(DE3)-pET28b-flop表达得到的蛋白质flop制备的试剂盒和胶体金试纸条能够用于检测磺胺药物。本发明的试剂盒和胶体金试纸条具有灵敏度高、准确度高、成本低、操作简单、保质期长的优点;能快速检测大批量样品,可实现现场高通量快速检测,在磺胺药物的检测中将发挥重大作用。
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公开(公告)号:CN105136755A
公开(公告)日:2015-12-09
申请号:CN201510490795.3
申请日:2015-08-11
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供一种用于检测红霉素的荧光偏振免疫分析方法,包括:将已知浓度的红霉素标准品的溶液分别与荧光标记物溶液以及红霉素单克隆抗体溶液混合孵育进行竞争反应,测定所得体系的荧光偏振值;以测定的荧光偏振值为纵坐标,所述一系列已知浓度的磺胺二甲基嘧啶标准品的浓度为横坐标,绘制标准曲线;以待测样品代替步骤1)中的红霉素标准品,按照步骤1)中操作,测定孵育后体系的荧光偏振值,根据标准曲线,计算出所述待测样品中红霉素的浓度。本发明提供了一种均相的、快速的红霉素荧光偏振免疫检测方法。方法只需要加样,无需分离和洗涤操作,十分钟内就可获得检测结果。
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公开(公告)号:CN103525930B
公开(公告)日:2015-06-17
申请号:CN201310481416.5
申请日:2013-10-15
Applicant: 中国农业大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明整合了错配扩增突变分析PCR(MAMA-PCR)和多重PCR技术,提供了一种快速检测由于核苷酸点突变引起的耐喹诺酮类抗生素空肠弯曲杆菌的方法及试剂盒。本发明所提供的试剂盒包括具有序列表中SEQ ID №:1-5、SEQ ID №:7所示的核苷酸序列的引物组合物和具有序列表中SEQ ID №:1-6所示核苷酸序列的质控组引物组合物。本发明提供的检测方法及试剂盒可快速从疑似菌中鉴定出耐喹诺酮类抗生素的空肠弯曲杆菌,简化了以菌种鉴定和药敏试验为代表的传统检测方法的复杂程序,具有良好的特异性和灵敏度,非常适合基层一线用于快速检测疑似菌,继而提供准确的用药指导。
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公开(公告)号:CN103197069B
公开(公告)日:2015-03-04
申请号:CN201310078523.3
申请日:2013-03-12
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种检测磺胺二甲基嘧啶和/或恩诺沙星的酶联免疫试剂盒及其应用。本发明所提供试剂盒包括抗体1、抗体2、包被原1、包被原2、酶标记物1和酶标记物2;所述抗体1为抗磺胺二甲基嘧啶的抗体,所述抗体2为抗恩诺沙星的抗体,所述包被原1为磺胺二甲基嘧啶半抗原与载体蛋白的偶联物,所述包被原2为恩诺沙星半抗原与载体蛋白的偶联物,所述酶标记物1为抗所述抗体1的酶标二抗,所述酶标记物2为抗所述抗体2的酶标二抗。本发明所提供试剂盒可定性或定量检测待测样品中磺胺二甲基嘧啶和恩诺沙星残留,样品前处理过程简单;本发明检验方法简便易行,特异性高、灵敏度高、精确度高。
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公开(公告)号:CN103170309B
公开(公告)日:2014-10-29
申请号:CN201310077763.1
申请日:2013-03-12
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种莱克多巴胺抗体免疫亲和层析柱及其应用。本发明所提供的莱克多巴胺抗体免疫亲和层析柱的填料由莱克多巴胺半抗原与固相载体交联而成;所述莱克多巴胺半抗原的结构如式I所示;所述固相载体为琼脂糖凝胶、纤维素、葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、多孔玻璃或聚丙烯酰胺-琼脂糖凝胶。本发明与现有盐析、传统层析等抗体的纯化技术相比较,主要优点在于:(1)利用对莱克多巴胺引入氨基的处理,可以使半抗原莱克多巴胺与固相载体结合;(2)利用抗原与抗体的特异性亲和,有效的去除了非特异性抗体及其他杂蛋白,提高莱克多巴胺抗体的纯化效率,且操作简单。式I
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公开(公告)号:CN102617589B
公开(公告)日:2014-04-02
申请号:CN201210044659.8
申请日:2012-02-24
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07D493/14 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉素M1人工抗原及其制备的抗体。本发明提供了一种化合物,即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物为将黄曲霉素M1进行结构改造得到的化合物,既最大程度保留了黄曲霉素M1的特征结构,又具有可以与载体蛋白发生偶联的活性基团。本发明还保护一种黄曲霉素人工抗原,为将式(I)所示化合物与载体蛋白偶联得到的偶联物。将所述黄曲霉素人工抗原免疫动物,可获得高特异性的单克隆抗体和多克隆抗体,方法简便、易行。所述人工抗原可用于检测黄曲霉素。所述抗体可用于检测黄曲霉素。式(I)
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公开(公告)号:CN101936984B
公开(公告)日:2013-10-16
申请号:CN201010244187.1
申请日:2010-08-03
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/577 , G01N33/531 , C07K16/44 , C12N5/20 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种检测克伦特罗的方法及其专用化学发光免疫试剂盒。本发明所提供的检测克伦特罗的专用化学发光免疫试剂盒,包括克伦特罗特异性抗体、包被原和标准品溶液;所述包被原为克伦特罗半抗原与载体蛋白的偶联物。本发明的检测方法,具有样品前处理过程简单、操作简便、费用低廉、特异性高、灵敏度高、精确度高等特点,能够现场监控且适合大量样本的筛查。
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公开(公告)号:CN102690338A
公开(公告)日:2012-09-26
申请号:CN201210166658.0
申请日:2012-05-25
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种与四环素结合的蛋白TetR及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质,可以与四环素特异结合,是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与四环素类抗生素结合的由(a)衍生的蛋白质。向出发大肠杆菌中导入四环素受体蛋白的编码基因,可以得到重组大肠杆菌。本发明还公开了制备所述蛋白质的方法,即培养所述重组菌。实验证明,本发明制备四环素受体蛋白的方法得率高,解决了现有技术中得率不高、制备困难的问题。因此,本发明方法具有重要意义。
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公开(公告)号:CN101433825B
公开(公告)日:2011-11-23
申请号:CN200810227785.0
申请日:2008-12-03
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/53 , B01J20/286 , C07D493/20
Abstract: 本发明公开了一种自动物样品中提取盐霉素类化合物的方法及其专用免疫亲和吸附剂。该用于自动物样品中提取盐霉素类化合物的免疫亲和吸附剂,是由固相载体和与其偶联的盐霉素单克隆抗体组成;所述盐霉素单克隆抗体是以盐霉素半抗原与载体蛋白的偶联物为免疫原得到的抗体;所述盐霉素类化合物为盐霉素或甲基盐霉素。本发明的免疫亲和吸附剂及色谱柱使用了高特异性的盐霉素单克隆抗体,具有高选择性,保证了检测效果的可靠性,同时还样品前处理过程大大简化,尤其适用于肌肉和肝中微量盐霉素和甲基盐霉素的前处理,分析质量得到改善。本发明检测法可高效检测盐霉素和甲基盐霉素的含量,弥补了单纯免疫测定技术直接测定样本的信息量太少、定量准确性差,或理化方法选择性低等不足。因此,本发明免疫亲和吸附剂、色谱柱和试剂盒,及提取和检测动物样品中盐霉素类化合物的方法适合于推广应用。
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