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公开(公告)号:CN114525352A
公开(公告)日:2022-05-24
申请号:CN202210293418.0
申请日:2022-03-24
申请人: 郑州轻工业大学
IPC分类号: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12N15/11 , G01N33/543 , G01N33/52 , G01N33/58 , G01N33/68 , C12R1/01 , C12R1/42 , C12R1/19 , C12R1/445 , C12R1/63 , C12R1/385
摘要: 本发明公开了一种多重PCR与胶体金试纸条联合高通量检测致病菌的方法:根据三种不同致病菌的特异性基因片段分别设计一对上、下游引物,且上游引物5'端修饰巯基,下游引物5'端分别修饰生物素、荧光素和地高辛;将三种致病菌样品用PBS洗涤并重悬于PBS中,煮沸8‑15min后冷却至室温,离心,分别取上清DNA并进行多重PCR扩增,获得PCR产物;PCR产物与胶体金结合,封闭后滴加至试纸条上,肉眼观察结果。本发明利用PCR扩增技术来提高检测食源性致病菌的灵敏度,具有高通量检测、灵敏度高、特异性强、耗时短等优点,适用于致病菌的检测。