公开(公告)号：CN106636149A

公开(公告)日：2017-05-10

申请号：CN201710001526.5

申请日：2017-01-03

Applicant: 内蒙古农业大学

Inventor： 刘春霞 ,  王文龙 ,  冯陈晨 ,  呼和巴特尔

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/12 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了斯氏副柔线虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Pj_STPK基因克隆、原核表达方法及应用，通过斯氏副柔线虫转录组测序，预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析，找出斯氏副柔线虫特有基因，用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_STPK，克隆测序后，构建到原核表达载体pET30a中，转化至E.coli BL21，进行诱导表达，用Western‑bloting法验证重组蛋白rSTPK的免疫原性。斯氏副柔线虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Pj_STPK基因重组蛋白经纯化后，建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。

公开(公告)号：CN106636122B

公开(公告)日：2019-11-26

申请号：CN201710002348.8

申请日：2017-01-03

Applicant: 内蒙古农业大学

Inventor： 刘春霞 ,  冯陈晨 ,  王文龙 ,  呼和巴特尔

IPC: C12N15/15 ,  C07K14/81 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明公开了斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因克隆、重组表达方法及应用，通过斯氏副柔线虫转录组测序，预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析，找出斯氏副柔线虫特有基因，用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPI，克隆测序后，构建到原核表达载体pET30a中，转化至E.coli BL21，进行诱导表达，用Western‑bloting法验证重组蛋白rCPI的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因重组蛋白经纯化后，建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。

公开(公告)号：CN107312786B

公开(公告)日：2019-10-29

申请号：CN201710575781.0

申请日：2017-07-14

Applicant: 内蒙古农业大学

Inventor： 王文龙 ,  王金玲 ,  冯陈晨 ,  刘春霞 ,  呼和巴特尔

IPC: C12N15/57 ,  C12N9/64 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明公开了一种重组斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶的制备方法及应用，通过斯氏副柔线虫转录组测序，预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析，找出斯氏副柔线虫特有基因，用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPR，克隆测序后，构建到原核表达载体pET30a中，转化至E.coli BL21，进行诱导表达，用Western‑bloting法验证重组蛋白rCPR的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶Pj_CPR基因重组蛋白经纯化后，建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。

公开(公告)号：CN106636149B

公开(公告)日：2019-10-25

申请号：CN201710001526.5

申请日：2017-01-03

Applicant: 内蒙古农业大学

Inventor： 刘春霞 ,  王文龙 ,  冯陈晨 ,  呼和巴特尔

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/12 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了斯氏副柔线虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Pj_STPK基因克隆、原核表达方法及应用，通过斯氏副柔线虫转录组测序，预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析，找出斯氏副柔线虫特有基因，用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_STPK，克隆测序后，构建到原核表达载体pET30a中，转化至E.coli BL21，进行诱导表达，用Western‑bloting法验证重组蛋白rSTPK的免疫原性。斯氏副柔线虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Pj_STPK基因重组蛋白经纯化后，建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。

公开(公告)号：CN107312786A

公开(公告)日：2017-11-03

申请号：CN201710575781.0

申请日：2017-07-14

Applicant: 内蒙古农业大学

Inventor： 王文龙 ,  王金玲 ,  冯陈晨 ,  刘春霞 ,  呼和巴特尔

IPC: C12N15/57 ,  C12N9/64 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明公开了一种重组斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶的制备方法及应用，通过斯氏副柔线虫转录组测序，预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析，找出斯氏副柔线虫特有基因，用RT-PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPR，克隆测序后，构建到原核表达载体pET30a中，转化至E.coli BL21，进行诱导表达，用Western-bloting法验证重组蛋白rCPR的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶Pj_CPR基因重组蛋白经纯化后，建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。

公开(公告)号：CN106636122A

公开(公告)日：2017-05-10

申请号：CN201710002348.8

申请日：2017-01-03

Applicant: 内蒙古农业大学

Inventor： 刘春霞 ,  冯陈晨 ,  王文龙 ,  呼和巴特尔

IPC: C12N15/15 ,  C07K14/81 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因克隆、重组表达方法及应用，通过斯氏副柔线虫转录组测序，预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析，找出斯氏副柔线虫特有基因，用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPI，克隆测序后，构建到原核表达载体pET30a中，转化至E.coli BL21，进行诱导表达，用Western‑bloting法验证重组蛋白rCPI的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因重组蛋白经纯化后，建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。