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公开(公告)号：CN110295137B
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN201910626036.3
申请日：2019-07-11
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种乌斑鳢肾细胞系，其分类命名为乌斑鳢肾细胞系CAMK，于2019年5月8日保存在中国典型培养物保藏中心，保藏登记编号为CCTCC NO:C201994，上述乌斑鳢肾细胞系的构建方法为：取乌斑鳢消毒后取肾，于含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养基中浸泡后剪成小块，胰酶消化液消化，完全培养基重悬混匀，得到重悬混匀液于细胞培养瓶中恒温培养至细胞铺满板子，用胰酶‑EDTA消化液消化后，加入完全培养基继续培养，传代3次后，冻存即得乌斑鳢肾细胞系。本发明中首次成功在体外培养了乌斑鳢肾细胞系，所使用的是鱼类细胞培养的最常用的培养基、且在简单的条件进行原代细胞筛选培养，保证最终获得的细胞无需特殊试剂和条件就能增殖，为其今后的应用提供更好的空间。
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公开(公告)号：CN110548137A
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201910894082.1
申请日：2019-09-20
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： A61K39/245 , A61K39/385 , A61K47/52 , A61P31/22 , A61P37/04
摘要： 本发明公开了一种基于锦鲤疱疹病毒ORF149的碳纳米管载核酸疫苗及应用，本发明成功构建了单壁碳纳米管载pcDNA-ORF149核酸疫苗系统，提高鱼体抗体水平，其相对免疫保护率为81.9％，免疫水平远远高于其他免疫系统，具有在水产养殖和病原研究的应用潜质。
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公开(公告)号：CN110527661A
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201910842355.8
申请日：2019-09-06
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N5/071 , C12Q1/6888
摘要： 本发明公开了一种剑尾鱼仔鱼细胞系，其通过原代培养和传代培养构建得到，本发明还提供了剑尾鱼仔鱼细胞系在水产动物病毒分离和在环境污染物监测中的应用。本发明对剑尾鱼仔鱼进行细胞培养，初步确定了细胞的培养条件，进行了染色体分析，检测了细胞对多种水生动物病毒的敏感性，并对抗生素类环境污染物利福平对细胞的诱导效应进行了研究，该细胞系的建立为后期水生动物病毒的研究及细胞系作为体外毒理学细胞模型应用于环境污染物的毒理学相关研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105646715B
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201610033741.9
申请日：2016-01-19
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C07K16/42 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了抗锦鲤IgM的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。所述抗锦鲤IgM的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO：C2015218的杂交瘤细胞株A5‑E10分泌产生的。利用所述的单克隆抗体可以用于锦鲤或普通鲤鱼某病原或水产疫苗特异性抗体的检测，从而进行疾病的早期诊断和疫苗使用效果的评价，对锦鲤或普通鲤鱼疾病流行病学调查、病原诊断具有较高的临床使用及推广价值，为其他养殖鱼类疾病的防治提供参考。
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公开(公告)号：CN108865974A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810669284.1
申请日：2018-06-26
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种罗非鱼脑细胞系的构建方法，其步骤是：取鲜活罗非鱼消毒取脑组织，剪碎块，用胶原酶处理后，加入胰蛋白酶；用含培养液充分悬浮，进行原代培养；细胞长满瓶底时，用胰酶‑EDTA消化，接种传代培养；传代培养60代后，于对数生长期加入秋水仙素处理并进行核型分析。本发明公开的罗非鱼脑细胞系的制备方法，方法简单方便；并且用该方法制备的罗非鱼脑细胞系，可以进行长时间的传代培养，对罗非鱼出血病病毒非常敏感，可以广泛应用于实验中。
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公开(公告)号：CN107056898A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710076686.6
申请日：2017-02-13
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC分类号： C07K14/005 , C07K16/065 , C07K16/085 , C12N15/70 , C12N2710/16022 , C12N2800/101
摘要： 本发明公开了一种鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白、多克隆抗体及其应用。本发明提供的鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白，其全长氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，编码该蛋白的全长核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明选取ORF136部分基因序列构建pET32a‑ORF136重组原核表达载体，经IPTG诱导表达后得到重组表达蛋白，经免疫兔子获得多克隆抗体，将所得多克隆抗体用纯化的CyHV‑3病毒和感染CyHV‑3的KS细胞进行western blot分析，并进一步采用间接免疫荧光实验验证抗体的检测应用。ORF136基因重组表达蛋白多克隆抗体的制备为ORF136蛋白功能研究和CyHV‑3血清学诊断方法的建立提供了重要材料。
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公开(公告)号：CN103952369A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410133998.2
申请日：2014-04-03
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一株草鱼鱼鳔上皮样细胞系及其应用。保藏编号为CCTCCNo.C201443的草鱼鱼鳔上皮样细胞系，草鱼呼肠孤病毒GCRV在该细胞系中的增殖量显著高于目前常用于分离GCRV的CIK、CO、PSF、FHM、EPC等细胞系，且细胞病变时间快，因此，该细胞系可很好地应用于草鱼呼肠孤病毒的分离、繁殖及草鱼出血病疫苗研究。
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公开(公告)号：CN103756973A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201310738293.9
申请日：2013-12-26
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/18 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了抗草鱼IgM的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。所述抗草鱼IgM的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCCNO:C2013193的杂交瘤细胞株S467分泌产生的。利用所述的单克隆抗体构建了一种草鱼呼肠孤病毒间接ELISA检测试剂盒，所述试剂盒中包括抗草鱼IgM的单克隆抗体的酶标记物，包被有抗原的酶标板。本发明所构建的草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型ELISA检测试剂盒可以对草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型特异性抗体的进行定性或定量检测，同时可以检测草鱼多份血清样品并达到早期诊断的目的，对草鱼出血病的诊断、流行病学调查和病原监测具有较高的临床使用及推广价值，为降低水产养殖过程中因草鱼出血病所带来的巨大经济损失提供了技术保障。
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公开(公告)号：CN102816868A
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201210316708.9
申请日：2012-08-30
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种检测大口黑鲈虹彩病毒的双重PCR方法，通过设计的两对特异性引物和优选的反应体系、反应条件，可同时检测、鉴别蛙病毒属和肿大细胞病毒属两种虹彩病毒，该发明方法敏感性强、特异性高，可以快速、准确地对大口黑鲈虹彩病毒进行诊断和种属鉴定。
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公开(公告)号：CN116836912B
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202310765642.X
申请日：2023-06-26
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种大口黑鲈吻端细胞系及其构建方法和应用；所述细胞系的保藏编号为CCTCC NO：C2023121；该细胞系的染色体为56条，为永久细胞系，可以无限增殖，并可对其进行冷冻保存；而且YL03‑S细胞对大口黑鲈易感的LMBV、ISKNV、MSRV均非常敏感，用此细胞系扩增这三种病毒的增殖量显著高于大口黑鲈心肌细胞系、鳜鱼脑细胞系CPB，可以用于大口黑鲈易感病毒疫苗的研发中；还可用于表达外源基因进行基因功能的研究；该细胞系的建立在丰富大口黑鲈细胞库的同时可为水产动物病毒性疾病的病原分离、培养、检测提供保障，还可为开展大口黑鲈易感病毒的感染途径、感染机理以及研制病毒疫苗等提供了便利。
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