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公开(公告)号:CN106636149B
公开(公告)日:2019-10-25
申请号:CN201710001526.5
申请日:2017-01-03
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明公开了斯氏副柔线虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Pj_STPK基因克隆、原核表达方法及应用,通过斯氏副柔线虫转录组测序,预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析,找出斯氏副柔线虫特有基因,用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_STPK,克隆测序后,构建到原核表达载体pET30a中,转化至E.coli BL21,进行诱导表达,用Western‑bloting法验证重组蛋白rSTPK的免疫原性。斯氏副柔线虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Pj_STPK基因重组蛋白经纯化后,建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。
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公开(公告)号:CN105646680B
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201610084617.5
申请日:2016-02-06
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C07K14/23 , C12N15/31 , C12N15/11 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种家畜S2疫苗免疫与羊/牛种布鲁氏菌感染的IELISA检测试剂,所述IELISA检测试剂的有效成分为布鲁氏菌S2疫苗株基因GL_0002181编码的抗原蛋白以及布鲁氏菌BP26蛋白,或者它们的N端或C端融合有His标签的重组蛋白。本发明提供的IELISA检测试剂能鉴别布鲁氏菌主要流行株—羊种/牛种布鲁氏菌及市场上普遍使用的主流疫苗—S2疫苗,能够在短时间内鉴别家畜血清中疫苗免疫与羊种/牛种布鲁氏菌自然感染抗体,解决免疫畜群中疫苗抗体干扰布病检测和畜群净化的难题。不仅可带来社会经济效益,而且可为净化畜群中的布鲁氏菌病做出贡献。
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公开(公告)号:CN107312786A
公开(公告)日:2017-11-03
申请号:CN201710575781.0
申请日:2017-07-14
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶的制备方法及应用,通过斯氏副柔线虫转录组测序,预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析,找出斯氏副柔线虫特有基因,用RT-PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPR,克隆测序后,构建到原核表达载体pET30a中,转化至E.coli BL21,进行诱导表达,用Western-bloting法验证重组蛋白rCPR的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶Pj_CPR基因重组蛋白经纯化后,建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。
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公开(公告)号:CN106636122A
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201710002348.8
申请日:2017-01-03
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明公开了斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因克隆、重组表达方法及应用,通过斯氏副柔线虫转录组测序,预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析,找出斯氏副柔线虫特有基因,用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPI,克隆测序后,构建到原核表达载体pET30a中,转化至E.coli BL21,进行诱导表达,用Western‑bloting法验证重组蛋白rCPI的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因重组蛋白经纯化后,建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。
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公开(公告)号:CN118186108A
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202410293645.2
申请日:2024-03-14
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,尤其涉及一种鉴别布鲁氏菌S2疫苗株的定量PCR检测方法。本发明新发现了布鲁氏菌S2疫苗株1bp特异性缺失基因,并利用该基因设计了引物、探针与试剂盒,实际为布鲁氏菌S2疫苗株鉴别诊断提供了新的检测方法,该检测方法特异性好、敏感性高且重复性好。
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公开(公告)号:CN114058719B
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202110858702.3
申请日:2021-07-28
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种用于鉴定布鲁氏菌的引物对及其应用。本发明提供一种用于鉴定布鲁氏菌的引物组合,其中包括的引物对分别可鉴定牛种、羊种、猪种、犬种、牛种A19疫苗株、牛种S19疫苗株布鲁氏菌。本发明提供的引物对和试剂可以鉴别牛种、羊种、猪种、犬种布鲁氏菌以及S19和S19疫苗株,解决免疫畜群中疫苗与自然强毒株难以区分和畜群净化的难题。不仅可带来社会经济效益,还可为净化畜群中的布鲁氏菌病做出贡献。
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公开(公告)号:CN113637056B
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202110858704.2
申请日:2021-07-28
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12Q1/689 , G01N33/543 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种用于鉴别牛种布鲁氏菌与其它种布鲁氏菌的试剂盒,该试剂盒包被有SEQ ID NO.2所示蛋白和布鲁氏菌BP26蛋白。本发明发现SEQ ID NO.2所述蛋白或其编码基因可用于区分牛种布鲁氏菌与其它种布鲁氏菌。本发明提供鉴别牛种布鲁氏菌与其它种布鲁氏菌感染血清的iELISA检测试剂,该试剂含有前述两种蛋白,或含有前述两种蛋白的N端或C端融合有His标签的重组蛋白。本发明提供的iELISA检测试剂能够快速鉴别家畜血清中牛种疫苗免疫或野毒与其它种(羊,猪,犬等)疫苗免疫或野毒的抗体,解决畜群中布鲁氏菌种型鉴定难的问题,为家畜布鲁氏菌病的病原鉴定、疫苗选择和畜群净化提供参考。
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公开(公告)号:CN113637056A
公开(公告)日:2021-11-12
申请号:CN202110858704.2
申请日:2021-07-28
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12Q1/689 , G01N33/543 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种用于鉴别牛种布鲁氏菌与其它种布鲁氏菌的试剂盒,该试剂盒包被有SEQ ID NO.2所示蛋白和布鲁氏菌BP26蛋白。本发明发现SEQ ID NO.2所述蛋白或其编码基因可用于区分牛种布鲁氏菌与其它种布鲁氏菌。本发明提供鉴别牛种布鲁氏菌与其它种布鲁氏菌感染血清的iELISA检测试剂,该试剂含有前述两种蛋白,或含有前述两种蛋白的N端或C端融合有His标签的重组蛋白。本发明提供的iELISA检测试剂能够快速鉴别家畜血清中牛种疫苗免疫或野毒与其它种(羊,猪,犬等)疫苗免疫或野毒的抗体,解决畜群中布鲁氏菌种型鉴定难的问题,为家畜布鲁氏菌病的病原鉴定、疫苗选择和畜群净化提供参考。
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公开(公告)号:CN105693831A
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201610084616.0
申请日:2016-02-06
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C07K14/23 , C12N15/31 , C12N15/11 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/23 , G01N33/56911 , G01N33/68 , G01N2333/23
Abstract: 本发明提供一种家畜S2疫苗免疫与羊/牛种布鲁氏菌感染的IELISA检测试剂,所述IELISA检测试剂的有效成分为布鲁氏菌S2疫苗株基因GL_0002189编码的抗原蛋白以及布鲁氏菌BP26蛋白,或者它们的N端或C端融合有His标签的重组蛋白。本发明提供的IELISA检测试剂能鉴别布鲁氏菌主要流行株—羊种/牛种布鲁氏菌及市场上普遍使用的主流疫苗—S2疫苗。因此,能够在短时间内鉴别家畜血清中疫苗免疫与羊种/牛种布鲁氏菌自然感染抗体,解决免疫畜群中疫苗抗体干扰布病检测和畜群净化的难题。不仅可带来,社会经济效益,而且可为净化畜群中的布鲁氏菌病做出贡献。
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公开(公告)号:CN105646680A
公开(公告)日:2016-06-08
申请号:CN201610084617.5
申请日:2016-02-06
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C07K14/23 , C12N15/31 , C12N15/11 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/23 , G01N33/56911 , G01N33/68 , G01N2333/23
Abstract: 本发明提供一种家畜S2疫苗免疫与羊/牛种布鲁氏菌感染的IELISA检测试剂,所述IELISA检测试剂的有效成分为布鲁氏菌S2疫苗株基因GL_0002181编码的抗原蛋白以及布鲁氏菌BP26蛋白,或者它们的N端或C端融合有His标签的重组蛋白。本发明提供的IELISA检测试剂能鉴别布鲁氏菌主要流行株—羊种/牛种布鲁氏菌及市场上普遍使用的主流疫苗—S2疫苗,能够在短时间内鉴别家畜血清中疫苗免疫与羊种/牛种布鲁氏菌自然感染抗体,解决免疫畜群中疫苗抗体干扰布病检测和畜群净化的难题。不仅可带来社会经济效益,而且可为净化畜群中的布鲁氏菌病做出贡献。
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