一种高效拯救禽冠状病毒的方法及其应用

    公开(公告)号:CN117568288B

    公开(公告)日:2024-05-17

    申请号:CN202311330504.5

    申请日:2023-10-16

    摘要: 本发明涉及一种高效拯救禽冠状病毒的方法及其应用,属于冠状病毒反向遗传技术领域。为了建立一种能够快速、高效拯救禽冠状病毒的反向遗传学技术方法,本发明通过优化和构建嵌合转录元件组,采用CPER技术将嵌合转录元件组序列和禽冠状病毒基因组序列按5’到3’方向首尾连接,快速构建包含嵌合转录元件组和禽冠状病毒基因组全长cDNA的环状克隆,通过与禽冠状病毒核蛋白真核表达载体共转染细胞,在胞内实现病毒基因组的转录并完成病毒包装,从而快速拯救获得禽冠状病毒。该方法操作简单、高效,可构建以禽冠状病毒为载体嵌合表达外源基因的反向遗传重组病毒,为研究病毒的致病和免疫机理、开发新型嵌合疫苗等提供了高效的技术工具。

    一种分泌抗猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞株及其应用

    公开(公告)号:CN116790509B

    公开(公告)日:2024-02-02

    申请号:CN202310770698.4

    申请日:2023-06-28

    摘要: 本发明公开了一种分泌抗猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞株及其应用,属于生物医药领域。单克隆杂交瘤细胞株命名为312H‑C3,其已保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.23018,保藏日期为2021年8月4日。所述杂交瘤细胞株能够稳定分泌特异性识别PRVgB蛋白的单克隆抗体,可用于制备阻断法抗体检测试剂盒,且酶标单抗最佳使用浓度可达1:4000,极大的节省了原材料。基于312H‑C3建立的抗体检测试剂盒操作简易、特异性好、对猪伪狂犬病病毒变异株gB抗体的检测敏感性优于进口试剂盒(56)对比文件赵微 等.猪伪狂犬病病毒HeN1 株gB 蛋白单克隆抗体的制备 及B 细胞线性表位鉴定《.中国预防兽医学报》.2018,第40卷(第9期),854-857.Panpan Zhang et al..Identification oflinear B cell epitope on gB, gC, and gEproteins of porcine pseudorabies virususing monoclonal antibodies《.VeterinaryMicrobiology》.2019,第234卷83-91.Zhenyang Guo et al..Preparation andIdentification of a Monoclonal Antibodyagainst the Pseudorabies Virus gEGlycoprotein through a Novel Strategy.《Veterinary Sciences》.2023,第10卷(第133期),1-12.赵静.猪伪狂犬病病毒gB抗体阻断ELISA检测方法的建立及初步应用《.中国优秀硕士学位论文全文数据库 基础科学辑》.2021,(第9期),A006-296.