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公开(公告)号：CN111218477B
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202010165467.7
申请日：2020-03-11
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
IPC分类号： C12N15/861 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K39/00
摘要： 本发明公开了靶向感染哺乳动物细胞的禽4型腺病毒载体及其应用，载体包括禽4型腺病毒的基因组序列、pBR322的复制起点核酸序列和卡那霉素抗性核酸序列；所述基因组序列中的fiber核酸序列经过人工改造，包括：在fiber基因Knob区中插入RGD4C短肽核酸序列，和/或，将fiber基因Knob区替换为人35型腺病毒fiber Knob的核酸序列。本发明改造后的禽4型腺病毒载体能够提高对哺乳动物细胞的感染效率，可以用于制备哺乳动物的重组疫苗或基因治疗试剂盒。
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公开(公告)号：CN108048483B
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN201810092715.2
申请日：2018-01-30
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 , 北京知光基因科技有限公司
IPC分类号： C12N15/861
摘要： 本发明提供一种复制型重组腺病毒HAdV‑5载体系统，其包括骨架质粒pKAd5、中间质粒pMDXE3YA和穿梭质粒pKNXE3M。将目的基因编码区克隆到穿梭质粒的多克隆位点，EcoRI酶切携带目的基因的穿梭质粒，用所得片段替换中间质粒的对应部位；再用NdeI酶切新构建的中间质粒，用所得片段替换骨架质粒的对应部位，可获得重组腺病毒质粒；PacI线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞，能够制备由HAdV‑5主要晚期启动子(MLP)控制目的基因表达的重组HAdV‑5腺病毒。该重组腺病毒在各种人类细胞中均可以复制增殖，是复制型病毒，预计其在动物口服载体疫苗研发中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN109762842B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201811430086.6
申请日：2018-11-28
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
IPC分类号： C12N15/861 , A61K39/00 , A61P33/10
摘要： 提供一种复制型人41型腺病毒(HAdV‑41)载体系统及重组病毒构建方法。载体系统包括腺病毒质粒pKAd41P5A‑CG。该质粒含有人工改造的HAdV‑41基因组：E1区和E4区启动子由HAdV‑5对应序列替换；E3区由HAdV‑5的ADP基因替换；在E1B55K和pIX基因之间添加人巨细胞病毒启动子和绿色荧光蛋白编码区(pGFP)，pGFP两端各含有一个MluI酶切位点。设计引物，PCR扩增外源基因序列(pTransgene)，该片段两端含有MluI位点并且与pKAd41P5A‑CG MluI位点两侧存在约30bp重叠区。使用MluI酶切/连接，或通过Gibson组装方法，可将pKAd41P5A‑CG中pGFP替换为pTransgene，制备携带外源基因的腺病毒质粒；将PmeI线性化的质粒转染包装细胞，能够拯救复制型HAdV‑41重组病毒。预计本载体系统可以用于制备人或哺乳动物的口服载体疫苗。
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公开(公告)号：CN109762842A
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201811430086.6
申请日：2018-11-28
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
IPC分类号： C12N15/861 , A61K39/00 , A61P33/10
摘要： 提供一种复制型人41型腺病毒(HAdV-41)载体系统及重组病毒构建方法。载体系统包括腺病毒质粒pKAd41P5A-CG。该质粒含有人工改造的HAdV-41基因组：E1区和E4区启动子由HAdV-5对应序列替换；E3区由HAdV-5的ADP基因替换；在E1B55K和pIX基因之间添加人巨细胞病毒启动子和绿色荧光蛋白编码区(pGFP)，pGFP两端各含有一个MluI酶切位点。设计引物，PCR扩增外源基因序列(pTransgene)，该片段两端含有MluI位点并且与pKAd41P5A-CG MluI位点两侧存在约30bp重叠区。使用MluI酶切/连接，或通过Gibson组装方法，可将pKAd41P5A-CG中pGFP替换为pTransgene，制备携带外源基因的腺病毒质粒；将PmeI线性化的质粒转染包装细胞，能够拯救复制型HAdV-41重组病毒。预计本载体系统可以用于制备人或哺乳动物的口服载体疫苗。
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公开(公告)号：CN108048483A
公开(公告)日：2018-05-18
申请号：CN201810092715.2
申请日：2018-01-30
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 , 北京知光基因科技有限公司
IPC分类号： C12N15/861
摘要： 本发明提供一种复制型重组腺病毒HAdV‑5载体系统，其包括骨架质粒pKAd5、中间质粒pMDXE3YA和穿梭质粒pKNXE3M。将目的基因编码区克隆到穿梭质粒的多克隆位点，EcoRI酶切携带目的基因的穿梭质粒，用所得片段替换中间质粒的对应部位；再用NdeI酶切新构建的中间质粒，用所得片段替换骨架质粒的对应部位，可获得重组腺病毒质粒；PacI线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞，能够制备由HAdV‑5主要晚期启动子(MLP)控制目的基因表达的重组HAdV‑5腺病毒。该重组腺病毒在各种人类细胞中均可以复制增殖，是复制型病毒，预计其在动物口服载体疫苗研发中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102533657A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010622987.2
申请日：2010-12-28
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
摘要： 本发明涉及基因治疗和重组疫苗领域中一种人41型腺病毒(Ad41)的包装细胞株及其应用，具体地说，本发明涉及一种人41型腺病毒(Ad41)包装细胞株293TE7及其应用，该包装细胞株稳定表达Ad41 E1B55K基因，可以用于包装野生型Ad41或E1区缺失的重组Ad41。
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公开(公告)号：CN113388641B
公开(公告)日：2022-10-21
申请号：CN202110734887.7
申请日：2021-06-30
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 , 北京市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种禽4型腺病毒载体、构建方法及其减毒活疫苗和应用。本发明的禽4型腺病毒载体包括pBR322质粒的复制起点核酸序列、卡那霉素抗性基因核酸序列和禽4型腺病毒的基因组序列；所述禽4型腺病毒的基因组序列中，ORF1，ORF1B，ORF2，ORF19A以及GAM‑1基因均失活。将线性化后的禽4型腺病毒载体转染细胞后拯救获得的禽4型腺病毒作为减毒活疫苗，不具备致病性，安全性高，具有很好的免疫保护效果，可以用于制备预防禽腺病毒感染引起的疾病的药物。
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公开(公告)号：CN113388641A
公开(公告)日：2021-09-14
申请号：CN202110734887.7
申请日：2021-06-30
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 , 北京市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种禽4型腺病毒载体、构建方法及其减毒活疫苗和应用。本发明的禽4型腺病毒载体包括pBR322质粒的复制起点核酸序列、卡那霉素抗性基因核酸序列和禽4型腺病毒的基因组序列；所述禽4型腺病毒的基因组序列中，ORF1，ORF1B，ORF2，ORF19A以及GAM‑1基因均失活。将线性化后的禽4型腺病毒载体转染细胞后拯救获得的禽4型腺病毒作为减毒活疫苗，不具备致病性，安全性高，具有很好的免疫保护效果，可以用于制备预防禽腺病毒感染引起的疾病的药物。
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公开(公告)号：CN111218477A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN202010165467.7
申请日：2020-03-11
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
IPC分类号： C12N15/861 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K39/00
摘要： 本发明公开了靶向感染哺乳动物细胞的禽4型腺病毒载体及其应用，载体包括禽4型腺病毒的基因组序列、pBR322的复制起点核酸序列和卡那霉素抗性核酸序列；所述基因组序列中的fiber核酸序列经过人工改造，包括：在fiber基因Knob区中插入RGD4C短肽核酸序列，和/或，将fiber基因Knob区替换为人35型腺病毒fiber Knob的核酸序列。本发明改造后的禽4型腺病毒载体能够提高对哺乳动物细胞的感染效率，可以用于制备哺乳动物的重组疫苗或基因治疗试剂盒。
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公开(公告)号：CN102533657B
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201010622987.2
申请日：2010-12-28
申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
摘要： 本发明涉及基因治疗和重组疫苗领域中一种人41型腺病毒(Ad41)的包装细胞株及其应用，具体地说，本发明涉及一种人41型腺病毒(Ad41)包装细胞株293TE7及其应用，该包装细胞株稳定表达Ad41 E1B55K基因，可以用于包装野生型Ad41或E1区缺失的重组Ad41。
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