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公开(公告)号：CN113789293A
公开(公告)日：2021-12-14
申请号：CN202111351835.8
申请日：2021-11-16
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
摘要： 本发明公开了一种高产天然水蛭素的大肠杆菌工程菌株及其应用，属于生物医药技术领域。本申请以模式生物大肠杆菌为基础，通过游离质粒共表达编码水蛭素的基因hv和编码水蛭酪氨酸磺酸转移酶的基因TPS，构建天然水蛭素的合成途径，获得天然水蛭素的积累菌株。hv的核苷酸序列如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示，TPS的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明为天然水蛭素的合成提供了新的策略，其生产效率比酶法合成天然水蛭素及从动物组织中提取天然水蛭素明显提高，生产成本大大降低，为天然水蛭素的工业化大规模生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109234255B
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN201811457513.X
申请日：2018-11-30
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
摘要： 本发明涉及α‑葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。本发明首次揭示了石蒜属植物忽地笑的α‑葡萄糖苷酶，其具有良好的转葡萄糖基活性，可以产生α‑葡萄糖苷物质。本发明还揭示了编码所述α‑葡萄糖苷酶的多核苷酸，表达所述α‑葡萄糖苷酶的载体与宿主细胞，以及生产α‑熊果苷的方法。
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公开(公告)号：CN113024654B
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110597581.1
申请日：2021-05-31
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
IPC分类号： C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/81 , A23L3/3526 , A23K20/147
摘要： 本发明公开了一种抗菌肽BMAPM及其表达方法和应用，属于生物医药领域。本发明以牛源Cathelicidins家族的抗菌肽为出发序列，通过人工设计螺旋结构氨基酸序列获得抗菌肽BMAPM，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其杀菌能力与天然抗菌肽相比大大提高。本发明制备抗菌肽BMAPM方法是以酵母为表达宿主，通过在其C端融合荧光蛋白，并通过简并引物随机突变抗菌肽的N端序列，再由流式细胞仪分选荧光强度高的突变株，即筛选抗菌肽高表达的突变株。本发明为高效表达和检测抗菌肽提供了新的方式。
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公开(公告)号：CN111705149A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010595646.4
申请日：2020-06-28
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/6809 , G16B40/00 , G16B25/10 , G16B25/20 , G16B30/10 , G16B20/00 , G16B20/20 , C12R1/01
摘要： 本发明公开了唐菖蒲伯克霍尔德氏菌实时荧光定量PCR（qRT-PCR）内参基因及其引物的筛选和应用。根据已获得的转录组分析结果及已报道的内参基因，初步筛选表达相对较为稳定的12个候选内参基因，基因名分别为：atpD、clpP、clpX、ftsZ、gyrB、lpxC、pyrG、recA、rpoB、rpoD、thyA和16S；针对上述候选基因，设计扩增引物，对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌不同培养条件下（温度、培养基初始pH值、培养时间、不同浓度NaCl处理）的内参基因进行筛选，采用geNorm、NormFinder和Bestkeeper软件对qRT-PCR结果进行分析，最终筛选到在不同培养条件和NaCl处理条件下最稳定表达的内参基因。本发明有利于不同条件下唐菖蒲伯克霍尔德氏菌基因表达分析研究的稳定性和可靠性。
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公开(公告)号：CN111172050A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN201811330943.5
申请日：2018-11-09
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所 , 南京师范大学
摘要： 提高伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.HDXY-02)的毒黄素产量发酵策略，属于微生物发酵技术领域。菌株HDXY-02已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14054。本发明确定最佳接种量为3%，培养温度为30℃。通过单因子实验和统计分析，确定最优培养基为：葡萄糖（19.24 g/L）、蛋白胨（20.45 g/L）、苯丙氨酸（0.472 g/L）、K2HPO4（1.5 g/L）、MgSO4（0.75 g/L），pH7.0。优化后毒黄素产量达1533 mg/L，较优化前提高了296%，为微生物发酵法高产毒黄素提供了一种可行的发酵策略。
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公开(公告)号：CN106605596B
公开(公告)日：2019-06-18
申请号：CN201611194849.2
申请日：2016-12-16
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
IPC分类号： A01H4/00
摘要： 本发明提供一种通过体胚发生大量繁殖忽地笑的方法，进行规模化生产和繁殖以满足市场需要的忽地笑组织培养步骤包括：A.外植体消毒，B.不定芽的诱导，C.愈伤组织的诱导，D愈伤组织的增殖，E愈伤组织的再分化，F.生根培养，H炼苗与移栽。本发明首次将除草剂毒莠定应用于忽地笑的组织培养，获得了稳定的可大量增殖的忽地笑愈伤组织，愈伤组织诱导率达到95％以上，将忽地笑的繁殖系数至少提高了8‑10倍。不仅降低生产成本，而且可以保存母体的全部优良性状，遗传性状稳定。这种方法可在短时间内形成大量的优良试管苗，进行规模化、工厂化生产，为观赏园艺、制药等产业以及忽地笑的后续研究提供了大量的原材料。
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公开(公告)号：CN109234254A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811456929.X
申请日：2018-11-30
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
摘要： 本发明涉及alpha-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。本发明首次揭示了石蒜属植物忽地笑的alpha-葡萄糖苷酶，其具有良好的转葡萄糖基活性，可以产生alpha-葡萄糖苷物质。本发明还揭示了编码所述alpha-葡萄糖苷酶的多核苷酸，表达所述alpha-葡萄糖苷酶的载体与宿主细胞，以及生产α-熊果苷的方法。
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公开(公告)号：CN105039366B
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201510378953.6
申请日：2015-07-01
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
摘要： 本发明涉及一种基于大肠杆菌密码子偏爱性构建的磷酸胆碱胞苷转移酶的cct基因及其表达。所述优化的cct基因采用全合成方法获得，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述基因全长1275bp，编码424个氨基酸，优化后的cct基因与野生基因的同源性为76.6％，优化后cct基因与载体pET‑29a(+)连接得到重组载体pET‑29a‑cct‑op，将该重组载体转化大肠杆菌。经IPTG诱导表达、酶活检测，获得经偏好性改造能高效表达磷酸胆碱胞苷转移酶的工程菌株。本发明的优点在于通过对酿酒酵母cct基因按大肠杆菌密码子偏好重新设计提高了大肠杆菌表达磷酸胆碱胞苷转移酶的效率，可用于胞磷胆碱的生产，提高工业产值，为企业带来经济效益。
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公开(公告)号：CN107099478A
公开(公告)日：2017-08-29
申请号：CN201710417830.8
申请日：2017-06-06
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
摘要： 本发明公开了一株拮抗多种植物病原真菌的忽地笑内生细菌，具体涉及伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY‑02，该菌株己保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No 14054，保藏日期为2017年4月20日。本发明还公开了上述伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY‑02的培养方法和用途。本发明提供的伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY‑02对水稻纹枯病菌的拮抗作用强，对多种病原真菌具有良好的抑制活性，抑菌谱广，可有效抑制菌丝生长。本发明还提供了一种防治农作物真菌病害的生防菌剂，即将HDXY‑02菌株接种于培养基中发酵培养所得的菌剂。该菌株可应用于抑制植物病害的微生物菌剂，具有良好的开发应用前景。
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公开(公告)号：CN102199644B
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201110094643.3
申请日：2011-04-15
申请人： 江苏省中国科学院植物研究所
摘要： 本发明揭示了一种胞苷三磷酸的制备方法，使用单一基因工程菌的培养物或其处理物作为酶源，催化包括氯化铵、乳清酸等进行反应，使得反应液中生成和积聚胞苷三磷酸，并从所述反应液中提取所述胞苷三磷酸。本发明的有益效果为：(1)采用单一的微生物催化反应，更易于控制反应；(2)底物成本较低，可低成本生产胞苷三磷酸；(3)反应迅速、且转化率较高。本发明能广泛地应用于胞苷三磷酸的制备中。
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