公开(公告)号：CN116162173A

公开(公告)日：2023-05-26

申请号：CN202211336837.4

申请日：2022-10-28

Applicant: 安徽农业大学 ,  临泉县现代农业技术合作推广服务中心(安徽农业大学新农村发展研究院皖西北综合试验站) ,  临泉县中原牧业发展中心

Inventor： 龚新豹 ,  陆君泰 ,  徐爽爽 ,  张为 ,  闫旭 ,  叶菁 ,  秦平 ,  辛洪雷 ,  刘永法 ,  方富贵 ,  张运海 ,  刘亚 ,  李运生

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  A61K39/00 ,  A61K39/39 ,  A61P15/08 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种GnRH6‑CRM197重组蛋白去势疫苗及制备方法，所述哺乳动物去势重组蛋白疫苗中含有GnRH重组蛋白抗原，所述GnRH重组蛋白抗原的氨基酸序列如序列表Seq_1所示。所述GnRH6‑CRM197重组蛋白去势疫苗含有哺乳动物GnRH序列，所述哺乳动物包括犬、猫、宠物猪、荷兰猪、小鼠。所述哺乳动物去势重组蛋白疫苗含有序列表Seq_2的犬GnRH序列。所述哺乳动物去势重组蛋白疫苗含有序列表Seq_3的山羊CRM197序列。本发明公开了重组GnRH6‑CRM197蛋白疫苗的构建及转化表达和纯化，以及工程菌BL21(DE3)‑PET21a‑GnRH6‑CRM197的获取。该疫苗通过免疫接种雄性动物后，使睾丸萎缩，从而达到控制动物生育力的目的。

公开(公告)号：CN116162173B

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202211336837.4

申请日：2022-10-28

Applicant: 安徽农业大学 ,  临泉县现代农业技术合作推广服务中心(安徽农业大学新农村发展研究院皖西北综合试验站) ,  临泉县中原牧业发展中心

Inventor： 龚新豹 ,  陆君泰 ,  徐爽爽 ,  张为 ,  闫旭 ,  叶菁 ,  秦平 ,  辛洪雷 ,  刘永法 ,  方富贵 ,  张运海 ,  刘亚 ,  李运生

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  A61K39/00 ,  A61K39/39 ,  A61P15/08 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种GnRH6‑CRM197重组蛋白去势疫苗及制备方法，所述哺乳动物去势重组蛋白疫苗中含有GnRH重组蛋白抗原，所述GnRH重组蛋白抗原的氨基酸序列如序列表Seq_1所示。所述GnRH6‑CRM197重组蛋白去势疫苗含有哺乳动物GnRH序列，所述哺乳动物包括犬、猫、宠物猪、荷兰猪、小鼠。所述哺乳动物去势重组蛋白疫苗含有序列表Seq_2的犬GnRH序列。所述哺乳动物去势重组蛋白疫苗含有序列表Seq_3的山羊CRM197序列。本发明公开了重组GnRH6‑CRM197蛋白疫苗的构建及转化表达和纯化，以及工程菌BL21(DE3)‑PET21a‑GnRH6‑CRM197的获取。该疫苗通过免疫接种雄性动物后，使睾丸萎缩，从而达到控制动物生育力的目的。

公开(公告)号：CN115838777A

公开(公告)日：2023-03-24

申请号：CN202211337783.3

申请日：2022-10-28

Applicant: 安徽农业大学 ,  临泉县现代农业技术合作推广服务中心(安徽农业大学新农村发展研究院皖西北综合试验站) ,  临泉县中原牧业发展中心

Inventor： 洪绮雯 ,  龚新豹 ,  潘麟茜 ,  潘啸宇 ,  程佳怡 ,  陆君泰 ,  徐爽爽 ,  张为 ,  闫旭 ,  秦平 ,  方富贵 ,  张运海 ,  刘亚 ,  李运生 ,  辛洪雷 ,  刘永法

IPC: C12P21/02 ,  C07K19/00 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明公开了促性腺激素释放激素六聚体－白喉毒素突变体CRM197的发酵工艺，该工艺包括以下步骤：发酵培养基的筛选和发酵条件的优化。发酵培养基包括酵母浸粉、胰蛋白胨、NaCl，发酵工艺的优化包括培养温度、诱导剂、诱导剂浓度、诱导后培养时间、发酵液酸碱度的调节方式、搅拌速率、通气量等。本发明的发酵工艺生产成本低廉，生产周期短，只需要12‑15h，同时，还提高了单位菌体的目的蛋白表达量，实现了目的蛋白的高效表达。本发明制得的GnRH6‑CRM197可用于各种哺乳动物的免疫去势，具有进一步研发的价值和良好的产业化前景。

公开(公告)号：CN116063576B

公开(公告)日：2024-06-28

申请号：CN202211434748.3

申请日：2022-11-16

Applicant: 安徽农业大学 ,  临泉县现代农业技术合作推广服务中心(安徽农业大学新农村发展研究院皖西北综合试验站) ,  临泉县中原牧业发展中心 ,  安徽安欣(涡阳)牧业发展有限公司 ,  安徽省田丰牧业科技有限公司

Inventor： 潘富强 ,  傅婉臻 ,  刘亚 ,  钱伟 ,  丁建平 ,  邑晴 ,  辛洪雷 ,  王帅 ,  李伪娜 ,  蒋佳楠 ,  韩梦迪 ,  张颖 ,  方富贵 ,  张运海 ,  李运生

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  A61K39/00 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明属于分子疫苗学技术领域，公开了一种FSHR‑DTT重组去势疫苗，其含有如序列表Seq_1所示的动物FSHR序列以及如序列表Seq_2所示的白喉毒素跨膜区域氨基酸序列；其氨基酸序列，如序列表Seq_3所示。同时，公开了一种FSHR‑DTT重组去势疫苗的制备方法和应用。本发明中采取FSHR和DTT蛋白重组的方式，生产的FSHR‑DTT重组去势疫苗，抗原免疫原性高，免疫效果好，稳定性高；同时使用的是重组FSHR‑DTT蛋白，减少了多肽合成制剂成本，使用更加便利；采用FSHR和DTT重组蛋白表达方式，表达量高，免疫原性好，疫苗制剂简单，有利于产业化应用。

公开(公告)号：CN116617377A

公开(公告)日：2023-08-22

申请号：CN202211461291.5

申请日：2022-11-16

Applicant: 安徽农业大学 ,  临泉县现代农业技术合作推广服务中心(安徽农业大学新农村发展研究院皖西北综合试验站) ,  临泉县中原牧业发展中心 ,  安徽安欣(涡阳)牧业发展有限公司 ,  安徽省田丰牧业科技有限公司

Inventor： 潘富强 ,  傅婉臻 ,  刘亚 ,  钱伟 ,  丁建平 ,  邑晴 ,  顾利侠 ,  王帅 ,  李伪娜 ,  蒋佳楠 ,  韩梦迪 ,  张颖 ,  方富贵 ,  张运海 ,  李运生

IPC: A61K39/00 ,  A61K39/385 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  A61P15/16

Abstract: 本发明属于分子疫苗学技术领域，公开了一种GnRH8‑DTT重组去势疫苗，其含有如序列表Seq_1所示的哺乳类及其7个变体的GnRH序列以及如序列表Seq_2所示的白喉毒素跨膜区域氨基酸序列；其氨基酸序列如序列表Seq_3所示。同时，公开了一种GnRH8‑DTT重组去势疫苗的制备方法和应用。本发明中采取GnRH和DTT蛋白重组的方式，生产的GnRH8‑DTT重组去势疫苗，抗原免疫原性高，免疫效果好，稳定性高；同时减少了多肽合成制剂成本，使用更加便利；采用GnRH和DTT重组蛋白表达方式，表达量高，免疫原性好，疫苗制剂简单，有利于产业化应用。

公开(公告)号：CN116063576A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202211434748.3

申请日：2022-11-16

Applicant: 安徽农业大学 ,  临泉县现代农业技术合作推广服务中心(安徽农业大学新农村发展研究院皖西北综合试验站) ,  临泉县中原牧业发展中心 ,  安徽安欣(涡阳)牧业发展有限公司 ,  安徽省田丰牧业科技有限公司

Inventor： 潘富强 ,  傅婉臻 ,  刘亚 ,  钱伟 ,  丁建平 ,  邑晴 ,  辛洪雷 ,  王帅 ,  李伪娜 ,  蒋佳楠 ,  韩梦迪 ,  张颖 ,  方富贵 ,  张运海 ,  李运生

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  A61K39/00 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明属于分子疫苗学技术领域，公开了一种FSHR‑DTT重组去势疫苗，其含有如序列表Seq_1所示的动物FSHR序列以及如序列表Seq_2所示的白喉毒素跨膜区域氨基酸序列；其氨基酸序列，如序列表Seq_3所示。同时，公开了一种FSHR‑DTT重组去势疫苗的制备方法和应用。本发明中采取FSHR和DTT蛋白重组的方式，生产的FSHR‑DTT重组去势疫苗，抗原免疫原性高，免疫效果好，稳定性高；同时使用的是重组FSHR‑DTT蛋白，减少了多肽合成制剂成本，使用更加便利；采用FSHR和DTT重组蛋白表达方式，表达量高，免疫原性好，疫苗制剂简单，有利于产业化应用。

公开(公告)号：CN104604844A

公开(公告)日：2015-05-13

申请号：CN201510017079.3

申请日：2015-01-13

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 薛昌安 ,  刘亚 ,  李运生 ,  朱根宝 ,  方富贵 ,  章孝荣 ,  丁建平 ,  张运海 ,  曹鸿国

IPC: A01N1/02

Abstract: 本发明公开了一种山羊冻精稀释液及其制备方法，所述冻精稀释液的主要成分为14～18g/L的磷脂酰胆碱和2～6g/L的胆固醇；该冻精稀释液利用磷脂酰胆碱和胆固醇来取代卵黄，用于补充冻精过程中细胞膜上磷脂和胆固醇的丢失，具有保护精子的作用，其冻精保护效果优于传统的卵黄，同时避免了卵黄在用于山羊精液冷冻保护中的不利影响。

公开(公告)号：CN103215221A

公开(公告)日：2013-07-24

申请号：CN201310071009.7

申请日：2013-03-06

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 蒲勇 ,  曹鸿国 ,  章孝荣 ,  王张帆 ,  卞雅尼 ,  张运海 ,  刘亚 ,  李运生 ,  方富贵 ,  陶勇

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明公开了山羊卵丘细胞体外培养抗凋亡处理方法，包括以下步骤：（1）卵丘卵母细胞复合物体外成熟培养挑取的卵丘卵母细胞复合物经操作液清洗后，置于成熟液中，培养时，将维甲酸添加到成熟液中，50～80个卵丘卵母细胞复合物/孔，覆盖矿物油，于饱和湿度下，38.5°C培养；所述操作液组分为TCM199+5%FBS+100IU/ml青霉素+0.1mg/ml链霉素；所述成熟液组分为TCM199+10%FBS+10IU/mlPMSG+5IU/mlhCG +0.1mg/mlL-半胱氨酸+10ng/mlEGF；（2）卵丘细胞凋亡相关基因表达检测（3）卵丘细胞凋亡末端标记检测。本发明在山羊卵丘卵母细胞复合物体外成熟培养过程中，添加维甲酸（RA）能够有效地抑制卵母细胞外周卵丘细胞的凋亡，进而促进山羊卵母细胞细胞核与细胞质的成熟。

公开(公告)号：CN103074296A

公开(公告)日：2013-05-01

申请号：CN201310020667.3

申请日：2013-01-21

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 杨盼 ,  曹鸿国 ,  章孝荣 ,  张飞 ,  张运海 ,  刘亚 ,  李运生 ,  陶勇 ,  方富贵

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明公开了小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液。其中，小鼠裸卵体外成熟方法的步骤包括（1）小鼠裸卵的分离培养；（2）小鼠裸卵的成熟检测；（3）小鼠裸卵成熟后发育能力检测。小鼠裸卵体外成熟培养液由α-MEM+10%FBS+10ng/mlEGF+1.5U/mlhCG+1mM/mlGlu+0.23mM/ml丙酮酸钠+10uMForskolin组成。本发明通过在小鼠卵母细胞培养体系中添加同卵母细胞体外成熟相关的化学试剂，建立了小鼠裸卵体外高效成熟发育体系，该体系不仅能够有效人工调控小鼠裸卵的体外成熟，而且成熟后的裸卵能够具有正常卵母细胞形成胚胎的发育能力，从而为小鼠作为实验动物模型在新品种培育、转基因育种和品种改良等方面的重要的材料，也为人类辅助生殖技术的纵深发展提供基础。

公开(公告)号：CN102703423A

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201210195070.8

申请日：2012-06-14

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 曹鸿国 ,  章孝荣 ,  杨盼 ,  蒲勇 ,  张运海 ,  刘亚 ,  陶勇 ,  方富贵 ,  李运生

IPC: C12N15/06 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种小鼠淋巴细胞诱变方法，包括以下步骤：（1）淋巴细胞的分离；（2）小鼠ES细胞的培养；（3）淋巴细胞与ES细胞的融合；（4）诱变细胞的分离培养。淋巴细胞作为动物机体内的一种重要组成细胞，具有来源广泛、取材方面等优点，本发明借助细胞融合技术诱导小鼠淋巴细胞转变形成干细胞，形成的干细胞具有小鼠ES细胞的形态、基因表达、体外分化能力等特征，有效避免了病毒在干细胞诱导中的潜在危害。因此，该方法将为小鼠体细胞转变成干细胞并得到广泛应用奠定基础，同时，也为动物或人类的干细胞研究和利用提供重要借鉴。