公开(公告)号：CN116474085A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310490815.1

申请日：2023-05-04

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  路浩 ,  张建军 ,  王伟康 ,  张伟 ,  谢泉 ,  连明君 ,  万志敏 ,  李拓凡 ,  周玉双

IPC分类号： A61K39/235 ,  C12N15/861 ,  C12N15/34 ,  C12N7/01 ,  A61K39/295 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

摘要： 本发明涉及一种重组禽腺病毒二价灭活疫苗，疫苗是灭活的表达血清8b型禽腺病毒纤突蛋白的重组血清4型禽腺病毒FA4‑F。表达血清8b型禽腺病毒纤突蛋白的重组血清4型禽腺病毒FA4‑F的构建方法，在表达EGFP的重组血清4禽腺病毒的F1和F2基因之间插入血清8b型禽腺病毒纤突基因。一种重组禽腺病毒二价灭活疫苗，灭活是将细胞培养的FA4‑F的重组病毒液加入0.1％v/v的甲醛37℃作用24h进行灭活；甲醛灭活病毒液与油佐剂按1:3(v/v)的比例乳化用于制备油佐剂灭活疫苗。通过本发明，针对目前国内鸡群中正流行爆发的由FAdV‑4和FAdV‑8感染引起的HHS和IBH，为防控FAdV‑4和FAdV‑8b的感染提供了候选疫苗株；因此，本发明具有一定的市场应用价值。

公开(公告)号：CN112630427A

公开(公告)日：2021-04-09

申请号：CN202011371468.3

申请日：2020-11-30

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  路浩 ,  尹朝憬 ,  武佳妍 ,  谢菁 ,  张建军 ,  邵红霞 ,  秦爱建

IPC分类号： G01N33/569 ,  C12N15/50 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C07K14/165

摘要： 本发明公开了一种基于S1蛋白的检测流行QX型鸡传染性支气管病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒，该试剂盒包括表达S1蛋白的LMH细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性；该试剂盒不仅能用于QX型鸡传染性支气管病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群QX型鸡传染性支气管病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。

公开(公告)号：CN111534547A

公开(公告)日：2020-08-14

申请号：CN202010426111.4

申请日：2020-05-19

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  隆玉兰 ,  秦爱建 ,  张伟 ,  王伟康 ,  谢泉 ,  张建军 ,  李拓凡 ,  万志敏 ,  邵红霞

IPC分类号： C12N15/866 ,  C12N15/70

摘要： 本发明涉及一种表达血清4型禽腺病毒纤突蛋白F2的重组杆状病毒的构建方法，包括以下步骤：（1）构建FAdV-4-F2基因重组杆状病毒表达载体；（2）表达重组FAdV-4蛋白的杆状病毒包装和传代；（3）将携带有FAdV-4-F2基因的杆状病毒基因组转染进sf9细胞，27℃培养箱中培养5-7天，观察细胞病变情况；当细胞病变达到70%时收集细胞裂解液，离心去沉淀，作为种毒保存；进行病毒的传代，传至第3代时，作为种毒扩大培养。本发明利用杆状病毒表达系统构建了含F2基因的重组杆状病毒穿梭载体，将其转染Sf9细胞后获得重组杆状病毒rBA-F2，通过间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot鉴定重组蛋白F2的表达。

公开(公告)号：CN111518777A

公开(公告)日：2020-08-11

申请号：CN202010426012.6

申请日：2020-05-19

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  王伟康 ,  秦爱建 ,  张伟 ,  隆玉兰 ,  谢泉 ,  张建军 ,  李拓凡 ,  万志敏 ,  邵红霞

IPC分类号： C12N7/01 ,  C12N15/34 ,  C12N15/866 ,  C12R1/93

摘要： 本发明涉及一种表达血清4型禽腺病毒纤突蛋白F1的重组杆状病毒的构建方法，包括以下步骤：（1）构建FAdV‑4‑F1基因重组杆状病毒表达载体；（2）表达重组FAdV‑4蛋白的杆状病毒包装和传代；（3）将携带有FAdV‑4‑F1基因的杆状病毒基因组转染进sf9细胞，27℃培养箱中培养5‑7天，观察细胞病变情况；当细胞病变达到70%时收集细胞裂解液，离心去沉淀，作为种毒保存；进行病毒的传代，传至第3代时，作为种毒扩大培养。本发明所述的血清4型禽腺病毒纤突蛋白F1利用该杆状病毒载体表达，且表达水平高，含有His标签，可以方便后期的纯化步骤，可以制备成禽腺病毒4型亚单位疫苗，也可以作为建立FAdV‑4酶联免疫吸附试剂制备研发中的包被用抗原。

公开(公告)号：CN108384865A

公开(公告)日：2018-08-10

申请号：CN201810123080.8

申请日：2018-02-07

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  周明旭 ,  夏芃芃 ,  羊扬 ,  丁雪燕 ,  孟霞 ,  王建业 ,  朱礼倩 ,  石宝兰 ,  张建军 ,  张伟

IPC分类号： C12Q1/689 ,  C12Q1/10 ,  C12N15/11 ,  C12R1/19

CPC分类号： C12Q1/689 ,  C12Q2600/158

摘要： 本发明涉及Alpha菌毛基因在仔猪腹泻致病性大肠杆菌监测、鉴别中的应用。本发明还提供一对用于检测仔猪腹泻致病性大肠杆菌的特异性引物和试剂盒。鉴定引物用于猪场临床环境中致仔猪腹泻大肠杆菌的快速检测；对从饲料、饮水(或污水)、扬尘和粪便中分离细菌为模板，利用这对引物进行PCR扩增，如果是致仔猪腹泻致病性大肠杆菌，则PCR扩增为预期阳性；如果是其他非致病大肠杆菌，如沙门菌、魏氏梭菌等其他菌属，则结果为阴性。本发明基于不同菌属或者不同表型大肠杆菌中Alpha菌毛基因的分布差异，以及Alpha菌毛cblB基因序列保守性的特点，为临床快速区分和鉴定致仔猪腹泻大肠杆菌提供新的方法和选择。

公开(公告)号：CN106442988B

公开(公告)日：2018-03-20

申请号：CN201610877089.9

申请日：2016-10-08

申请人： 扬州大学 ,  国药集团扬州威克生物工程有限公司

发明人： 朱国强 ,  夏芃芃 ,  孟霞 ,  羊扬 ,  石宝兰 ,  张建军

IPC分类号： C07K14/47 ,  G01N33/573 ,  G01N33/569 ,  A61K45/00 ,  A61P31/04

摘要： 本发明属于分子生物学技术和兽医学技术领域。具体涉及产肠毒素大肠杆菌ETEC F4菌毛直接受体蛋白猪氨肽酶N功能结合域，本发明提供能够识别ETEC F4三种血清型主要功能性亚基FaeG的宿主受体蛋白结合结构域的氨基酸序列。本发明确定了APN与FaeG蛋白互作的功能结合域，为进一步探讨APN的作用机理和F4三种血清型的不同致病机制奠定了基础。

公开(公告)号：CN108896768B

公开(公告)日：2020-07-21

申请号：CN201810724831.1

申请日：2018-07-04

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  申秋平 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  路浩 ,  王伟康 ,  张建军

IPC分类号： C07K14/075 ,  G01N33/68

摘要： 本发明提供了一种抗原多肽，属于生物技术检测技术领域。本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白52K抗体，进而能够检测FAdV‑4病毒感染，而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。

公开(公告)号：CN106318913A

公开(公告)日：2017-01-11

申请号：CN201610821360.7

申请日：2016-09-13

申请人： 国药集团扬州威克生物工程有限公司 ,  扬州大学 ,  福建圣维生物科技有限公司

发明人： 张伟 ,  殷键 ,  叶建强 ,  李文迹 ,  张建军 ,  赵益超 ,  李婷婷 ,  石宝兰

IPC分类号： C12N7/00 ,  C12N7/02

CPC分类号： C12N7/00 ,  C12N2710/10051

摘要： 本发明公开了一种血清4型禽腺病毒悬浮培养扩增方法。具体过程为：将经PCR鉴定为血清4型禽腺病毒的病毒接种于鸡肝细胞，通过细胞悬浮培养技术高效扩增血清4型禽腺病毒。本发明本发明利用鸡肝细胞，建立的血清4型禽腺病毒悬浮培养扩增方法，能实现对血清4型禽腺病毒高效扩增，与鸡胚接种比较，病毒滴度比鸡胚接种培养病毒高100倍以上(传统鸡胚毒效价小于106.0TCID50/ml)。这一血清4型禽腺病毒悬浮培养扩增方法为研制血清4型禽腺病毒疫苗提供了技术，具有很好的应用价值。