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公开(公告)号：CN113564201B
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202110886126.3
申请日：2021-08-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种十字花科作物花粉电击遗传转化方法，以不结球白菜的成熟花粉细胞作为受体材料，把质粒DNA在电场的作用下，导入花粉中，结合常规的人工授粉，得到转基因种子。通过对电转染花粉的培养观察，以及获得的后代植株进行转基因检测，证明电击转化法可以成功的在不结球白菜上应用。本发明首次在不结球白菜上应用电击转化技术作为基因编辑的方法，与目前农杆菌转化，基因枪法等转基因方法相比，操作相对简洁，成本较低，可以进一步研究建立遗传转化体系，为不结球白菜的遗传育种提供更好的工具。
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公开(公告)号：CN115725777A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202211540771.0
申请日：2022-12-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种苗期鉴定不结球白菜花瓣花色的方法。该方法以不结球白菜品种DNA作为模板，采用引物组wF35通过聚合酶链反应（PCR）扩增该片段，根据电泳后目的条带的大小，可在抽薹开花前初步推断不结球白菜品种花瓣颜色，筛选相应花色品种。本发明提供的方法，可以快速检测不结球白菜品种花色，实现对花色的早期精准预测，极大的节约时间和资源，大大提高选择效率，从而加快育种进程，在生产实践中也具有重要作用。
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公开(公告)号：CN110590729B
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN201910904189.X
申请日：2019-09-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D311/62 , A61K47/42 , A61K31/352
Abstract: 本发明属于提高白菜花色苷热稳定性领域，涉及一种采用核桃肽提高白菜花色苷热稳定性的方法。包括以下步骤：选择生长状况良好的白菜，洗净备用；选取酸化的乙醇作为提取剂，将提取液和白菜在超声条件下提取花色苷，获得提取液；提取液离心来，分离上清液得到花色苷的粗提取液；浓缩来，得到花色苷粗提取浓缩液；将花色苷粗提取浓缩液中浸泡2.5‑4小时，后再用蒸馏水冲洗大孔树脂，再用解吸液解吸大孔树脂，收集解吸液并浓缩，得到纯化的花色苷溶液；花色苷溶液中加入核桃肽溶液并加热来。本发明通过低浓度的核桃肽的作用来保存花色苷，并且能够较为显著的提高花色苷在一定温度的保存率，这对未来花色苷的保存和开发利用具有积极的作用。
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公开(公告)号：CN108504769B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201810592942.1
申请日：2018-06-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明选用早开花的油用型品种‘YS‑143’与晚开花的芜菁品种‘VT‑044’为试材，分别观察其在长日照和短日照两个条件下的开花时间。同时以两个材料为模板克隆这个基因的cDNA序列，并利用生物信息学技术对其氨基酸序列进行分析，发现早花型和晚花型白菜类作物CCA1基因上的差异位点，并通过生物信息学、测序比对等分析得到了初步确认，开发出一个InDel标记。所述InDel分子标记的核苷酸序列为ACCCTT，位于早花型白菜类作物CCA1基因的第六个外显子上，但不存在于晚花型白菜类作物CCA1基因编码区。最后通过验证，将其作为功能标记进行分子辅助育种工作。本发明的分子标记可简便、快速、高通量地应用于育种实践。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109652455A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
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公开(公告)号：CN118272428A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410562568.6
申请日：2024-05-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的芸薹属作物高效遗传转化和基因编辑方法。本发明通过发根农杆菌介导ZmWUS2、AtIPT和AtPLT5三个生长发育调控因子实现芸薹属作物的遗传转化和基因编辑体系的建立，通过发根农杆菌介导ZmWUS2、AtIPT和AtPLT5三个生长发育调控因子诱导外植体形成愈伤，直接形成芽，解决了芸薹属作物根再生困难的问题，使得根再生能力差的物种实现了高效转化。
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公开(公告)号：CN116286946A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310103908.4
申请日：2023-02-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种无外源DNA的植物基因编辑方法，通过采用含有移动TLS(tRNA like sequence)基因编辑元件的发根农杆菌侵染植物的营养体，之后进行培养至营养体萌发出转基因毛状根，含有移动TLS基因编辑元件所转录的RNA在移动TLS的带动下从根部移动到营养体新生长的器官以编辑植物基因组。与现有方法相比，本发明的方法无需组培、嫁接和根诱导芽，不受基因型和物种限制的，操作简单，可应用到所有具有茎并能诱导毛状根的草本和木本植物，可以极大地促进CRISPR/Cas9、Cpf1等基因编辑技术在基因功能验证和基因工程育种的应用。
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公开(公告)号：CN115976255A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202211275100.6
申请日：2022-10-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种在苗期鉴定不结球白菜抽薹时间的方法，属于分子生物学技术领域。该方法以不结球白菜的基因组DNA为模板，采用引物组6943bp‑insert‑2F/2R通过聚合酶链式反应扩增该片段，根据目标条带的大小，即可快速鉴定不结球白菜早抽薹材料和品种。本发明提供的鉴定方法，可以在不结球白菜发育早期检测早抽薹的材料和品种，提高检测效率的同时节省了大量人力物力，进一步加快了不结球白菜的育种进程。
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公开(公告)号：CN108504769A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810592942.1
申请日：2018-06-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明选用早开花的油用型品种‘YS-143’与晚开花的芜菁品种‘VT-044’为试材，分别观察其在长日照和短日照两个条件下的开花时间。同时以两个材料为模板克隆这个基因的cDNA序列，并利用生物信息学技术对其氨基酸序列进行分析，发现早花型和晚花型白菜类作物CCA1基因上的差异位点，并通过生物信息学、测序比对等分析得到了初步确认，开发出一个InDel标记。所述InDel分子标记的核苷酸序列为ACCCTT，位于早花型白菜类作物CCA1基因的第六个外显子上，但不存在于晚花型白菜类作物CCA1基因编码区。最后通过验证，将其作为功能标记进行分子辅助育种工作。本发明的分子标记可简便、快速、高通量地应用于育种实践。
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