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公开(公告)号：CN105838675A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610398475.X
申请日：2016-06-07
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/0789
CPC分类号： C12N5/0647 , C12N2500/25 , C12N2500/30 , C12N2500/90 , C12N2501/115 , C12N2501/125 , C12N2501/155 , C12N2501/2303 , C12N2501/2306 , C12N2501/26 , C12N2501/305
摘要： 本发明的目的在于提供一种造血干细胞无血清培养基，成分包括，细胞因子组合、DMEM培养液、胰岛素、转铁蛋白、BMP?4、谷胱甘肽、FGF?2和生长激素。所述细胞因子组合包括IL?3，IL?6，SCF和FL，浓度分别为：IL?3：1?20ng/ml；IL?6：1?100ng/ml；SCF：1?100ng/ml；FL：1?100ng/ml。通过研发无血清培养基、改变造血因子的加入顺序，解决目前造血干细胞培养基现有技术的弊端。
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公开(公告)号：CN105820999A
公开(公告)日：2016-08-03
申请号：CN201610323312.5
申请日：2016-05-17
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/0775
CPC分类号： C12N5/0663 , C12N2501/21 , C12N2501/999
摘要： 本发明现提供一种新型动员骨髓间充质干细胞的制剂，包括DFO，DFO的剂量范围为1?15mg/kg。优选是DFO和BOP联合使用。本发明具有2个显著性优势，第一，动员周期短，仅需要1小时至数小时便可高效收集供者骨髓间充质干细胞，第二，与传统方法相比，该方法无副作用，供者无骨骼疼痛、脾脏肿大等不良反应。
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公开(公告)号：CN110468097B
公开(公告)日：2023-03-24
申请号：CN201910722207.2
申请日：2019-08-06
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/077
摘要： 本发明涉及间充质干细胞技术领域，具体涉及一种高效促进间充质干细胞成软骨分化的诱导体系及方法，诱导体系包括第一诱导培养基和第二诱导培养基，所述第一诱导培养基包括生长培养基和KGN，所述第一诱导培养基中KGN的浓度为0.5‑3μmol/L，所述第二诱导培养基包括软骨诱导分化培养基和添加剂，所述添加剂包括KGN，所述第二诱导培养基中KGN的浓度为10‑500nmol/L。本发明间充质干细胞先通过KGN预处理，然后以低浓度KGN诱导体系对细胞进行诱导，间充质干细胞能够向软骨细胞高效分化，仅需要8天即可看到较好的软骨细胞形成，培养时间短，成本低，见效显著。
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公开(公告)号：CN113699185A
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN202110857489.4
申请日：2021-07-28
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N15/867 , C12N5/10 , A61K39/00 , A61P35/00
摘要： 本发明公开了一种通用型CAR‑T细胞的制备方法，包括如下步骤：采集供者的外周血，分离CD3阳性的T淋巴细胞；对CD3阳性的T淋巴细胞进行激活；将携带通用型嵌合抗原受体(CAR)基因序列的慢病毒转染活化的人T淋巴细胞。本发明通过对通用型CAR‑T细胞制备工艺中的关键步骤和关键条件进行优化，有效提高了CAR‑T细胞的CAR表达率；进一步通过设计特异靶向TRAC和B2M基因编码区的sgRNA对TRAC和B2M基因进行了高效敲除；再进一步配合TRAC和B2M阴性细胞的筛选，有效的防止通用型CAR‑T细胞被患者自身的非靶向细胞和淋巴细胞杀伤，增强了CAR‑T细胞的应用效率。
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公开(公告)号：CN108101994B
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201810008842.X
申请日：2018-01-04
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C07K16/28 , C12N15/13 , C12N15/867 , A61K39/395 , A61P35/00
摘要： 本发明涉及一种抗CD19抗体及其应用。本发明的抗CD19抗体或其抗原结合部分，其重链序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5所示，轻链的序列分别如SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8所示，或者其重链和轻链与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一性大于70％、80％、85％、90％或97％；同时基于该抗CD19抗体或其抗原结合部分，本发明提供其作为核酸分子、载体、宿主细胞、偶联物、组合物以及在用于制备预防或治疗肿瘤的药物中的用途。
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公开(公告)号：CN110499286A
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201910815866.0
申请日：2019-08-30
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/0775
摘要： 本发明涉及涉及脂肪间充质干细胞技术领域，具体涉及一种快速从脂肪组织获取间充质干细胞的方法，包括如下步骤：(1)预处理；(2)酶消化；(3)重悬离心；(4)培养；(5)挑选克隆。本发明创造性的使用挑选克隆的方法，将在脂肪组织培养过程中出现的血管基质部分尽可能的使用克隆环挑选出来后培养。此方法可以在较短的时间内获得较多的靠前代次脂肪源间充质干细胞量，有效缩短脂肪源间充质干细胞纯化的时间，避免了多次传代纯化造成的资源浪费。
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公开(公告)号：CN110468097A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201910722207.2
申请日：2019-08-06
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/077
摘要： 本发明涉及间充质干细胞技术领域，具体涉及一种高效促进间充质干细胞成软骨分化的诱导体系及方法，诱导体系包括第一诱导培养基和第二诱导培养基，所述第一诱导培养基包括生长培养基和KGN，所述第一诱导培养基中KGN的浓度为0.5-3μmol/L，所述第二诱导培养基包括软骨诱导分化培养基和添加剂，所述添加剂包括KGN，所述第二诱导培养基中KGN的浓度为10-500nmol/L。本发明间充质干细胞先通过KGN预处理，然后以低浓度KGN诱导体系对细胞进行诱导，间充质干细胞能够向软骨细胞高效分化，仅需要8天即可看到较好的软骨细胞形成，培养时间短，成本低，见效显著。
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公开(公告)号：CN110305849A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910708741.8
申请日：2019-08-01
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种稳定表达CAR的T细胞及其制备方法与应用。所述稳定表达CAR的T细胞制备方法包括：将靶向癌细胞表面抗原的CAR基因通过非病毒质粒导入T细胞中使CAR稳定表达3周以上，且外源基因不整合到T细胞染色体上。本发明首次提供一种非整合的通过非病毒质粒稳定表达CAR的T细胞及其制备方法，将这一特殊质粒通过电转的方法导入T细胞后，可以使之稳定表达3周以上。本发明可有效规避慢病毒和逆转录病毒对T细胞的基因组修饰所产生的不利效应，且可以规避在T细胞内引入任何慢病毒或逆转录病毒元件。
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公开(公告)号：CN108101994A
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201810008842.X
申请日：2018-01-04
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C07K16/28 , C12N15/13 , C12N15/867 , A61K39/395 , A61P35/00
摘要： 本发明涉及一种抗CD19抗体及其应用。本发明的抗CD19抗体或其抗原结合部分，其重链序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5所示，轻链的序列分别如SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8所示，或者其重链和轻链与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一性大于70％、80％、85％、90％或97％；同时基于该抗CD19抗体或其抗原结合部分，本发明提供其作为核酸分子、载体、宿主细胞、偶联物、组合物以及在用于制备预防或治疗肿瘤的药物中的用途。
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公开(公告)号：CN107557342A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201711066339.1
申请日：2017-11-02
申请人： 广东万海细胞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/867 , A61K35/17 , A61P37/00
摘要： 本发明公开了一种用于治疗自身免疫系统疾病的CAR-Treg细胞制备方法，主要包括以下步骤：1.从患者外周血内分离出PBMC细胞；2.通过免疫磁珠分离出CD4+CD25+Treg细胞；3.通过CD3/28磁珠活化Treg细胞；4.将活化的Treg细胞在体外用慢病毒进行转导；5.将扩增后的CAR-Treg细胞用PBS清洗后静脉回输治疗自身免疫系统疾病。本方法通过靶向B细胞表面标志物，特异性激活Treg细胞，通过Treg细胞对B细胞的抑制作用，调节B细胞的功能，达到治疗或减轻自身免疫性疾病的目的。
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