公开(公告)号：CN103777004B

公开(公告)日：2015-12-02

申请号：CN201410051704.1

申请日：2014-02-14

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  马伟 ,  徐丽广 ,  宋珊珊 ,  刘丽强

IPC: G01N33/558 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，以及该免疫胶体金试纸条的制备方法，属于免疫检测技术领域。该试纸条由样品垫、涂覆金标标记抗SEE抗体1E5（CGMCC No.7214）的金标垫，在检测线、质控线分别包被有抗SEE抗体2E3（CGMCC No.7215）及羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜构成，依次按样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘附在PVC底板上。该试纸条操作简便、快速、准确，测试全过程只需5分钟，不受环境条件的干扰，特异性好，检测灵敏度高，最低检测限为0.25ng/mL。本发明适用于海关、企业、医院、检验检疫单位等，可实现食品或临床样本中金黄色葡萄球菌肠毒素E的快速检测。

公开(公告)号：CN103760311B

公开(公告)日：2015-03-18

申请号：CN201410019576.2

申请日：2014-01-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  马伟 ,  徐丽广 ,  宋珊珊 ,  刘丽强

IPC: G01N33/02 ,  G01N33/577

Abstract: 一种检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素E的双抗体夹心法，属于免疫分析技术领域。本发明应用购于北京军事医学科学院的重组金黄色葡萄球菌肠毒素E（SEE）免疫8周龄BALB/c小鼠，经过正常的免疫、细胞融合、筛选后得到12株SEE单克隆抗体。12株抗体分别标记辣根过氧化物酶并进行两两配对。最后选定以1E5（CGMCC No.7214）、2E3（CGMCC No.7215）分别为包被抗体和酶标抗体，以SEE为标准品建立了SEE的双抗体夹心法。LOD为0.04ng/mL，线性范围0.1-10ng/mL。本发明采用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单克隆抗体，建立的双抗体夹心法灵敏度高，成本低，与金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、D无交叉反应，为食品中SEE的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN103760354A

公开(公告)日：2014-04-30

申请号：CN201410051501.2

申请日：2014-02-14

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐丽广 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  匡华 ,  马伟 ,  宋珊珊 ,  刘丽强

IPC: G01N33/577

CPC classification number: G01N33/56938 ,  G01N33/54386 ,  G01N33/558 ,  G01N2333/31

Abstract: 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素D的免疫胶体金快速检测试纸条，以及该免疫胶体金试纸条的制备方法，属于免疫检测技术领域。该试纸条由样品垫、涂覆金标标记抗SED抗体5F2（CGMCCNo.7212）的金标垫，在检测线、质控线分别包被有抗SED抗体10F1（CGMCCNo.7213）和羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜构成，依次按样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘附在PVC底板上。该试纸条操作简便、快速、准确，检测全过程只需5分钟，不受环境条件的干扰，特异性好，检测灵敏度高，最低检测限为0.25ng/mL。本发明适用于海关、企业、医院、检验检疫单位等，可实现食品或临床样本中金黄色葡萄球菌肠毒素D的快速检测。

公开(公告)号：CN103760311A

公开(公告)日：2014-04-30

申请号：CN201410019576.2

申请日：2014-01-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  马伟 ,  徐丽广 ,  宋珊珊 ,  刘丽强

IPC: G01N33/02 ,  G01N33/577

Abstract: 一种检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素E的双抗体夹心法，属于免疫分析技术领域。本发明应用购于北京军事医学科学院的重组金黄色葡萄球菌肠毒素E（SEE）免疫8周龄BALB/c小鼠，经过正常的免疫、细胞融合、筛选后得到12株SEE单克隆抗体。12株抗体分别标记辣根过氧化物酶并进行两两配对。最后选定以1E5（CGMCCNo.7214）、2E3（CGMCCNo.7215）分别为包被抗体和酶标抗体，以SEE为标准品建立了SEE的双抗体夹心法。LOD为0.04ng/mL，线性范围0.1-10ng/mL。本发明采用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单克隆抗体，建立的双抗体夹心法灵敏度高，成本低，与金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、D无交叉反应，为食品中SEE的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN104237519B

公开(公告)日：2015-12-09

申请号：CN201410510809.9

申请日：2014-09-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  徐丽广 ,  马伟 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: G01N33/577

Abstract: 一种检测玉米细菌性枯萎病菌的双抗体夹心酶联免疫法，属于免疫分析领域。本发明用玉米细菌性枯萎病菌NCPPB 449（来自湖南省进出口检验检疫局）免疫BALB/c小鼠，经免疫、融合、筛选得5株玉米细菌性枯萎病菌单抗。5株抗体分别标记HRP并以该菌体进行两两配对。以11C2（单克隆细胞株H号）为包被抗体，10B1（单克隆细胞株I号）为酶标抗体，以NCPPB 449菌体为标准品建立夹心ELISA法。LOD为1.5×104 cfu/mL，线性范围4.57×105~1.11×108cfu/mL。本发明用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单克隆抗体，建立的夹心法灵敏度高，成本低，与丁香假单胞杆菌斑点致病变种等无交叉反应，为玉米种子中玉米细菌性枯萎病菌的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN104316688A

公开(公告)日：2015-01-28

申请号：CN201410546445.X

申请日：2014-10-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  徐丽广 ,  马伟 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/531

CPC classification number: G01N33/56911 ,  G01N33/532 ,  G01N2333/195

Abstract: 一种检测水稻细菌性条斑病菌的双抗体夹心酶联免疫法，属于免疫分析技术领域。本发明用水稻细菌性条斑病菌免疫小鼠，得7株水稻细菌性条斑病菌单抗。分别标记辣根过氧化物酶并以水稻细菌性条斑病菌菌体两两配对。以3D7（单克隆细胞株J号）作为包被抗体，4H6（单克隆细胞株K号）作为酶标抗体，以水稻细菌性条斑病菌菌体为标准品建立水稻细菌性条斑病菌的夹心ELISA法。本发明采用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单抗，建立的夹心法灵敏度高，成本低，与丁香假单胞杆菌斑点致病变种，水稻白叶枯病菌，水稻细菌性谷枯病菌，玉米细菌性枯萎病菌，丁香假单胞菌丁香致病变种无交叉反应，为水稻种子中细菌性条斑病菌的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN104237519A

公开(公告)日：2014-12-24

申请号：CN201410510809.9

申请日：2014-09-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  徐丽广 ,  马伟 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: G01N33/577

CPC classification number: G01N33/56916 ,  G01N33/577

Abstract: 一种检测玉米细菌性枯萎病菌的双抗体夹心酶联免疫法，属于免疫分析领域。本发明用玉米细菌性枯萎病菌NCPPB449（来自湖南省进出口检验检疫局）免疫BALB/c小鼠，经免疫、融合、筛选得5株玉米细菌性枯萎病菌单抗。5株抗体分别标记HRP并以该菌体进行两两配对。以11C2（单克隆细胞株H号）为包被抗体，10B1（单克隆细胞株I号）为酶标抗体，以NCPPB449菌体为标准品建立夹心ELISA法。LOD为1.5×104cfu/mL，线性范围4.57×105~1.11×108cfu/mL。本发明用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单克隆抗体，建立的夹心法灵敏度高，成本低，与丁香假单胞杆菌斑点致病变种等无交叉反应，为玉米种子中玉米细菌性枯萎病菌的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN104031142A

公开(公告)日：2014-09-10

申请号：CN201410254563.3

申请日：2014-06-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 马伟 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  匡华 ,  徐丽广 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

CPC classification number: C07K19/00 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44

Abstract: 一种高特异性的叶酸完全抗原合成方法及其应用，属于生物化工技术领域。本发明是在载体蛋白溶液中加入6-氨基己酸与水溶性碳二亚胺后室温下反应，透析后得到修饰了连接臂的载体蛋白B。叶酸（N-{4-[(2-氨基-1,4-二氢-4-氧代-6-喋啶)甲氨基]苯甲酰基}-L-谷氨酸）溶解于二甲亚砜，加入二环己基碳二亚胺与羟基琥珀酰亚胺，反应生成叶酸衍生物，再与载体蛋白B连接臂上的氨基进行偶联，得到完全抗原。结果表明，用本发明的抗原免疫动物得到的抗血清效价达81000，检测限0.042ng/mL，半抑制浓度0.3ng/mL。产生的抗体特异性高、灵敏度高。本发明的抗原或抗体用于免疫亲和柱的制备及建立酶联免疫吸附分析方法和胶体金试纸快速检测法，用于检测叶酸残留。

公开(公告)号：CN204287193U

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201420664819.3

申请日：2014-11-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  徐丽广 ,  马伟 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: G01N33/577

Abstract: 本实用新型涉及一种玉米细菌性枯萎病菌的免疫胶体金快速检测试纸条，属于免疫检测技术领域。该试纸条由PVC底板、样品垫、涂覆金标标记抗玉米细菌性枯萎病菌抗体（12B4）的金标垫、在检测线包被有抗玉米细菌性枯萎病菌抗体（10B1）和在质控线包被有羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜、及吸水垫构成；依次按样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘附在PVC底板上。该试纸条操作简便、快速、准确，全过程只需5min，不受环境条件的干扰，特异性好，检测灵敏度高，最低检测限为1×105cfu/mL。本实用新型适用于海关、粮仓、企业、检验检疫单位等，可实现粮食或种子样本中玉米细菌性枯萎病菌的快速检测。

公开(公告)号：CN204287191U

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201420718740.4

申请日：2014-11-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐丽广 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  匡华 ,  马伟 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/558

Abstract: 本实用新型涉及一种水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的二合一免疫胶体金快速检测试纸条，属于免疫检测技术领域。该试纸条由PVC底板、样品垫、涂覆金标标记群选性抗水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌抗体（3D2）的金标垫、在检测线包被有群选性抗水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌抗体（4D11）和在质控线包被有羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜、及吸水垫构成。该试纸条操作简便、快速、准确，全过程只需5min，不受环境条件的干扰，特异性好，检测灵敏度高，对水稻白叶枯病菌最低检测限为1×104cfu/mL，对水稻细菌性条斑病菌最低检测限为1×105cfu/mL。本实用新型适用于海关、粮仓、企业、检验检疫单位等，可实现粮食或种子样本中该病菌的快速检测。