双水相系统萃取血清中抗体的方法

    公开(公告)号:CN104072610A

    公开(公告)日:2014-10-01

    申请号:CN201410315177.0

    申请日:2014-07-04

    申请人: 吉林大学

    IPC分类号: C07K16/06 C07K1/14

    摘要: 本发明公开一种双水相系统萃取血清中抗体的方法,为一种新的取血清中抗体的方法,克服了传统取血清中抗体的方法得率低、含杂质多、制备繁琐、活性低等特点。采用乙酸钠作为盐水相中的盐使用。既提高了抗体的得率而且为今后乙酸钠在工业生产提供依据。提取设备要求简单,室温下可操作;所提取的抗体纯度较高,活性无影响;得率大大提高;萃取时间大大缩短;可用于扩大生产。扩大生产后得率不改变。

    联合利用抗菌肽和超高压制备细菌菌影的方法及应用

    公开(公告)号:CN101683524B

    公开(公告)日:2012-03-28

    申请号:CN200910067287.9

    申请日:2009-07-15

    申请人: 吉林大学

    IPC分类号: A61K39/02 A61K47/46 A61P31/04

    摘要: 本发明公开了一种联合利用抗菌肽和超高压制备细菌菌影的方法及应用,将细菌菌株培养至对数生长期(OD600为0.4~0.6)时,加入抗菌肽,4℃作用过夜或室温作用2~4h;离心收集菌体并用生理盐水重复洗两次,加入生理盐水重悬,进行200~250MPa超高压处理;离心收集菌体并用生理盐水重复洗两次,即制备成细菌菌影。本发明提供了一种新的细菌菌影制备方法,取得了良好的效果,裂解效率高,可达99.9999999%以上,并且操作简单,可广泛用于细菌的菌影制备;对制备的细菌菌影进行了应用,具有良好的免疫效果,可以作为一种新的候选疫苗使用。

    利用抗菌肽制备细菌菌影的方法及应用

    公开(公告)号:CN101658668B

    公开(公告)日:2012-01-25

    申请号:CN200910067286.4

    申请日:2009-07-15

    申请人: 吉林大学

    CPC分类号: Y02A50/474

    摘要: 本发明公开了一种利用抗菌肽制备细菌菌影的方法及应用,将细菌菌株培养至对数生长期(OD600为0.4~0.6)时,加入抗菌肽,4℃作用过夜或室温作用2~4h;作用结束后,离心收集菌体并用生理盐水重复洗两次,即制备成细菌菌影。用抗菌肽替代传统方法来制备细菌菌影,提供了一种新的细菌菌影制备方法,取得了良好的效果,并且操作简单,可广泛用于细菌的菌影制备,制备的细菌菌影具有良好的免疫效果,可以作为一种新的候选疫苗使用。

    菌影载体PMAL-E-SN的构建及其在大肠杆菌中的应用

    公开(公告)号:CN101457231A

    公开(公告)日:2009-06-17

    申请号:CN200810051489.X

    申请日:2008-11-28

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明公开了一种菌影载体PMAL-E-SN的构建及其在大肠杆菌中的应用,以PhiX174噬菌体RFI质粒为模板进行PCR扩增,得到E基因;以金黄色葡萄球菌标准株ATCC25923基因组DNA为模板进行PCR扩增,得到SN基因;用十五个柔性氨基酸的Linker串连E基因和SN基因,得到E-SN基因;E-SN基因PCR扩增产物与pMD18-T载体连接,筛选阳性质粒pT-E-SN测序;用质粒载体PMAL-p2X和测序正确的重组质粒pT-E-SN构建菌影载体PMAL-E-SN。本发明的菌影载体PMAL-E-SN通过“tac”强启动子和malE翻译起始信号使E基因和SN基因获得高效表达,成功制备了大肠杆菌菌影,裂解效率可达99.99%;本发明引入次要杀伤基因SN,并联合E基因和SN基因连入高效表达载体PMAL-p2X,取得了良好的效果,可广泛应用于大肠杆菌菌影的制备。

    一种合成三聚氰胺完全抗原的方法及检测三聚氰胺的ELISA试剂盒

    公开(公告)号:CN101407580A

    公开(公告)日:2009-04-15

    申请号:CN200810051488.5

    申请日:2008-11-28

    申请人: 吉林大学

    IPC分类号: C08G69/48 G01N33/577

    摘要: 本发明建立了一种合成三聚氰胺完全抗原的方法和应用单克隆抗体检测三聚氰胺的直接竞争ELISA试剂盒。试剂盒的组成包括:三聚氰胺酶标物、三聚氰胺标准液、包被三聚氰胺单克隆抗体的酶标板、底物显色液、洗涤液、终止液、酶标物稀释液及样品稀释液等。本发明建立了人工合成三聚氰胺完全抗原的方法,以多聚赖氨酸为载体制备单克隆抗体;应用单克隆抗体制备的ELISA试剂盒,具有简单、快速、处理样品量大、灵敏度较高、特异性强和价格低廉等诸多优点,适和工厂化生产,可对液态牛奶、奶粉、固体样品中三聚氰胺进行快速检测。