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公开(公告)号：CN116836912B
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202310765642.X
申请日：2023-06-26
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种大口黑鲈吻端细胞系及其构建方法和应用；所述细胞系的保藏编号为CCTCC NO：C2023121；该细胞系的染色体为56条，为永久细胞系，可以无限增殖，并可对其进行冷冻保存；而且YL03‑S细胞对大口黑鲈易感的LMBV、ISKNV、MSRV均非常敏感，用此细胞系扩增这三种病毒的增殖量显著高于大口黑鲈心肌细胞系、鳜鱼脑细胞系CPB，可以用于大口黑鲈易感病毒疫苗的研发中；还可用于表达外源基因进行基因功能的研究；该细胞系的建立在丰富大口黑鲈细胞库的同时可为水产动物病毒性疾病的病原分离、培养、检测提供保障，还可为开展大口黑鲈易感病毒的感染途径、感染机理以及研制病毒疫苗等提供了便利。
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公开(公告)号：CN116731203A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310520431.X
申请日：2023-05-09
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C07K19/00 , A23K10/18 , A23K20/147 , A23K20/153 , A23K50/80 , C12N15/62 , C12N15/74 , C12N1/21 , A61K39/15 , A61K39/385 , A61P31/14 , C12R1/01
摘要： 本发明属于基因工程及分子免疫学技术领域，具体涉及一种融合表达GCRV VP4和LTB的重组乳酸菌及其制备方法与应用。本发明提供了一种融合蛋白，包含GCRV VP4蛋白和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位蛋白；通过大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位蛋白可以进一步提升VP4蛋白被肠黏膜免疫组织抗原呈递细胞直接识别并呈递抗原，激活先天性免疫Toll样受体信号转导，提高免疫相关基因(IFNα、TLR3、TLR5、MyD88、NF‑κB、Mx、IRF3、IRF7、MHCII、IL‑1β和/或IL‑8基因)表达水平，增强鱼体抗病毒能力。
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公开(公告)号：CN116376795A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310322625.9
申请日：2023-03-29
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 上海海洋大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/12 , A23K10/18 , A23K50/80 , A61K35/744 , A61K35/747 , A61K38/17 , A61P33/02 , C12R1/01
摘要： 本发明属于基因工程及分子免疫学技术领域，具体涉及一种表达HSP70的重组乳酸菌及其制备方法与应用。该重组乳酸菌以乳酸菌作为活载体，表达HSP70蛋白，既能发挥乳酸菌的益生功能，又能发挥功能性蛋白(HSP70蛋白)在鱼类黏膜防御系统中关键调节作用，阻断小瓜虫感染，提高乳酸菌的抗小瓜虫感染的生态防病效果。
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公开(公告)号：CN112680544B
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN202011577941.3
申请日：2020-12-28
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种用于检测Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的实时荧光RT‑RPA引物、探针和试剂盒及其应用。本发明通过基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒特定的保守区域设计筛选得到引物和探针的最佳组合，其检测灵敏度高、特异性好、检测效果稳定；而且与包括Ⅰ型GCRV和Ⅲ型GCRV在内的9种鱼类常见病毒和草鱼易感染细菌维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌均无交叉反应，表现出良好的特异性。基于本发明所建立的实时荧光RT‑RPA引物、探针及检测试剂盒，对于基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒检测灵敏度为101copy/μl，检测灵敏度比巢氏PCR方法高10倍，不需要大型仪器设备，检测时间仅需4.5～30min，大大缩短了检测时间，可用于现场快速检测。
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公开(公告)号：CN113604438A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110751722.0
申请日：2021-07-02
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了一种抗罗非鱼湖病毒的单克隆抗体及其细胞株和应用，该杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞TiLV S10E3，于2020年11月5日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2020209。该杂交瘤细胞株由SP2/0骨髓瘤细胞与免疫了罗非鱼湖病毒S10节段编码蛋白的小鼠脾细胞融合得到，能够无限增殖并持续产生抗罗非鱼湖病毒S10节段编码蛋白的单克隆抗体，产生的单克隆抗体效价高，对罗非鱼湖病毒具有较好的特异性，可用于各类体外检测、野毒株病毒筛选分离以及抗病毒药物筛选等多个方面，具有极高的应用及科研价值。
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公开(公告)号：CN112680544A
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202011577941.3
申请日：2020-12-28
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种用于检测Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的实时荧光RT‑RPA引物、探针和试剂盒及其应用。本发明通过基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒特定的保守区域设计筛选得到引物和探针的最佳组合，其检测灵敏度高、特异性好、检测效果稳定；而且与包括Ⅰ型GCRV和Ⅲ型GCRV在内的9种鱼类常见病毒和草鱼易感染细菌维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌均无交叉反应，表现出良好的特异性。基于本发明所建立的实时荧光RT‑RPA引物、探针及检测试剂盒，对于基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒检测灵敏度为101copy/μl，检测灵敏度比巢氏PCR方法高10倍，不需要大型仪器设备，检测时间仅需4.5～30min，大大缩短了检测时间，可用于现场快速检测。
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公开(公告)号：CN111690584A
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN202010549557.6
申请日：2020-06-16
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 一种基于无乳链球菌fbsA基因的重组乳酸乳球菌，所述重组乳酸乳球菌包含无乳链球菌的fbsA基因或其片段，该fbsA基因或其片段优选具有由SEQ ID No.1所示的序列。重组乳酸乳球菌的保藏编号是CCTCC M 2020140，其在存在乳酸菌肽的培养条件下能诱导表达分子量理论值为34.6kDa的重组FbsA蛋白。本发明还提供基于该重组乳酸乳球菌制备的罗非鱼无乳链球菌病疫苗，该疫苗通过口服灌胃免疫罗非鱼后能够在罗非鱼体内产生保护性抗体，从而有效地帮助罗非鱼抵御无乳链球菌的感染。
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公开(公告)号：CN110551689B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201910743467.8
申请日：2019-08-13
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种乌斑鳢脑细胞系及其构建方法和应用，本发明针对乌斑鳢脑组织细胞的特征，采用胶原酶I和胰酶联合消化法分离脑组织细胞，进行原代培养，继而成功构建了乌斑鳢脑细胞系，已连续传至100代以上，可提供大量的乌斑鳢脑来源细胞，且细胞能维持良好的生长状态，可以对其进行冷冻保存。乌斑鳢脑细胞系对多种鱼类病毒具有敏感性，接毒后均出现细胞病变，而且乌斑鳢脑细胞系还可用于鳢源舒伯特气单胞菌的黏附特性研究，可以直接应用于病原特性研究及疫苗研制。
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公开(公告)号：CN108866008B
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201810680288.X
申请日：2018-06-27
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/535
摘要： 本发明公开了抗锦鲤疱疹病毒的单克隆抗体制备方法及其应用，本发明制备的抗锦鲤疱疹病毒的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO：C201887的小鼠杂交瘤细胞株分泌产生的，单克隆抗体的效价为1：1.28×105；杂交瘤细胞株活性高，可识别锦鲤疱疹病毒结构蛋白，特异性强。并在此的基础上建立了检测锦鲤疱疹病毒的夹心ELISA检测方法，其最低检测浓度为3.923ng/mL，利用上述单克隆抗体建立了检测锦鲤疱疹病毒的间接夹心ELISA试剂盒，可用于大规模锦鲤疱疹病毒的检测，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN108865974B
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201810669284.1
申请日：2018-06-26
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种罗非鱼脑细胞系的构建方法，其步骤是：取鲜活罗非鱼消毒取脑组织，剪碎块，用胶原酶处理后，加入胰蛋白酶；用含培养液充分悬浮，进行原代培养；细胞长满瓶底时，用胰酶‑EDTA消化，接种传代培养；传代培养60代后，于对数生长期加入秋水仙素处理并进行核型分析。本发明公开的罗非鱼脑细胞系的制备方法，方法简单方便；并且用该方法制备的罗非鱼脑细胞系，可以进行长时间的传代培养，对罗非鱼出血病病毒非常敏感，可以广泛应用于实验中。
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