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公开(公告)号：CN113621657B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN202110848338.2
申请日：2021-07-27
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12P5/02
Abstract: 本发明属化学生产和化学合成领域，公开了一种类细胞多相乳液光酶体系催化油脂水解脱羧的方法。向脂肪酶液中加入可溶性盐、聚合物和/或亲水醇、脂肪酸光脱羧酶和油脂，配成类细胞多相乳液体系；或者将可溶性盐、聚合物和/或亲水醇、脂肪酸光脱羧酶和脂肪酸混合均匀配成类细胞多相乳液体系；类细胞多相乳液体系于搅拌条件下，蓝光照射下进行酶催化反应，反应结束后，加入乙酸乙酯萃取，静置或离心至分为三层，收集上层液产物为水解及脱羧后产物。脂肪酶可催化甘油酯的深度水解，脂肪酸光脱羧酶催化游离脂肪酸的脱羧，可实现反应快速、智能控制的同时，解除底物抑制，建立一种高效、可控、酶易回收且产物可同步分离的新型多酶联用催化体系。
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公开(公告)号：CN112662644B
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202110067082.1
申请日：2021-01-19
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域，公开了一种甘油磷酸二酯磷酸二酯酶(GDPD)突变体及其应用，所述突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上突变所得，即亲本序列中第60位的天冬氨酸和第67位的丝氨酸中的至少一个突变为除与自身同一生化特性类别氨基酸以外的其他任意一种氨基酸。本发明获得的GDPD突变体可用于催化溶血磷脂获得高纯度溶血磷脂酸，相较于野生型，突变体能够达到水解溶血磷脂只生成单一溶血磷脂酸的目的，降低了溶血磷脂酸制备过程中的纯化难度，进一步提升了该酶在药物、食品、化妆品等领域的利用价值。
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公开(公告)号：CN114231355A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111401279.0
申请日：2021-11-24
Applicant: 华南理工大学 , 广东粤膳特医营养科技有限公司
Abstract: 本发明属植物油脱胶领域，具体涉及一种酶法脱胶的方法，包括以下步骤：对植物油进行酸化处理，将磷脂酶和单甘油酯脂肪酶加入到酸化处理后的植物油中，进行脱胶反应；将脱胶后的植物油升温至80‑100℃，分离反应产物，取油相得到脱胶植物油。本方法使用单甘油酯脂肪酶促进磷脂酶脱胶，使得脱胶油得率高，减少乳化，易于分离纯化。本发明提高了甘油二酯的保留率，甘油二酯保留率可达95％以上，降低了脱胶油含磷量，脱胶油磷含量仅为6.1‑6.5mg/kg，具有显著的脱胶效果。
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公开(公告)号：CN113755470A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202111163758.3
申请日：2021-09-30
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程领域，公开了一种脂肪酶最适反应pH的调控方法，所述脂肪酶是与Gibberella zeae来源的脂肪酶GZEL一级序列相似度为50％以上，且在末端具有HxxYxxxxxxC保守基序的脂肪酶，针对该保守基序内距离半胱氨酸残基1‑5个残基位点的氨基酸进行突变。本发明可实现对应脂肪酶最适反应pH在酸性、中性、碱性环境进行任意切换。本发明还提供了具体突变的氨基酸残基信息。本发明突变位点的选择，在确保酶蛋白最适反应温度及酶活力不变的情况下，仅对其最适反应pH造成改变，所改造的脂肪酶进一步扩大了反应pH条件的适用性。
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公开(公告)号：CN113481183A
公开(公告)日：2021-10-08
申请号：CN202110679849.6
申请日：2021-06-18
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于酶工程领域，公开了一种海洋微生物脂肪酶嵌合体及其构建方法和应用，脂肪酶嵌合体氨基酸序列如SEQ NO.1所示，编码脂肪酶嵌合体的基因核苷酸序列如SEQ NO.2所示。构建方法如下：(1)pcr扩增出GMGL的N端前160个氨基酸肽段；(2)无缝克隆方式将步骤(1)的氨基酸肽段替换到CoMGL对应肽段得到重组质粒；(3)将测序成功的重组质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞内进行异源表达与纯化，得到脂肪酶嵌合体160。改造后的嵌合体160在最适条件的比酶活为741.8U/mg，是野生型CoMGL的4.9倍，是野生型GMGL的2.7倍；最适反应温度为70℃，具有良好的工业应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108531522B
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN201810193360.6
申请日：2018-03-09
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12P7/64
Abstract: 本发明属于生物工程领域，公开了一种酶法催化合成单甘酯的方法，具体是将甘油与脂肪酸按摩尔比为1:0.1～1:1进行混合，以固定化单甘酯脂肪酶作为催化剂，在温度为40‑70℃、搅拌速度为200～600rpm的条件下反应，利用真空泵不断除去反应过程中产生的水分，最后通过离心分离，得到单甘酯产物。本发明采用单甘酯脂肪酶作为催化剂酯化合成不饱和脂肪酸甘油单酯，反应的过程中不产生其他甘油酯副产物，简化单甘酯产物分离成本，同时具有减少能耗和环境友好，反应条件温和，转化效率高，产物纯度高，酶活损失少等优点，适合大规模推广应用。
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公开(公告)号：CN112899256A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110129291.4
申请日：2021-01-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于南极细菌的耐低温磷脂酶D及其制备方法和应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；该耐低温磷脂酶D基因序列如SEQ IDNO:2所示。本发明获得一株耐低温磷脂酶D的大肠杆菌重组表达菌株，利用该菌株，可实现重组蛋白大量可溶性表达，易于后期纯化及蛋白获得。本发明的表达产物具备有良好的低温储藏稳定性和良好的酶活力，同时对有机溶剂和表面活性剂有一定的耐受性。本发明获得磷脂酶D可适用于磷脂改性，生产磷脂酸及各类天然稀有磷脂和非天然磷脂化合物，应用于生物、食品、医药、化妆品、农业、工业等领域。
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公开(公告)号：CN112592909A
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN202110004120.9
申请日：2021-01-04
Applicant: 广州永华特医营养科技有限公司 , 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种甘油酯脂肪酶SMG1突变体及其编码基因和应用。该突变体为甘油酯脂肪酶突变体Y260C‑G268C，其氨基酸序列包括如SEQ ID NO.1所示的序列，核苷酸序列包括如SEQ ID NO.2或其互补序列。与野生型对比，本发明获得的甘油酯脂肪酶突变体Y260C‑G268C的Tm值为53.0℃,50℃半衰期为92.4min。与野生型对比，所述甘油酯脂肪酶突变体Y260C‑G268C的Tm值提高3.0℃,50℃半衰期提高22.7倍；且比活力也相对野生型提高约2倍，其更适用于工业领域上的应用。
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公开(公告)号：CN112538505A
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202011446104.7
申请日：2020-12-08
Applicant: 华南理工大学 , 广州永华特医营养科技有限公司
IPC: C12P7/64
Abstract: 本发明涉及一种酶法酯交换方法，包括以下步骤：在脂肪酶的作用下，甘油三酯A与甘油三酯B进行酯交换反应；所述甘油三酯A为短链甘油三酯、中链甘油三酯和长链甘油三酯中的至少一种；所述甘油三酯B为长链甘油三酯；所述脂肪酶为脂肪酶MAS1或MAS1‑H108A。本发明方法可以同时高收率地实现短/中/长甘油三酯与长链甘油三酯的酯交换。
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公开(公告)号：CN110468117B
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN201910844700.1
申请日：2019-09-07
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种有机溶剂耐受的脂肪酶突变体及其应用，属于基因工程及酶工程技术领域，本发明基于酶蛋白结构分析，设计及构建酶突变库，筛选获得对有机溶剂耐受性增强的脂肪酶突变体，并构建得到高效表达该突变体的毕赤酵母工程菌，该有机溶剂耐受性增强的脂肪酶突变体，相对于野生型在对耐受有机溶剂的能力显著增强，在50％的乙醇处理2小时，其残余活力仍保留是75％，约为是野生型的3倍；该脂肪酶突变体可在生物柴油及风味酯制备加工过程中应用，具有良好的稳定性能，可在应用过程中寿命延长，节约生产成本和提高生产效率。
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