公开(公告)号：CN112626050B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN202011481714.0

申请日：2020-12-14

Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 ,  合肥丰乐种业股份有限公司

Inventor： 李娟 ,  许蓉芳 ,  秦瑞英 ,  刘小双 ,  周桂林 ,  范家萌 ,  单调风 ,  魏鹏程

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  A01H4/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。

公开(公告)号：CN105210859A

公开(公告)日：2016-01-06

申请号：CN201510761194.1

申请日：2015-11-09

Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司

Inventor： 周桂林 ,  汪华春 ,  何立斌 ,  吴晓亮 ,  温耀伟 ,  周红英 ,  潘华 ,  徐丽媛 ,  刘奇燕 ,  王笑见 ,  冯睿彤 ,  徐剑 ,  徐晓莉 ,  程国旺 ,  董伟 ,  王中花 ,  夏泽静

IPC: A01H1/02 ,  A01H1/04

Abstract: 本发明公开了一种香型抗稻瘟病水稻新品种的高效选育方法，其特征在于：以广适、优质的香型水稻恢复系丰香恢一号为受体亲本，以携带抗稻瘟病基因的抗稻瘟病水稻材料为供体亲本，结合常规育种技术，综合利用高通量分子标记辅助选择技术、水稻花药离体培养技术、香味人工鼻子嗅闻和抗性田间鉴定手段，育成香味稳定、稻瘟病抗性好且农艺性状优良的抗性改良香型水稻丰香恢一号恢复系，再与不育系进行组合测配，高效选育出香型抗稻瘟病水稻新品种。本发明的方法高效、快捷、成本低，同时有效结合了传统育种技术和现代分子生物技术，选育出的品种推广应用价值高，适用于企业商业化育种需求。

公开(公告)号：CN103409409A

公开(公告)日：2013-11-27

申请号：CN201310304147.5

申请日：2013-07-19

Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司

Inventor： 周贤达 ,  王兆贤 ,  陈会中 ,  吴义兵 ,  周桂林 ,  林茂 ,  朱先飞 ,  徐丽媛 ,  王丽梅 ,  程国旺

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种快速提取瓜类基因组DNA的方法，特别是一种利用NaOH和异丙醇快速、简便的大规模提取瓜类植物组织基因组DNA的方法。其利用96孔PCR扩增板在传统碱煮法提取后，使用异丙醇对提取产物进行沉淀提纯，大幅度提高了瓜类基因组DNA的提取质量、提取速度及提取规模，满足了后续进行的瓜类作物育种改良、品种纯度分子标记鉴定等相关项目对瓜类基因组DNA的需要；同时，本方法工艺步骤简单、易于操作且组织需求小，特别适合对瓜类基因组DNA大批量的提取。

公开(公告)号：CN103305501A

公开(公告)日：2013-09-18

申请号：CN201310216310.2

申请日：2013-06-03

Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司

Inventor： 李婧婧 ,  周桂林 ,  彭家成 ,  陈先锋 ,  程国旺 ,  马惠应 ,  黄书伟 ,  张庆虎

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种适用于PCR的棉花DNA快速批量提取的方法，该方法是取棉花幼苗的下胚轴顶端装入PCR板的孔中，加入NaOH溶液，沸水浴对样品进行细胞破碎，取出后再加Tris-Hcl溶液，然后沸水浴，取出冷却后，用ddH2O稀释10～30倍，即得棉花DNA PCR反应的模板。通过SSR分子标记的检测，其带型图与使用传统的CTAB法提取出的DNA的带型图高度一致。本方法简单快捷，避免了CTAB法和SDS法的繁琐程序，省时省力。适用于批量棉花杂交种的DNA指纹纯度检测，以及棉花育种改良等需大批量提取DNA进行检测的项目。