一种用于牛结核病诊断的真核表达CFP10-ESAT-6融合蛋白

    公开(公告)号:CN103204945A

    公开(公告)日:2013-07-17

    申请号:CN201310161803.0

    申请日:2013-05-03

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种用于牛结核病诊断的真核表达CFP10-ESAT-6融合蛋白,并将其应用于牛结核病的临床诊断。通过PCR扩增获得cfp10-esat6融合基因,构建重组质粒pPICZαA-(cfp10-esat6),转入毕赤酵母菌GS115,经甲醇诱导和亲和层析获得高纯度的CFP10-ESAT-6融合蛋白。将其作为刺激原用于牛结核病诊断的皮内变态反应和抗原特异的牛IFN-γ试验,前者与比较变态反应结果相比具有47.4%敏感性和83.3%特异性,后者与牛IFN-γ试剂盒的阳性和阴性符合率分别为82.8%和87.4%,显示其较好的牛结核病诊断价值。

    一种利用表面等离子体共振技术检测沙门菌的方法

    公开(公告)号:CN116990263A

    公开(公告)日:2023-11-03

    申请号:CN202310895215.3

    申请日:2023-07-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种利用表面等离子体共振技术检测沙门菌,包括如下步骤:(1)芯片的制备,所述的芯片为CM5芯片;(2)细菌培养,所述的细菌为肠炎沙门菌C50041;(3)细菌与抗体孵育,所述的抗体为沙门菌PagN(3B3)蛋白抗体;(4)游离抗体分离;(5)表面等离子体共振技术检测。相对于现有技术,本发明具有如下有益效果:本发明可以半定量检测样品中的沙门菌;将单克隆抗体作为检测靶标,本发明具有优良特异性;将表面等离子体共振技术应用于沙门菌检测,可以缩短检测时间;对再生条件进行了优化,可以确保检测的重复性。

    一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法

    公开(公告)号:CN110196219B

    公开(公告)日:2022-06-03

    申请号:CN201910405117.0

    申请日:2019-05-16

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法,包括如下步骤:(1)细菌培养,所述的细菌为鸡白痢沙门菌S06004和S06004ΔspiC;(2)鸡的免疫及采样;(3)靶细胞—巨噬细胞的制备;(4)效应细胞—鸡脾脏CD8+T细胞的制备:包括鸡脾脏淋巴细胞悬液的制备步骤和磁珠分选鸡脾脏CD8+T细胞的步骤;(5)CTL特异性杀伤巨噬细胞。相对于现有技术,本发明具有如下有益效果:本发明贴壁获得的巨噬细胞(靶细胞)纯度较高,且鸡脾脏CD8+T细胞分选效果明显,分离时间短;以沙门菌宿主细胞—巨噬细胞作为靶细胞,可更精确反映宿主对沙门菌的清除能力;将流式细胞术用于鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用,可在单细胞水平检测鸡脾脏CD8+T细胞的CTL效应。

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