一种基于iTRAQ标记测定烟碱诱导细胞差异表达蛋白质的方法

    公开(公告)号:CN107064338B

    公开(公告)日:2019-12-27

    申请号:CN201710116236.5

    申请日:2017-03-01

    Abstract: 本发明为一种基于iTRAQ标记测定烟碱诱导细胞差异表达蛋白质的方法,提供一种烟碱暴露神经细胞差异蛋白质组的分析方法。具体而言,神经细胞经含有烟碱的培养基培养后,经蛋白质的抽提,蛋白浓度、样品质量及平行性的测定,酶解,iTRAQ标记和nano‑LC‑Q‑TOF分析鉴定后,进行搜库分析。本发明的方法定量分析了1mmol/L烟碱暴露1h SHSY‑5Y蛋白质的差异表达,其中参与MAPK级联生物过程和蛋白酶体信号通路的蛋白酶体蛋白,可能在烟碱成瘾中发挥重要作用,从而达到了解烟碱诱导神经细胞的差异表达蛋白质及差异蛋白质参与的生物过程的目的。

    一种巴豆醛-DNA加合物的测定方法

    公开(公告)号:CN105911165B

    公开(公告)日:2018-02-27

    申请号:CN201610226586.2

    申请日:2016-04-13

    Abstract: 一种巴豆醛‑DNA加合物的测定方法,即DNA中Propano‑dG的测定方法,采用巴豆醛溶液暴露小牛胸腺DNA,DNA溶液进行酶水解并依次加入稳定同位素内标和DNA水解酶。水解液经Strata‑X小柱固相萃取,收集洗脱液,室温下氮吹至干,复溶于甲醇水溶液,引入LC‑MS/MS系统分析,可准确检测出加合物Propano‑dG的含量水平。本发明为全新的DNA中巴豆醛‑DNA加合物的测定方法,采用稳定同位素作为内标定量分析物可以减少样品前处理过程中引起的误差,串联质谱法更好的提高了方法的选择性、准确性和灵敏度。通过色谱柱以及洗脱条件的选择与优化,较好的提高了色谱分离过程,缩短了色谱分析的时间,减少了有机溶剂的消耗量。

    一种丙烯醛-DNA加合物的测定方法

    公开(公告)号:CN105911168B

    公开(公告)日:2018-02-16

    申请号:CN201610227445.2

    申请日:2016-04-13

    Abstract: 一种丙烯醛‑DNA加合物的测定方法,即DNA中α‑Acr‑dG和γ‑Acr‑dG的测定方法,包括采用丙烯醛溶液暴露小牛胸腺DNA,DNA溶液进行酶水解并依次加入稳定同位素内标和DNA水解酶。水解液经Strata‑X小柱固相萃取,收集洗脱液,引入LC‑MS/MS系统分析,可准确检测出α‑Acr‑dG和γ‑Acr‑dG的含量水平。本发明为全新的DNA中丙烯醛‑DNA加合物的测定方法,采用稳定同位素作为内标定量分析物可以减少样品前处理过程中引起的误差,串联质谱法更好的提高了方法的选择性、与准确性和灵敏度。通过色谱柱以及洗脱条件的选择与优化,较好的提高了色谱分离过程,缩短了色谱分析的时间,减少了有机溶剂的消耗量。

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