公开(公告)号：CN115807039A

公开(公告)日：2023-03-17

申请号：CN202211492806.8

申请日：2022-11-26

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

发明人： 鲁茁壮 ,  孙洋洋 ,  邹小辉

IPC分类号： C12N15/861 ,  C12N15/34 ,  C12N15/12 ,  A61K39/235 ,  A61P35/00 ,  A61P31/14 ,  A61P31/16 ,  A61P33/10

摘要： 本发明公开了fiber假型禽4型腺病毒载体及其应用，载体包括禽4型腺病毒的基因组序列、pBR322的复制起点核酸序列和卡那霉素抗性核酸序列。所述基因组序列经过人工改造，包括：将fiber2的knob编码序列替换为CELO病毒fiber1的knob编码序列；在外源基因表达框启动子上游和目的基因编码区下游分别添加一个限制性内切酶SwaI酶切位点。本发明改造后的禽4型腺病毒载体能够提高对哺乳动物细胞和禽类细胞的基因转导效率，可以用于制备哺乳动物的重组疫苗或基因治疗试剂盒，也可以用于制备禽类的重组疫苗。

公开(公告)号：CN108660158B

公开(公告)日：2021-01-08

申请号：CN201810233613.8

申请日：2018-03-22

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ,  江苏省农业科学院

发明人： 鲁茁壮 ,  邹小辉 ,  洪涛 ,  朱亚露 ,  赵阳

IPC分类号： C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  A61K39/235 ,  A61P35/00 ,  A61P31/16

摘要： 本发明提供一种重组禽腺病毒FAdV‑4载体系统，包括骨架质粒pKFAV4、中间质粒pKFAV4AP和穿梭质粒pKFAV4APNM。将目的基因编码区克隆到穿梭质粒的多克隆位点，NheI酶切携带目的基因表达框的穿梭质粒，用所得片段替换中间质粒的对应部位；再用AvrII或PacI酶切携带目的基因的中间质粒，借助连接反应或DNA组装反应将所得片段替换骨架质粒的对应部位，可获得重组腺病毒质粒；PmeI线性化腺病毒质粒转染LMH细胞，能够制备由人巨细胞启动子(CMVp)控制目的基因表达的重组FAdV‑4腺病毒。在制备的重组腺病毒中，FAdV‑4基因组Orf1‑Orf2区域由目的基因表达框替代，腺病毒的其他区域保留。预计其在鸟类口服疫苗研发中具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN108660158A

公开(公告)日：2018-10-16

申请号：CN201810233613.8

申请日：2018-03-22

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ,  江苏省农业科学院

发明人： 鲁茁壮 ,  邹小辉 ,  洪涛 ,  朱亚露 ,  赵阳

IPC分类号： C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  A61K39/235 ,  A61P35/00 ,  A61P31/16

摘要： 本发明提供一种重组禽腺病毒FAdV-4载体系统，包括骨架质粒pKFAV4、中间质粒pKFAV4AP和穿梭质粒pKFAV4APNM。将目的基因编码区克隆到穿梭质粒的多克隆位点，NheI酶切携带目的基因表达框的穿梭质粒，用所得片段替换中间质粒的对应部位；再用AvrII或PacI酶切携带目的基因的中间质粒，借助连接反应或DNA组装反应将所得片段替换骨架质粒的对应部位，可获得重组腺病毒质粒；PmeI线性化腺病毒质粒转染LMH细胞，能够制备由人巨细胞启动子(CMVp)控制目的基因表达的重组FAdV-4腺病毒。在制备的重组腺病毒中，FAdV-4基因组Orf1-Orf2区域由目的基因表达框替代，腺病毒的其他区域保留。预计其在鸟类口服疫苗研发中具有广阔的应用前景。