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公开(公告)号：CN113444654B
公开(公告)日：2022-12-23
申请号：CN202110708305.8
申请日：2019-11-06
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及微生物技术领域，公开了一种生产二氢青蒿酸的酿酒酵母工程菌。本发明所述工程菌在通过二氢青蒿酸酿酒酵母异源合成途径改造的酿酒酵母基础上，使其原有表达ALDH1的序列为表达突变的ALDH1H194R或ALDH1V247F的序列。本发明对路径的关键基因ALDH1进行定点突变以获得选择性更好的基因，使代谢路径更偏好二氢青蒿酸的合成，降低青蒿酸所占比例。两个突变体ALDH1H194R和ALDH1V247F在本发明中证明可提高二氢青蒿酸/青蒿酸的比例。在此基础上，将DBR2和ADH1融合表达，同时将突变ALDH1与DBR2融合表达可进一步提高二氢青蒿酸/青蒿酸比例且不牺牲二氢青蒿酸的产量。
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公开(公告)号：CN113201463B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN202110516129.8
申请日：2021-05-12
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及微生物技术领域，公开了一种快速筛选藏红花酸高产菌株的方法及其构建方法。本发明所述方法将待筛选菌株采用两相发酵法发酵培养，其中发酵培养基的体积不高于有机相的体积；发酵完成后，测定有机相吸光度，吸光度越高则表示藏红花酸产量越高，通过吸光度高低快速筛选出藏红花酸高产菌株。本发明发现了优化两相发酵中有机相的比例，从而可以使得菌株细胞内的藏红花酸完全排到胞外有机相中，而前体类胡萝卜素底物无外排，从而可通过有机相的吸光度变化判断菌株藏红花酸产量的变化，而不必使用复杂的HPLC法，能够实现快速简便的筛选高产藏红花酸菌株。
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公开(公告)号：CN112553097B
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202011352643.4
申请日：2020-11-26
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及酿酵母菌株构建及发酵技术领域，特别涉及一种高产香茅醇的酵母基因工程菌株及其构建方法和发酵方法。该酵母基因工程菌株的改造包括：转入CrIS、NmIS2、OeIS、OYE2、OYE3基因中的一种或几种；将酵母底盘菌株的ERG20突变为ERG20F96W；在表达异构酶IDI1、还原酶CrIS和融合蛋白GE的同时，引入由SH3、PDZ、GBD组成的蛋白支架，组装成蛋白复合体。本发明的重组酿酒酵母菌株相对于现有技术更为环保、成本低廉，为香茅醇的生产提供了一种绿色高效的方法。
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公开(公告)号：CN111849932A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010597043.8
申请日：2020-06-28
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及生物合成领域，特别涉及八氢番茄红素脱氢酶突变体及其应用。本发明基于前期通过易错PCR筛选到的BtCrtI突变体菌株，对所包含的突变位点进行单点和多点重组验证，确定影响BtCrtI催化特异性的关键位点；对筛选得到的BtCrtI关键位点进行饱和突变，来增加BtCrtI突变体功能的多样性；通过对BtCrtI单点饱和突变结果进行主成分分析(PCA)和K均值聚类分析，对单点突变体归类，并将不同类别的代表性的单点突变进行组合，进一步分析BtCrtI催化功能的多样性。
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公开(公告)号：CN109810958A
公开(公告)日：2019-05-28
申请号：CN201910243448.9
申请日：2019-03-28
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种藏红花来源的CCD2突变体及其编码序列和应用以及生产藏红花酸的重组酵母菌株。本发明所述CCD2突变体具有V120F、Y190K/A、R192V/F、E211A、E212A、T290V、K320A和S323F/A/T位点突变中的一种或两种以上。本发明针对藏红花酸合成路径中的限速酶CCD2进行改造，通过拓宽CCD2的底物谱，实现从β-胡萝卜素直接合成藏红花酸，对现有的藏红花酸合成路径精简重构，从而解决多步反应总产率普遍低的问题；同时提高CCD2催化原底物玉米黄质合成藏红花酸的效率，进而获得一株高产藏红花酸的酵母菌株。
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公开(公告)号：CN107034150A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201710239939.7
申请日：2017-04-13
申请人： 天津大学
CPC分类号： C12N9/0081 , C07K14/39 , C07K14/47 , C12N9/0095 , C12N15/815 , C12N2800/22 , C12P33/00 , C12Y114/15006 , C12Y118/01002
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种重组耶氏解脂酵母菌株及其构建方法和应用。本发明在耶氏解脂酵母菌株中以葡萄糖为碳源实现甾体药物重要中间体孕烯醇酮的生物全合成，在重组耶氏解脂酵母菌株中，野猪来源mCYP11A1与牛来源的mAdR和mAdX的组合具有最佳的生产孕烯醇酮的效果。利用本发明所述重组耶氏解脂酵母菌株生产孕烯醇酮相对于生物转化方法生产孕烯醇酮步骤简单且污染小，同时解决了酿酒酵母中生物全合成孕烯醇酮对后续甾体药物生产的瓶颈问题，为孕烯醇酮的工业生产提供了一种可行的办法，并为下游孕酮、雄烯二酮、糖皮质激素等甾体激素类药物的合成打下基础。
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公开(公告)号：CN106893684A
公开(公告)日：2017-06-27
申请号：CN201710090086.5
申请日：2017-02-20
申请人： 天津大学
CPC分类号： C12N9/0008 , C12P5/026 , C12Y102/0101
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种重组酵母菌株及其应用。本发明所述重组酵母菌株为发酵生产番茄红素的酵母菌株，并且其ALD6启动子表达强度被下调。本发明通过对酵母菌株ALD6启动子的深入研究，发现通过全部敲除或以低表达强度启动子替换等下调ALD6启动子表达强度的方式构建生产番茄红素的重组菌株，能够显著该生产菌株的番茄红素产量，可作为今后酵母工程菌合成路径的优化手段，构建出产能更加优异的重组工程菌。
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公开(公告)号：CN118931938A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202411034494.5
申请日：2024-07-30
申请人： 天津大学合成生物前沿研究院
摘要： 本发明涉及生物工程领域，尤其涉及基因组、表达模块、重组菌株及其应用。本发明提供了敲除sch9基因在生产和/或制备麦角酸中的应用。本发明拟从优化底盘的角度出发，寻找麦角酸合成的瓶颈点，以期通过识别并消除瓶颈点来提高麦角酸的产量。
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公开(公告)号：CN118726122A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410732378.4
申请日：2024-06-06
申请人： 天津大学合成生物前沿研究院
摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及提高类胡萝卜素产量的方法。本发明在一株可以异源合成类胡萝卜素(番茄红素，胡萝卜素，玉米黄质)的重组酿酒酵母中，通过延长酵母细胞周期G1期以提高总蛋白含量和扩大酿酒酵母体积，提供一株高产类胡萝卜素的重组酿酒酵母菌株。本发明确定了延长酵母细胞周期G1期可以同时提高胞内蛋白总量和扩大酵母体积，利于类胡萝卜素物质的高效生产，同时过表达内质网蛋白表达伴侣进一步提高类胡萝卜产量。
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公开(公告)号：CN118480565A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410668193.1
申请日：2024-05-27
申请人： 天津大学合成生物前沿研究院
摘要： 本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及组合元件、表达盒、重组菌及其应用。本发明所述重组菌的构建方法包括：(1)以模式菌CEN.PK2‑1D为出发菌株，将SaGGPPS、BTS1‑ERG20、tHMG分别整合至ypl062w位点、ypl064w位点上，下调Erg9的表达水平、敲除ROX1获得高产GGOH的底盘菌株；(2)在高产GGOH的底盘菌株的基础上，在重塑MVA途径中，选择以甲羟戊酸和IPP为分界点，分别通过将内质网定位信号肽HDEL添加在途径酶C端融合将其重定位于内质网，然后将融合后的基因表达载体转染入酿酒酵母中验证其对GGPP合成的效果。
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