一种猫泛白细胞减少症病毒假病毒的构建方法

    公开(公告)号:CN116926021A

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202310837922.7

    申请日:2023-07-10

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明公开了一种猫泛白细胞减少症病毒假病毒的构建方法,先提取猫泛白细胞减少症病毒ATCCVR‑648株病毒DNA,进行PCR扩增获得VP2基因,将其连接到pDONR221载体,得到中间载体pDown‑{FPV‑VP2},将其与携带启动子的pUp‑EF1A载体、骨架载体pLV.Des2d.C/EGFP:T2A:Puro重组,得到重组表达质粒,将其进行慢病毒包装,即得。与现有技术相比,本发明构建的猫泛白细胞减少症病毒假病毒无复制活性、生物安全性高、稳定性好,在猫泛白细胞减少症病毒核酸检测时可用作阳性对照标准品和内控标准品,可应用于猫泛白细胞减少症病毒的研究、抗病毒制剂的筛选和疫苗的研发。

    一种猫杯状病毒假病毒的制备方法

    公开(公告)号:CN116790666A

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202310749595.X

    申请日:2023-06-25

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明公开了一种猫杯状病毒假病毒的制备方法,先通过PCR扩增获得gp2基因,然后采用BP反应构建得到含有gp2基因序列的入门克隆载体pDown‑{FCV‑gp2},接着采用LR反应将携带启动子的pUp‑EF1A载体、pDown‑{FCV‑gp2}以及pLV.Des2d.C/EGFP:T2A:Puro重组,得到重组表达载体pLV[Exp]‑EGFP:T2A:Puro‑EF1A>{FCV‑gp2},将其和慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,即得。该方法制备得到的猫杯状病毒假病毒无复制活性,生物安全性高,能够为猫杯状病毒的研究、抗病毒制剂和疫苗评价提供强有力的筛选工具,具备广泛的应用价值。

    一种合成三聚氰胺完全抗原的方法及检测三聚氰胺的ELISA试剂盒

    公开(公告)号:CN101407580B

    公开(公告)日:2011-06-08

    申请号:CN200810051488.5

    申请日:2008-11-28

    申请人: 吉林大学

    IPC分类号: C08G69/48 G01N33/577

    摘要: 本发明建立了一种合成三聚氰胺完全抗原的方法和应用单克隆抗体检测三聚氰胺的直接竞争ELISA试剂盒。试剂盒的组成包括:三聚氰胺酶标物、三聚氰胺标准液、包被三聚氰胺单克隆抗体的酶标板、底物显色液、洗涤液、终止液、酶标物稀释液及样品稀释液等。本发明建立了人工合成三聚氰胺完全抗原的方法,以多聚赖氨酸为载体制备单克隆抗体;应用单克隆抗体制备的ELISA试剂盒,具有简单、快速、处理样品量大、灵敏度较高、特异性强和价格低廉等诸多优点,适和工厂化生产,可对液态牛奶、奶粉、固体样品中三聚氰胺进行快速检测。

    具有免疫保护功能的痤疮丙酸杆菌蛋白及编码基因的应用

    公开(公告)号:CN102337277A

    公开(公告)日:2012-02-01

    申请号:CN201110225085.X

    申请日:2011-08-08

    申请人: 吉林大学

    摘要: 一种具有免疫保护功能的痤疮丙酸杆菌蛋白及编码基因的应用,属于生物技术领域。本发明的目的是提供在胸膜肺炎放线杆菌感染和免疫过程中能够刺激特异性免疫应答,并且能够产生免疫保护功能的异源蛋白的具有免疫保护功能的痤疮丙酸杆菌蛋白及编码基因的应用。本发明具有异源免疫保护功能的痤疮丙酸杆菌蛋白的基因的核苷酸序列是:SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6。本发明的蛋白在胸膜肺炎放线杆菌的感染和免疫过程中能够刺激特异性体液免疫反应,并且能够产生免疫保护作用。可以本发明的蛋白或基因为活性成分制备胸膜肺炎放线杆菌疫苗。本发明为寻找胸膜肺炎放线杆菌具有免疫保护功能的蛋白提供了一种新手段,将在猪传染性胸膜肺炎的防治中发挥重要作用,应用前景广阔。

    联合利用抗菌肽和超高压制备细菌菌影的方法及应用

    公开(公告)号:CN101683524A

    公开(公告)日:2010-03-31

    申请号:CN200910067287.9

    申请日:2009-07-15

    申请人: 吉林大学

    IPC分类号: A61K39/02 A61K47/46 A61P31/04

    摘要: 本发明公开了一种联合利用抗菌肽和超高压制备细菌菌影的方法及应用,将细菌菌株培养至对数生长期(OD 600 为0.4~0.6)时,加入抗菌肽,4℃作用过夜或室温作用2~4h;离心收集菌体并用生理盐水重复洗两次,加入生理盐水重悬,进行200~250MPa超高压处理;离心收集菌体并用生理盐水重复洗两次,即制备成细菌菌影。本发明提供了一种新的细菌菌影制备方法,取得了良好的效果,裂解效率高,可达99.9999999%以上,并且操作简单,可广泛用于细菌的菌影制备;对制备的细菌菌影进行了应用,具有良好的免疫效果,可以作为一种新的候选疫苗使用。

    利用抗菌肽制备细菌菌影的方法及应用

    公开(公告)号:CN101658668A

    公开(公告)日:2010-03-03

    申请号:CN200910067286.4

    申请日:2009-07-15

    申请人: 吉林大学

    CPC分类号: Y02A50/474

    摘要: 本发明公开了一种利用抗菌肽制备细菌菌影的方法及应用,将细菌菌株培养至对数生长期(OD 600 为0.4~0.6)时,加入抗菌肽,4℃作用过夜或室温作用2~4h;作用结束后,离心收集菌体并用生理盐水重复洗两次,即制备成细菌菌影。用抗菌肽替代传统方法来制备细菌菌影,提供了一种新的细菌菌影制备方法,取得了良好的效果,并且操作简单,可广泛用于细菌的菌影制备,制备的细菌菌影具有良好的免疫效果,可以作为一种新的候选疫苗使用。