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公开(公告)号:CN101314618A
公开(公告)日:2008-12-03
申请号:CN200810122762.3
申请日:2008-06-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/44 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及芳基-N-甲基氨基甲酸酯类农药残留免疫的检测方法,属于生物技术领域。以载体蛋白与芳基-N-甲基氨基甲酸酯类农药通用半抗原(HA)偶联,获得完全抗原,以该抗原免疫Balb/C小鼠,应用杂交瘤技术,经ELISA法筛选及有限稀释法亚克隆化,获得可稳定分泌抗芳基-N-甲基氨基甲酸酯类农药的杂交瘤细胞株,制备获得单克隆抗体。以单克隆抗体为基础,建立四种芳基-N-甲基氨基甲酸酯类农药残留ELISA检测方法,该方法具较强的特异性、灵敏性及稳定性,为芳基-N-甲基氨基甲酸酯类农药微量检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。
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公开(公告)号:CN101016337A
公开(公告)日:2007-08-15
申请号:CN200710020472.3
申请日:2007-03-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/18 , G01N33/531
Abstract: 本发明重金属镉单克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。专用于特异性识别重金属镉单克隆抗体的制备,及其在农产品和农业生产环境中镉残留的高灵敏快速检测。重金属镉离子与载体蛋白通过双功能金属螯合剂1-(4-异硫氰基苯基)-乙二胺四乙酸偶联形成完全抗原,用该完全抗原免疫Balb/C鼠,脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞通过杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,获得了稳定分泌抗Cd-EDTA的单克隆抗体。本发明抗体的制备技术简便可行:抗原的整个制备过程无需要特别的仪器设备,容易工厂化规模生产。
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公开(公告)号:CN1616482A
公开(公告)日:2005-05-18
申请号:CN200310106275.5
申请日:2003-11-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K1/02 , C07K14/00 , G01N33/53 , G01N33/531
Abstract: 本发明残杀威人工抗原合成方法属于有机化学及免疫学技术范畴。根据有机化学反应的一般原理,合成残杀威半抗原及抗原(包括包被抗原与免疫原),方法,包括:邻-异丙氧基苯甲酰氯的合成,γ-氨基丁酸(H残)的合成;残杀威人工抗原的合成,抗原于-20℃冰箱至少可以存放3年。此抗原具有稳定性好、免疫原性较强等特点。此抗原可制备出高效价、高亲和力的残杀威抗体。抗原制备技术简便可行:抗原的整个制备过程无需要特别的仪器设备,成本低廉,容易工厂化规模生产。
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公开(公告)号:CN1609618A
公开(公告)日:2005-04-27
申请号:CN200410065318.4
申请日:2004-11-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/547 , G01N33/543 , G01N33/535 , G01N33/52 , G01N21/31
Abstract: 本发明速灭威(metolcarb)ELISA检测方法属于农药残留分析及农产品安全检测范畴。检测方程为Logit(B/Bo)=-0.9404LogC+1.5146(其中B为样品孔吸光值,Bo为阳性对照吸光值,C为板孔中测出的速灭威浓度),检测条件为:速灭威包被抗原HOM-OVA 0.6μg/ml在微量分析板中每孔加 50μl,速灭威抗血清稀释20000倍作为工作浓度,1%明胶作封闭物,抗原抗体反应基质(PBST)中甲醇含量为5%、pH值为7.4、离子强度为3.2mol/L,本方法具较强的特异性、灵敏性及稳定性,为速灭威超微量检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。
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公开(公告)号:CN105112314A
公开(公告)日:2015-12-02
申请号:CN201410814846.9
申请日:2014-12-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一株对植物病原真菌和卵菌具有较强拮抗活性的生防细菌菌株OH17。该菌株的特征在于:所述菌株为胶状溶杆菌(Lysobacter gummosus),属于黄单胞科(Xanthomonadaceae)、溶杆菌属(Lysobacter),CGMCC No.8649。菌落形态:在不同培养基上呈现不同形态,在NA培养基上,菌落淡黄色,菌体表面圆润有光泽,表面突出;在LB上生长缓慢,菌落始终为黄色;在10%TSA上,菌落白色,表面平坦;在TSA不生长。生理特征:革兰氏阴性,杆状,无鞭毛;最适生长温度:28℃。该菌株对测试的植物病原真菌和卵菌具有广谱、高效的拮抗作用。
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公开(公告)号:CN104792835A
公开(公告)日:2015-07-22
申请号:CN201510220706.3
申请日:2015-04-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N27/26
Abstract: 本发明涉及一种用于检测有机磷农药杀螟硫磷的电化学方法,其主要的操作步骤包括:(1)提供一个半封闭的电化学反应池,其中包括1根玻碳电极、1根Ag/AgCl参比电极和1根铂丝电极。反应池内包含4mL样品液;(2)在电化学反应池内施加开路电压,维持120秒;(3)在电化学反应池内进行方波扫描,扫描范围(-0.2V,-1.0V),步进电压4mV,振幅25mV,频率25Hz;(4)在电化学反应池内施加同一开路电压,维持240秒;(5)在电化学反应池内进行方波扫描,扫描范围(-0.6V,0.3V),步进电压4mV,振幅25mV,频率25Hz。其中,用于杀螟硫磷电化学检测的电化学反应池中含有4mLpH=5.0的醋酸盐缓冲液;最后一步方波扫描后的氧化峰大小作为样品中杀螟硫磷浓度的定量依据。该方法对杀螟硫磷的检测灵敏度可达到0.04ng/mL。
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公开(公告)号:CN104046702A
公开(公告)日:2014-09-17
申请号:CN201410272493.4
申请日:2014-06-17
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12Q2531/119 , C12Q2563/131
Abstract: 本发明涉及一种噬菌体免疫环介导等温扩增检测法,首先将噬菌体展示多肽与分析物共同竞争捕获抗体的结合位点,然后环介导等温扩增结合在捕获抗体上的噬菌体,最后对免疫环介导等温扩增反应产物进行分析及结果判定。本发明提供的方法利用噬菌体展示多肽,将免疫竞争和环介导等温扩增结合,实现对不含有核酸的小分子化合物的环介导等温扩增检测。本发明灵敏度高、实用性强,不需要昂贵的精密仪器。
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公开(公告)号:CN103601807A
公开(公告)日:2014-02-26
申请号:CN201310134272.6
申请日:2013-04-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , C07C319/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及氨基甲酸肟脂类农药丁酮威单克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。专用于特异性识别氨基甲酸肟脂类农药丁酮威单克隆抗体的制备,及其在农产品和农业生产环境中丁酮威残留的高灵敏快速检测。丁酮威半抗原与载体蛋白通过活泼酯法偶联形成完全抗原,用该完全抗原免疫Balb/C鼠,脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞通过杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,获得了稳定分泌抗丁酮威的单克隆抗体。本发明抗体的制备技术可行:抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备,易于规模化生产。
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公开(公告)号:CN103102415A
公开(公告)日:2013-05-15
申请号:CN201210238321.6
申请日:2012-07-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及同时识别吡虫啉和甲基对硫磷农药的双特异性单克隆抗体及其制备方法,属于生物技术领域。用杂交-杂交瘤技术将分泌抗甲基对硫磷单克隆抗体的杂交瘤细胞和经吡虫啉抗原免疫的小鼠脾细胞进行融合,获得了能稳定分泌同时抗甲基对硫磷和吡虫啉农药的双特异性单克隆抗体FQ-D6。此抗体经过有效性验证证明可用于农业生产环境和农产品中甲基对硫磷和吡虫啉残留的快速灵敏检测。本发明涉及的同时抗甲基对硫磷及吡虫啉农药双特异性单克隆抗体制备技术简便可行,抗体的整个制备过程无需特别的仪器设备,容易工厂化规模生产。
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公开(公告)号:CN103018435A
公开(公告)日:2013-04-03
申请号:CN201210237844.9
申请日:2012-07-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/531 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及甲基对硫磷等8种有机磷农药的多残留快速检测金标试纸条。试纸条含有衬板、样品垫、金标结合垫、纤维素膜和吸水垫。金标结合垫为吸附金标抗体的玻璃纤维素膜;在纤维素膜上有甲基对硫磷偶联的载体蛋白溶液印制的直线式隐形检测线,用兔抗鼠IgG印制的直线式隐形对照线,两条线平行排列组合。本发明试纸条具有检测谱广、灵敏度高、快速、简便、直观、准确的特点,并且前处理简单,不需要任何仪器设备,无需专业人员操作。
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