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公开(公告)号:CN107058393B
公开(公告)日:2021-01-08
申请号:CN201710470525.5
申请日:2017-06-20
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明公开了一种基于自然转化的拟态弧菌高效遗传重组方法及应用,该方法以拟态弧菌SCCF01株基因组为模板,使用目的基因上臂和目的基因下臂引物对扩增目的基因上臂序列和下臂序列;并扩增卡那霉素抗性基因片段;将扩增得到的卡那霉素抗性基因片段、目的基因上臂序列和下臂序列片段进行融合,得到含有卡那霉素抗性基因片段、目的基因上臂序列和下臂序列片段的融合PCR产物;将获得融合PCR产物与受体拟态弧菌SCCF01株进行自然转化,经过对抗性标记基因的筛选,获得拟态弧菌SCCF01株的缺失株。本发明操作过程相较于自杀质粒介导的基因重组技术和λ‑RED重组技术,无需电转质粒或打靶DNA,操作简单。
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公开(公告)号:CN110386971A
公开(公告)日:2019-10-29
申请号:CN201810344147.0
申请日:2018-04-17
申请人: 四川农业大学
IPC分类号: C07K14/46 , C07K1/22 , C12N15/12 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61P31/04 , C12R1/84
摘要: 本发明提供了一种斑点叉尾鮰β-防御素重组蛋白,氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还提供了所述重组蛋白的制备方法和用途。本发明通过酵母表达系统,成功构建斑点叉尾鮰β-防御素重组蛋白表达载体并将其大量表达、纯化,获得的β-防御素重组蛋白表达量、纯度均高,而且对革兰氏阴性菌具有广泛的抑菌活性,应用前景良好。
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公开(公告)号:CN105148267B
公开(公告)日:2018-08-24
申请号:CN201510425425.1
申请日:2015-07-20
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明公开了SEQ ID NO:3所示蛋白质或SEQ ID NO:4所示蛋白质在制备鱼用疫苗的佐剂中的用途。本发明还公开了一种复合佐剂,它含有SEQ ID NO:3所示蛋白质和SEQ ID NO:4所示蛋白质,以及药学上可接受的载体。本发明重组IL‑1β1和IL‑1β2可以有效提高鱼用疫苗的免疫原性,显著提高特异性抗体,可以作为鱼用疫苗的佐剂使用,二者联合使用时的效果明显优于同等剂量下二者单独使用(p
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公开(公告)号:CN108414308A
公开(公告)日:2018-08-17
申请号:CN201810098707.9
申请日:2018-01-31
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明公开了一种鱼类组织病理切片脱钙液,包括以下组分:甲醛4~5v/v%,甲醇50~60v/v%,甲酸10~15v/v%,盐酸15~20v/v%,组织透明剂5~6v/v%,氯化钠1~2wt%,余量为蒸馏水;其中,组织透明剂包括二甲基亚砜、果糖、碳酸氢钠和十二烷基磺酸钠。组织透明剂中二甲基亚砜的体积百分比为50%~55%,果糖的质量百分比为15%~20%,碳酸氢钠的质量百分比为1%~2%,十二烷基磺酸钠的质量百分比为10%~15%,余量为水。采用本发明的脱钙液,可有效解决现有脱钙液脱钙时间慢以及透明性差的技术问题。
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公开(公告)号:CN106188263A
公开(公告)日:2016-12-07
申请号:CN201610554669.4
申请日:2016-07-14
申请人: 四川农业大学
CPC分类号: C07K14/461 , C12Q1/6888 , C12Q2600/158 , G01N33/6893
摘要: 本发明提供了一种如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还提供了该序列的用途及一种检测齐口裂腹鱼细菌感染的试剂盒。本发明提供的核苷酸序列可作为检测齐口裂腹鱼细菌感染的辅助生物标记物,通过检测齐口裂腹鱼群血液、肝胰脏、中肾和/或脾脏组织的Hsp60mRNA表达水平,可以筛查齐口裂腹鱼被细菌感染的风险,临床应用前景良好。
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公开(公告)号:CN102988376B
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201210407309.3
申请日:2012-10-23
申请人: 四川农业大学
IPC分类号: A61K31/7048 , A61K31/35 , A61K9/107 , A61P31/00 , A61P33/00
摘要: 本发明公开了一种渔药桉叶油阿维菌素亚微乳剂,以重量百分比计,桉叶油含量为11.4%,阿维菌素含量1.1%,水含量36.6%;余量为表面活性剂,表面活性剂采用吐温-80和甲醇按照3.18:1的比例混合。通过常用的比例法配合转相法将桉叶油和阿维菌素制备成一种亚微乳液,利用桉叶油的透皮特性和杀菌特性,联合阿维菌素的杀虫效果,开发一种高效、安全的水产杀虫新药。
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公开(公告)号:CN104046701A
公开(公告)日:2014-09-17
申请号:CN201410267882.8
申请日:2014-06-12
申请人: 四川农业大学
CPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
摘要: 本发明公开了一种兔病毒性出血症病毒RT-LAMP检测方法,根据RT-PCR法扩增测序的基因序列,运用在线LAMP引物设计软件Primer Explorer V4 software针对目的序列的6个不同位点,设计了4条特异性引物和1条环引物,通过反应条件优化、敏感性试验和特异性试验,初步建立了RHDV的RT-LAMP检测法,并进行临床检样初步应用。试验结果显示:该法可以扩增出183bp以上的一个梯状条带产物,可以检测到25copies的目的基因,对兔大肠杆菌、兔巴氏杆菌和实验室构建的欧洲野兔综合症病毒蛋白VP60基因重组质粒pGM-T-EBHSV的扩增均为阴性,有着比RT-PCR法更高的敏感性,在临床检测中该法阳性检出率与RT-PCR法检测结果相符合。
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公开(公告)号:CN106620683A
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201510716805.0
申请日:2015-10-29
申请人: 四川农业大学
CPC分类号: Y02A50/482
摘要: 本发明公开了一种渔用二联口服微球疫苗,它包括鮰爱德华氏菌微球疫苗以及鲁氏耶尔森氏菌微球疫苗。本发明二联微球疫苗可以有效保护斑点叉尾鮰免受鮰爱德华氏菌和鲁氏耶尔森氏菌的感染,预防鮰爱德华氏菌病和鲁氏耶尔森氏菌病,使用方便,应用前景良好。
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公开(公告)号:CN106188262A
公开(公告)日:2016-12-07
申请号:CN201610554418.6
申请日:2016-07-14
申请人: 四川农业大学
CPC分类号: C07K14/461 , C12Q1/6888 , C12Q2600/158 , G01N33/6893
摘要: 本发明提供了一种如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还提供了该序列的用途及一种检测齐口裂腹鱼细菌感染的试剂盒。本发明提供的核苷酸序列可作为齐口裂腹鱼细菌感染的辅助生物标记物,通过检测齐口裂腹鱼群血液、肝胰脏、中肾和/或脾脏组织的Hsp90 mRNA表达水平,可以筛查齐口裂腹鱼被细菌感染的风险,临床应用前景良好。
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公开(公告)号:CN104046701B
公开(公告)日:2016-10-05
申请号:CN201410267882.8
申请日:2014-06-12
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明公开了一种不用于诊断目的的兔病毒性出血症病毒RT‑LAMP检测方法,根据RT‑PCR法扩增测序的基因序列,运用在线LAMP引物设计软件Primer Explorer V4software针对目的序列的6个不同位点,设计了4条特异性引物和1条环引物,通过反应条件优化、敏感性试验和特异性试验,初步建立了RHDV的RT‑LAMP检测法,并进行临床检样初步应用。试验结果显示:该法可以扩增出183bp以上的一个梯状条带产物,可以检测到25copies的目的基因,对兔大肠杆菌、兔巴氏杆菌和实验室构建的欧洲野兔综合症病毒蛋白VP60基因重组质粒pGM‑T‑EBHSV的扩增均为阴性,有着比RT‑PCR法更高的敏感性,在临床检测中该法阳性检出率与RT‑PCR法检测结果相符合。
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