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公开(公告)号:CN110551689B
公开(公告)日:2020-08-04
申请号:CN201910743467.8
申请日:2019-08-13
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要: 本发明公开了一种乌斑鳢脑细胞系及其构建方法和应用,本发明针对乌斑鳢脑组织细胞的特征,采用胶原酶I和胰酶联合消化法分离脑组织细胞,进行原代培养,继而成功构建了乌斑鳢脑细胞系,已连续传至100代以上,可提供大量的乌斑鳢脑来源细胞,且细胞能维持良好的生长状态,可以对其进行冷冻保存。乌斑鳢脑细胞系对多种鱼类病毒具有敏感性,接毒后均出现细胞病变,而且乌斑鳢脑细胞系还可用于鳢源舒伯特气单胞菌的黏附特性研究,可以直接应用于病原特性研究及疫苗研制。
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公开(公告)号:CN108020664A
公开(公告)日:2018-05-11
申请号:CN201711274976.8
申请日:2017-12-06
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/533
摘要: 本发明涉及一种检测II型草鱼呼肠孤病毒疫苗中病毒含量的试剂盒及方法,进一步地涉及活疫苗或灭活疫苗(病毒灭活前)的病毒含量的测定,所述试剂盒包括用于检测基因II型GCRV VP41的血清抗体、FITC标记的羊抗兔IgG、阳性对照样品、固定液和PBS洗液。检测方法为将活疫苗或灭活疫苗(病毒灭活前)进行梯度稀释后接种于PSF细胞,连续培养完成后再用本发明所述的试剂盒进行免疫荧光检测,将检测结果进行计算得出相应的病毒含量。本发明的试剂盒及方法灵敏度高、特异性强,且能定量检测活病毒。
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公开(公告)号:CN106148379A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201610595710.2
申请日:2016-07-26
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC分类号: C12N15/74 , C12N15/65 , C12N2800/101
摘要: 本发明提出了一种绿色荧光蛋白基因标记鳢源舒伯特气单胞菌的方法,构建了pMDGFP重组载体,并导入到舒伯特气单胞菌强毒株WL‑2中。在荧光显微镜下观察,菌体呈现绿色荧光。稳定性试验表明,WL2GFP传至30代,质粒稳定率可达100%。绿色荧光蛋白基因的导入为研究鳢源舒伯特气单胞菌与宿主的相互关系提供了一种简单而直观的方法。
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公开(公告)号:CN103397106A
公开(公告)日:2013-11-20
申请号:CN201310302713.9
申请日:2013-07-18
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要: 本发明公开了杂交鳢弹状病毒荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法,试剂盒中含有特异性引物HSHRV-2F、HSHRV-2R和探针HSHRV-2probe,将该试剂盒用于检测杂交鳢弹状病毒,具有灵敏度高、重复性强、特异性好的特点,能够快速、准确地对杂交鳢弹状病毒进行定性和定量,对于杂交鳢病毒病的早期诊断、分子流行病学研究以及防控技术研究等具有重要意义。
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公开(公告)号:CN112940982B
公开(公告)日:2021-09-17
申请号:CN202110314681.9
申请日:2021-03-24
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号: C12N1/20 , A61K35/742 , A61P31/04 , A61P37/04 , C02F3/34 , A23K10/18 , A23K50/80 , C12R1/07 , C02F103/20
摘要: 本发明公开了一株贝莱斯芽孢杆菌及其在水产养殖中的应用。贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)WLYS23菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No:60890。本发明的贝莱斯芽孢杆菌分离自健康杂交鳢,是一种内源性菌株,该菌株对舒氏气单胞菌、简氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌、水生气单胞菌、类志贺邻单胞菌和鰤鱼诺卡氏菌7种水产动物致病菌均具有较强的拮抗效果。
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公开(公告)号:CN113046479A
公开(公告)日:2021-06-29
申请号:CN202110293758.9
申请日:2021-03-19
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了一种锦鲤疱疹病毒RPA引物组、探针和检测试剂盒及其应用,所述RPA引物组序列如SEQ ID NO.4~19所示,所述探针序列如SEQ ID NO.2~3所示。本发明中提供的探针和引物灵敏度高,检测效果稳定,特异性强。基于此构建的检测试剂及检测试剂盒均具有很高的检测灵敏度,最低检测限为100copy/μL,检测时间仅需4~18min,相比KHV检测金标准PCR及real‑time PCR均具有时间和检测精度上的优势,具有极高的应用价值。
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公开(公告)号:CN107827980A
公开(公告)日:2018-03-23
申请号:CN201710943373.6
申请日:2017-10-11
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC分类号: C07K16/085 , C07K16/06
摘要: 本发明公开了一种orf132基因重组表达蛋白多克隆抗体的制备方法,其包括以下步骤:选择截短的orf132基因序列进行特异性扩增,进行蛋白表达,纯化后,将表达的蛋白进行皮下多点注射免疫制备多克隆抗体;其中,截短的orf132基因序列为ORF132基因的第283~513位碱基序列。本发明采取截短了orf132基因序列,并进行重组表达,制备抗体的办法,克服了orf132完整的基因序列无法正常表达的缺点,并且利用截短后的表达蛋白制备的多抗对完整的蛋白依然具有比较好的效果。
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公开(公告)号:CN102388832B
公开(公告)日:2013-07-17
申请号:CN201110298499.5
申请日:2011-10-08
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号: A01K63/00
摘要: 本发明公开了一种便于排污的鱼缸,其包括缸体,所述缸体的底壁整体向下凹陷,且在凹陷处设有排水孔,所述排水孔设有阀门机构。本发明的缸体底壁整体向下凹陷,并在凹陷处设置排水孔,这样的话,在养殖鱼类过程中所产生的污物就可以沉积并导流至排水孔处,当阀门机构控制排水孔打开时,即可让污物随着水流一并带走。本发明结构简单巧妙,方便排污,可作为饲养鱼类等水生物的养殖容器使用。
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公开(公告)号:CN110295137B
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN201910626036.3
申请日:2019-07-11
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要: 本发明公开了一种乌斑鳢肾细胞系,其分类命名为乌斑鳢肾细胞系CAMK,于2019年5月8日保存在中国典型培养物保藏中心,保藏登记编号为CCTCC NO:C201994,上述乌斑鳢肾细胞系的构建方法为:取乌斑鳢消毒后取肾,于含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养基中浸泡后剪成小块,胰酶消化液消化,完全培养基重悬混匀,得到重悬混匀液于细胞培养瓶中恒温培养至细胞铺满板子,用胰酶‑EDTA消化液消化后,加入完全培养基继续培养,传代3次后,冻存即得乌斑鳢肾细胞系。本发明中首次成功在体外培养了乌斑鳢肾细胞系,所使用的是鱼类细胞培养的最常用的培养基、且在简单的条件进行原代细胞筛选培养,保证最终获得的细胞无需特殊试剂和条件就能增殖,为其今后的应用提供更好的空间。
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公开(公告)号:CN111197067A
公开(公告)日:2020-05-26
申请号:CN202010035541.3
申请日:2020-01-14
申请人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要: 本发明公开了一种采用嗜热四膜虫筛选抗鱼纤毛类寄生虫中草药成分的方法,S1、对嗜热四膜虫进行培养;S2、对嗜热四膜虫生长曲线的测定;S3、中草药水煮液或中药单体试液的制备;S4、通过药物对嗜热四膜虫进行培养暴露;S5、药物暴露处理的嗜热四膜虫试液,进行细胞计数,分析药物抑制嗜热四膜虫生长的半数抑制浓度;S6、CCK-8法测定细胞活力随药物浓度的变化,用SPSS软件计算CC50;S7、评估中草药对嗜热四膜虫的抑制杀灭效果;S8、设计药物浓度,添加入饲料中,评估鱼类对寄生虫的作用效果。采用可人工培养的嗜热四膜虫代替鱼纤毛类寄生虫,进行抗虫药物大通量筛选,受试材料随时可得,不受时间、温度、季节的限制,且具重复性好、经济适用快速。
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