一种用于检测鱼类鳃结节病病原菌的双重PCR引物、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN116334263A

    公开(公告)日:2023-06-27

    申请号:CN202310440654.5

    申请日:2023-04-21

    摘要: 本发明公开了一种用于检测鱼类鳃结节病病原菌的双重PCR引物、试剂盒及检测方法,引物包括引物对1和引物对2,其序列如SEQ ID NO.1‑4所示。检测方法包括:提取待测样本基因组DNA,以基因组DNA为模板,采用上述双重PCR引物进行PCR扩增,并对扩增产物进行电泳检测,若在263bp处及593bp处出现电泳条带,则说明待测样本感染鳃结节病病原菌。本发明提供的利用双重PCR检测方法对诺卡氏菌病感染的鱼体样本鳃组织DNA进行检测,能够快速准确地发现鰤诺卡氏菌病原,灵敏度高,特异性和重复性好。

    一种具有抗水生动物嗜水气单胞菌感染的乳球菌及其应用

    公开(公告)号:CN115369059B

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202211008762.7

    申请日:2022-08-22

    摘要: 本发明提供了一种具有抗水生动物嗜水气单胞菌感染的乳球菌:蜜袋鼯乳球菌Lactococcus petauri JLlg08PX,保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC M 2022927。该菌株耐酸、耐胆盐,具备在恶劣环境的消化道中生存的能力。本发明蜜袋鼯乳球菌JLlg08PX不具有致病性,其共感染可缓解由嗜水气单胞菌引起的鲟肝脏和瓣肠的组织病理损伤,降低嗜水气单胞菌感染后杂交鲟肝脏中气单胞菌的载量,并降低嗜水气单胞菌感染感染引起的发病死亡率。其无细胞上清液对鱼源致病菌嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌和鲁氏耶尔森氏菌的生长具有抑制作用;在制备防治由嗜水气单胞菌引起的鱼类败血症的微生态制剂中有潜在应用价值。

    一种鱼类组织病理切片脱钙液

    公开(公告)号:CN108414308B

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN201810098707.9

    申请日:2018-01-31

    IPC分类号: G01N1/28 G01N1/30

    摘要: 本发明公开了一种鱼类组织病理切片脱钙液,包括以下组分:甲醛4~5v/v%,甲醇50~60v/v%,甲酸10~15v/v%,盐酸15~20v/v%,组织透明剂5~6v/v%,氯化钠1~2wt%,余量为蒸馏水;其中,组织透明剂包括二甲基亚砜、果糖、碳酸氢钠和十二烷基磺酸钠。组织透明剂中二甲基亚砜的体积百分比为50%~55%,果糖的质量百分比为15%~20%,碳酸氢钠的质量百分比为1%~2%,十二烷基磺酸钠的质量百分比为10%~15%,余量为水。采用本发明的脱钙液,可有效解决现有脱钙液脱钙时间慢以及透明性差的技术问题。

    一种水体中蛙病毒的检测方法

    公开(公告)号:CN108728577A

    公开(公告)日:2018-11-02

    申请号:CN201810522568.8

    申请日:2018-05-28

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/686 C12R1/93

    摘要: 本发明涉及一种水体中蛙病毒的检测方法,属于病毒检测领域。本发明结合水体中病毒富集的方法和PCR技术构建出对养殖水体中蛙病毒的检测方法。对NaCl-AlCl3·6H2O沉淀法富集水体病毒的方法进行改进,缩短富集时间。特异性PCR引物的改进,对大鲵蛙病毒、虎纹蛙病毒、普通产婆蟾病毒和蛙病毒3型病毒等蛙病毒属的主要衣壳蛋白进行多序列比对,对比对序列的保守区域设计引物,从而规避病毒在进化过程中因序列变异而导致检测的假阴性,有效的填补了目前市面上对于水体中蛙病毒检测方法的空白,具有极大的社会效益和经济效益。

    辣木叶中黄酮成分的提取方法

    公开(公告)号:CN104173393B

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201410366619.4

    申请日:2014-07-29

    IPC分类号: A61K36/185 A61K127/00

    摘要: 本发明提供了辣木叶中黄酮成分的提取方法,它包括如下操作步骤:取辣木叶粉以50~60%v/v乙醇为溶剂,料液比为1:50~60g/ml,进行微波萃取,收集提取液,即可;其中,微波功率为300~400W,提取时间为6~10min。本发明还提供了该提取方法制备的提取物。本发明研究发现,以相同的辣木叶粉为样品,微波萃取的方法所得辣木叶总黄酮含量高于回流提取方法,同时大大缩短了提取时间,节约了提取时所耗的水和电,降低提取成本。

    一种基于自然转化的拟态弧菌高效遗传重组方法及应用

    公开(公告)号:CN107058393A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710470525.5

    申请日:2017-06-20

    IPC分类号: C12N15/90 C12N1/21 C12R1/63

    摘要: 本发明公开了一种基于自然转化的拟态弧菌高效遗传重组方法及应用,该方法以拟态弧菌SCCF01株基因组为模板,使用目的基因上臂和目的基因下臂引物对扩增目的基因上臂序列和下臂序列;并扩增卡那霉素抗性基因片段;将扩增得到的卡那霉素抗性基因片段、目的基因上臂序列和下臂序列片段进行融合,得到含有卡那霉素抗性基因片段、目的基因上臂序列和下臂序列片段的融合PCR产物;将获得融合PCR产物与受体拟态弧菌SCCF01株进行自然转化,经过对抗性标记基因的筛选,获得拟态弧菌SCCF01株的缺失株。本发明操作过程相较于自杀质粒介导的基因重组技术和λ‑RED重组技术,无需电转质粒或打靶DNA,操作简单。

    辣木叶黄酮提取物的降糖、胰岛保护活性试验方法及其用途

    公开(公告)号:CN106755266A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611193927.7

    申请日:2016-12-21

    摘要: 本发明公开了辣木叶黄酮提取物的降糖、胰岛保护活性试验方法及其用途,它包含以下步骤:S1、黄酮提取物的制备;S2、葡萄糖摄取试验:根据葡萄糖摄取活性系数K;S3、糖脂代谢活性试验:计算大鼠血脂指标含量,大鼠血清SOD与MDA含量的测定以及胰岛素指数;S4、胰岛保护活性试验:计算胰岛细胞数量变化率M及胰岛β细胞增长率N。本发明计算出葡萄糖摄取活性系数K,测定出大鼠的血糖变化率,大鼠血脂指标含量,大鼠血清SOD与MDA含量的测定以及胰岛素指数,以及胰岛细胞数量变化率M及胰岛β细胞增长率N,综合判断出辣木叶黄酮提取物的降糖、胰岛保护活性指数,给辣木叶的利用与开发提供了一个定量的标准。

    一种具有抗水生动物嗜水气单胞菌感染的乳球菌及其应用

    公开(公告)号:CN115369059A

    公开(公告)日:2022-11-22

    申请号:CN202211008762.7

    申请日:2022-08-22

    摘要: 本发明提供了一种具有抗水生动物嗜水气单胞菌感染的乳球菌:蜜袋鼯乳球菌Lactococcus petauri JLlg08PX,保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC M 2022927。该菌株耐酸、耐胆盐,具备在恶劣环境的消化道中生存的能力。本发明蜜袋鼯乳球菌JLlg08PX不具有致病性,其共感染可缓解由嗜水气单胞菌引起的鲟肝脏和瓣肠的组织病理损伤,降低嗜水气单胞菌感染后杂交鲟肝脏中气单胞菌的载量,并降低嗜水气单胞菌感染感染引起的发病死亡率。其无细胞上清液对鱼源致病菌嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌和鲁氏耶尔森氏菌的生长具有抑制作用;在制备防治由嗜水气单胞菌引起的鱼类败血症的微生态制剂中有潜在应用价值。