一种乌斑鳢脑细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110551689B

    公开(公告)日:2020-08-04

    申请号:CN201910743467.8

    申请日:2019-08-13

    IPC分类号: C12N5/079 C12R1/91

    摘要: 本发明公开了一种乌斑鳢脑细胞系及其构建方法和应用,本发明针对乌斑鳢脑组织细胞的特征,采用胶原酶I和胰酶联合消化法分离脑组织细胞,进行原代培养,继而成功构建了乌斑鳢脑细胞系,已连续传至100代以上,可提供大量的乌斑鳢脑来源细胞,且细胞能维持良好的生长状态,可以对其进行冷冻保存。乌斑鳢脑细胞系对多种鱼类病毒具有敏感性,接毒后均出现细胞病变,而且乌斑鳢脑细胞系还可用于鳢源舒伯特气单胞菌的黏附特性研究,可以直接应用于病原特性研究及疫苗研制。

    一种乌斑鳢肾细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110295137B

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN201910626036.3

    申请日:2019-07-11

    IPC分类号: C12N5/071 C12R1/91

    摘要: 本发明公开了一种乌斑鳢肾细胞系,其分类命名为乌斑鳢肾细胞系CAMK,于2019年5月8日保存在中国典型培养物保藏中心,保藏登记编号为CCTCC NO:C201994,上述乌斑鳢肾细胞系的构建方法为:取乌斑鳢消毒后取肾,于含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养基中浸泡后剪成小块,胰酶消化液消化,完全培养基重悬混匀,得到重悬混匀液于细胞培养瓶中恒温培养至细胞铺满板子,用胰酶‑EDTA消化液消化后,加入完全培养基继续培养,传代3次后,冻存即得乌斑鳢肾细胞系。本发明中首次成功在体外培养了乌斑鳢肾细胞系,所使用的是鱼类细胞培养的最常用的培养基、且在简单的条件进行原代细胞筛选培养,保证最终获得的细胞无需特殊试剂和条件就能增殖,为其今后的应用提供更好的空间。

    采用嗜热四膜虫筛选抗鱼纤毛类寄生虫中草药成分的方法

    公开(公告)号:CN111197067A

    公开(公告)日:2020-05-26

    申请号:CN202010035541.3

    申请日:2020-01-14

    IPC分类号: C12Q1/02 G01N33/50

    摘要: 本发明公开了一种采用嗜热四膜虫筛选抗鱼纤毛类寄生虫中草药成分的方法,S1、对嗜热四膜虫进行培养;S2、对嗜热四膜虫生长曲线的测定;S3、中草药水煮液或中药单体试液的制备;S4、通过药物对嗜热四膜虫进行培养暴露;S5、药物暴露处理的嗜热四膜虫试液,进行细胞计数,分析药物抑制嗜热四膜虫生长的半数抑制浓度;S6、CCK-8法测定细胞活力随药物浓度的变化,用SPSS软件计算CC50;S7、评估中草药对嗜热四膜虫的抑制杀灭效果;S8、设计药物浓度,添加入饲料中,评估鱼类对寄生虫的作用效果。采用可人工培养的嗜热四膜虫代替鱼纤毛类寄生虫,进行抗虫药物大通量筛选,受试材料随时可得,不受时间、温度、季节的限制,且具重复性好、经济适用快速。