公开(公告)号：CN115992198A

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202211420452.6

申请日：2022-11-14

申请人： 青岛科技大学

发明人： 张永勤 ,  董静文 ,  陈相玉 ,  邬雅喃 ,  刘银春 ,  刘建瑞 ,  刘芳

IPC分类号： C12Q1/34

摘要： 本发明属于酶活力测定技术领域。针对现有的右旋糖酐酶活力测定技术存在的灵敏度低、标准曲线截距偏离坐标轴原点的问题，本发明公开一种测定右旋糖酐酶活力的方法及其应用，具体包括以下步骤：a.底物的精制；b.酶活力测定：制作用MBTH法测得的葡萄糖吸光度值与其相应浓度的标准对应关系曲线；用MBTH法检测待测右旋糖酐酶水解右旋糖酐后产生的相当于葡萄糖的吸光度值；推算右旋糖酐酶的活力；c.牙膏以及漱口水中酶活力的测定。本发明的酶活力测定方法灵敏度高，所用葡萄糖标准曲线以及相应的酶浓度曲线的截距均接近于零，样品的稀释倍数不会影响酶活力测定的准确性。

公开(公告)号：CN115820799A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202211417968.5

申请日：2022-11-14

申请人： 青岛科技大学

发明人： 张永勤 ,  刘银春 ,  刘建瑞 ,  刘芳 ,  董静文 ,  陈相玉 ,  邬雅喃 ,  刘仕伟

IPC分类号： C12Q1/34 ,  C12Q1/527

摘要： 本发明属于酶活力测定方法领域，针对现有的果胶酶活力测定技术存在的操作繁琐、灵敏度低以及现有的MBTH法用于测定果胶酶活力时存在显色产物溶液中有大量沉淀以及显色产物本底值过高的问题，本发明提供一种果胶酶活力的测定方法：用底物溶液配制一系列浓度梯度的半乳糖醛酸标准溶液，使用碱性试剂以提供高浓度碱性环境对其进行沉淀，并使用低温条件加速沉淀物质的析出，然后离心取上清液，进行MBTH反应，测定吸光度值，绘制标准对应关系曲线；果胶酶的酶解反应；制备酶解空白；通过测定底物在单位时间内通过果胶酶酶解产生的还原端基浓度的初速度来计算果胶酶的酶活力。本发明方法准确、可靠、重复性好、灵敏度高、显色产物稳定。

公开(公告)号：CN115747299A

公开(公告)日：2023-03-07

申请号：CN202211421354.4

申请日：2022-11-14

申请人： 青岛科技大学

发明人： 张永勤 ,  邬雅喃 ,  陈相玉 ,  许文廷 ,  吕兴霜 ,  王滕斌 ,  张凤国 ,  邢明霞 ,  王鹏博 ,  刘银春 ,  刘建瑞 ,  董静文 ,  刘芳

IPC分类号： C12Q1/34

摘要： 本发明属于酶活力测定技术领域，针对现有的甘露聚糖酶活力测定技术存在的灵敏度低、不符合化学计量性、底物溶解性差、底物溶液粘度高、标准曲线截距偏离原点的问题，本发明提供一种甘露聚糖酶活力的测定方法，以甘露聚糖或羟丙基甘露聚糖为底物配制底物溶液，取用底物溶液为溶剂配制的不同浓度的甘露糖标准溶液，在碱性条件下加入新鲜配制的MBTH试剂，再加入酸性铁试剂，进行显色反应，测定吸光度值，根据每组甘露糖浓度与测得的吸光度值之间的关系绘制标准对应关系曲线；取用底物溶液，加入甘露聚糖酶，进行酶解反应，并测定吸光度值，计算甘露聚糖酶活力。与现有技术的MBTH法相比该方法更灵敏、更准确，显色产物更加稳定。