一种培育不结球白菜小孢子植株的方法

    公开(公告)号:CN110547193A

    公开(公告)日:2019-12-10

    申请号:CN201910865660.9

    申请日:2019-09-12

    Abstract: 本发明公开了一种培育不结球白菜小孢子植株的方法。该方法包括如下步骤:(1)花蕾的选取;(2)培育小孢子胚胎:将花蕾消毒,清洗,1/2NLN-13培养基润洗;将润洗后的花蕾加入1/2NLN-13培养基,充分研磨,过滤,离心,黄绿色沉淀用NLN-13培养基稀释,用甲基磺酸乙酯处理后分装到培养皿中,向培养皿中加入活性炭,使其浓度为1mg/mL,热激处理,然后暗培养14天形成胚状体;(3)成熟胚萌发成植株:将胚状体振荡培养,将其中转绿的成熟胚转移到改良固体1/2MS培养基中培育40d,直接进行炼苗移栽。本发明所述方法在能够保证出胚率的情况下,简化操作步骤,大大减少了操作时间,提高了植株生产效率。

    一种与光周期敏感的白菜类作物开花时间紧密连锁的InDel分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN108504769A

    公开(公告)日:2018-09-07

    申请号:CN201810592942.1

    申请日:2018-06-08

    Abstract: 本发明选用早开花的油用型品种‘YS-143’与晚开花的芜菁品种‘VT-044’为试材,分别观察其在长日照和短日照两个条件下的开花时间。同时以两个材料为模板克隆这个基因的cDNA序列,并利用生物信息学技术对其氨基酸序列进行分析,发现早花型和晚花型白菜类作物CCA1基因上的差异位点,并通过生物信息学、测序比对等分析得到了初步确认,开发出一个InDel标记。所述InDel分子标记的核苷酸序列为ACCCTT,位于早花型白菜类作物CCA1基因的第六个外显子上,但不存在于晚花型白菜类作物CCA1基因编码区。最后通过验证,将其作为功能标记进行分子辅助育种工作。本发明的分子标记可简便、快速、高通量地应用于育种实践。

    一种TYMV病毒诱导的十字花科内源基因沉默方法及其应用

    公开(公告)号:CN107557383A

    公开(公告)日:2018-01-09

    申请号:CN201710789234.2

    申请日:2017-09-05

    Abstract: 本发明公开了一种TYMV病毒诱导的十字花科内源基因沉默方法及其应用,以目标基因cDNA为模板进行PCR扩增,纯化连接载体,转化大肠杆菌,阳性克隆测序得到目的编码区全长CDS序列;根据测序后的结果选择序列为(T/A/G/C)TGA或(T/A/C)TAG或(T/A/C)TAA向后选择40bp序列;3’端加上其反向互补序列,两端再加入和线性化载体两端对应的同源序列长度为15bp的序列,合成双链DNA片段并与载体pTY-s融合连接,融合连接产物转化大肠杆菌,培养提取质粒,选择幼苗第一片真叶长出时,基因枪轰击,快速转入栽培土中培养。本发明载体构建容易,转染效率高,基因沉默效果明显,性状持久。

    一种快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料的方法

    公开(公告)号:CN118147221A

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202410402075.6

    申请日:2024-04-03

    Abstract: 本发明公开了一种快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料的方法,所述方法根据不结球白菜GGP基因的uORF序列设计sgRNA,构建CRISPR/Cas9基因编辑载体,使用根癌农杆菌侵染带柄子叶和下胚轴的方法转化不结球白菜单倍体诱导系,然后将含有基因编辑元件的单倍体诱导系与野生型不结球白菜育种材料杂交,后代经过表型和流式细胞仪鉴定和筛选得到不含基因编辑元件的不结球白菜双单倍体,然后对得到双单倍体进行基因编辑位点鉴定和Vc含量测定,快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料。采用本发明的方法可以快速获得纯合的突变体双单倍体材料,提高不结球白菜维生素C的含量,为白菜品质生物育种打下基础。

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