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公开(公告)号：CN102660500A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210167044.4
申请日：2012-05-28
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛iPS细胞诱导分化形成卵母细胞的方法。该方法包括猪卵泡液制作、牛iPS细胞培养、牛iPS细胞的卵母细胞定向分化三个步骤。本发明将牛iPS细胞在限定的诱导条件下分化成卵母细胞。由于牛iPS细胞的诱导仅需要种用牛少量的皮肤细胞，牛iPS细胞的应用能够有效避免分离牛ES细胞需要破坏大量优质胚胎的弊端。因此，该方法在牛的抗病育种、乳腺生物反应器生产、优秀遗传资源的保护和开发等方面都具有着广阔的应用前景和发展潜力。
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公开(公告)号：CN102358892A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110286472.4
申请日：2011-09-23
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/10
Abstract: 本发明公开了牛iPS细胞拟胚体的制作方法，包括牛胎儿成纤维细胞的培养、牛iPS细胞的诱导和培养及鉴定、牛iPS细胞的拟胚体制作、牛iPS细胞的拟胚体悬浮培养和牛iPS细胞的拟胚体体外分化能力检测。该制作方法形成的牛iPS细胞拟胚体避免了传统拟胚体的悬滴操作、拟胚体组成细胞纯度高、拟胚体组成细胞体外分化能力强等特点，结果显示了牛iPS细胞拟胚体的制作方法具有实用性强、易操作和推广等优点。
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公开(公告)号：CN102321522A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110286475.8
申请日：2011-09-23
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12M1/00
Abstract: 本发明公开了一种细胞刮刀，包括中空的管状体，管状体由细径管、锥形管和粗径管组成；管状体的前部为细径管，后部为粗径管，且细径管的管径小于粗径管，细径管与粗径管通过锥形管连接；细径管轴线与锥形管轴线构成钝角；锥形管与粗径管同轴；细径管、锥形管和粗径管的内腔连通为一体；管状体的两端设有开口，一端开口位于细径管的前端，另一端开口位于粗径管的末端。本发明采用曲面结构细胞刮刀，刮擦时对细胞集落分割容易且损伤小，装上吸头又可用作转移细胞的吸管，是一件适于在细胞传代过程中使用的方便高效的操作工具。
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公开(公告)号：CN102277402A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110204137.5
申请日：2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12P21/02 , C07K14/435 , C07K1/14
Abstract: 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体，介导重组核蛋白在细胞核内表达，待重组核蛋白在细胞内表达稳定后，使用操作液处理细胞，收集细胞，超声波破碎，离心去沉淀后收集细胞上清液，上清液过滤除菌后添加到细胞培养液中，4h后提取的荧光标记外源重组核蛋白通过细胞质进入细胞核并定位于细胞核内。利用该方法提取的核蛋白能够发挥蛋白功能使细胞发生形态特征的改变，结果证实本发明能够简单、快速、高效地提取具有生物活性的细胞内核蛋白。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102174466A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110008808.0
申请日：2011-01-14
Applicant: 安徽农业大学
Inventor： 曹鸿国 , 章孝荣 , 刘亚 , 张运海 , 陶勇 , 方富贵 , 殷慧群 , 孙雪萍 , 薛奕杰 , 张卫琴 , 黄伟玲 , 陈涛 , 李运生 , 任春环 , 张子军 , 丁建平 , 刘洪瑜 , 刘旭光 , 王力生
IPC: C12N5/071 , C12N5/10 , C12N7/01 , C12N15/867
Abstract: 本发明公开了一种猪体细胞诱变方法，利用携带增强型绿色荧光蛋白标记的慢病毒多次感染作用胎猪成纤维细胞，在干细胞培养液的生长环境条件下胎猪成纤维细胞逐步改变原有的纤维状生长形态，形成鸟巢状细胞集落，分离培养传代的细胞集落边缘界限清晰，生长状态稳定，核型正常，碱性磷酸酶表达为阳性，免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性，体内分化形成含有三个胚层的畸胎瘤，结果证实慢病毒作用下发生诱变的猪体细胞具有干细胞特征。
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公开(公告)号：CN102071238A
公开(公告)日：2011-05-25
申请号：CN201010560587.3
申请日：2010-11-26
Applicant: 安徽农业大学 , 合肥博大牧业科技开发有限责任公司
IPC: C12P21/02
Abstract: 本发明涉及麦芽糖结合蛋白-促性腺激素释放激素六聚体的发酵工艺，该工艺包括以下步骤：发酵培养基的筛选和发酵条件的优化。发酵培养基包括酵母浸出物、蛋白胨、NaCl等组成，发酵工艺的优化包括培养温度、诱导时机、诱导剂浓度、诱导后培养时间、发酵液酸碱度的调节方式、搅拌速率、通气量等。本发明的发酵工艺生产成本低廉，生产周期短，只需要9-11小时，同时，还提高了单位菌体的目的蛋白表达量，实现了目的蛋白的高效表达。本发明制得的麦芽糖结合蛋白-促性腺激素释放激素六聚体（MBP-GnRH6）可用于各种哺乳动物的免疫去势。
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公开(公告)号：CN103074296B
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201310020667.3
申请日：2013-01-21
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液。其中，小鼠裸卵体外成熟方法的步骤包括（1）小鼠裸卵的分离培养；（2）小鼠裸卵的成熟检测；（3）小鼠裸卵成熟后发育能力检测。小鼠裸卵体外成熟培养液由α-MEM+10%FBS+10ng/ml？EGF+1.5U/ml？hCG+1mM/ml？Glu+0.23mM/ml丙酮酸钠+10uM？Forskolin组成。本发明通过在小鼠卵母细胞培养体系中添加同卵母细胞体外成熟相关的化学试剂，建立了小鼠裸卵体外高效成熟发育体系，该体系不仅能够有效人工调控小鼠裸卵的体外成熟，而且成熟后的裸卵能够具有正常卵母细胞形成胚胎的发育能力，从而为小鼠作为实验动物模型在新品种培育、转基因育种和品种改良等方面的重要的材料，也为人类辅助生殖技术的纵深发展提供基础。
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公开(公告)号：CN102277402B
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN201110204137.5
申请日：2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12P21/02 , C07K14/435 , C07K1/14
Abstract: 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体，介导重组核蛋白在细胞核内表达，待重组核蛋白在细胞内表达稳定后，使用操作液处理细胞，收集细胞，超声波破碎，离心去沉淀后收集细胞上清液，上清液过滤除菌后添加到细胞培养液中，4h后提取的荧光标记外源重组核蛋白通过细胞质进入细胞核并定位于细胞核内。利用该方法提取的核蛋白能够发挥蛋白功能使细胞发生形态特征的改变，结果证实本发明能够简单、快速、高效地提取具有生物活性的细胞内核蛋白。
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公开(公告)号：CN102071238B
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201010560587.3
申请日：2010-11-26
Applicant: 安徽农业大学 , 合肥博大牧业科技开发有限责任公司
IPC: C12P21/02
Abstract: 本发明涉及麦芽糖结合蛋白-促性腺激素释放激素六聚体的发酵工艺，该工艺包括以下步骤：发酵培养基的筛选和发酵条件的优化。发酵培养基包括酵母浸出物、蛋白胨、NaCl等组成，发酵工艺的优化包括培养温度、诱导时机、诱导剂浓度、诱导后培养时间、发酵液酸碱度的调节方式、搅拌速率、通气量等。本发明的发酵工艺生产成本低廉，生产周期短，只需要9-11小时，同时，还提高了单位菌体的目的蛋白表达量，实现了目的蛋白的高效表达。本发明制得的麦芽糖结合蛋白-促性腺激素释放激素六聚体（MBP-GnRH6）可用于各种哺乳动物的免疫去势。
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