转基因玉米BT11品系的环介导等温扩增引物、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN102827939A

    公开(公告)日:2012-12-19

    申请号:CN201210330429.8

    申请日:2012-09-07

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明公开一种转基因玉米BT11品系的环介导等温扩增引物、试剂盒及其应用,所述的LAMP检测所用的引物,其碱基序列如SEQIDNO:2~7;采用LAMP检测技术,结合浊度法或显色法,建立了适用于食品中转基因玉米BT11品系特异性检测标准方法,本发明所述方法操作简单,不依赖昂贵仪器,检测时间在1小时左右,方法灵敏度达到0.5%,检测效率达到传统PCR方法或荧光定量PCR方法,能够应用于检验检疫实际工作,尤其适用于大量样品快速初筛和各种基层实验室食品品质监控,适合作为行业推荐性标准应用推广。

    PCR-焦磷酸法检测副溶血弧菌的检测引物、试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN102808024A

    公开(公告)日:2012-12-05

    申请号:CN201210272737.X

    申请日:2012-08-01

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11 C12R1/63

    摘要: 本发明公开了一种PCR-焦磷酸法检测副溶血弧菌的检测引物、试剂盒和检测方法。本发明根据副溶血弧菌toxR基因(GenBank:NC_004603.1)序列中的保守区域,用PyroMark Assay Design软件设计PCR引物和测序引物,建立了PCR-焦磷酸测序,从DNA碱基序列水平上检测副溶血弧菌的方法。本发明先对目标片段进行PCR扩增,保证扩增片段的特异性,再用扩增产物制备单链模板,在测序引物的引导下进行焦磷酸测序。检测的所得碱基序列,用NCBI网站的BLAST功能反复比对时发现,toxR基因测序引物后的碱基序列具有良好的特异性,测序引物后34bp连续DNA序列为:CCAAGGATTCACAGCAGAAGCCACAGGTGCTTTT的就可鉴定含有VP。

    食品中四种致敏原麸质成分实时荧光PCR检测引物和探针、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN101724707B

    公开(公告)日:2012-08-22

    申请号:CN201010100428.5

    申请日:2010-01-21

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11 G01N21/64

    摘要: 本发明涉及食品中四种致敏原麸质成分实时荧光PCR检测引物和探针、试剂盒及检测方法。该引物和探针分别是序列为SEQ ID NO.1~3的大麦Hordein基因的检测引物和探针、序列为SEQ ID NO.4~6的小麦Gliadin基因的检测引物和探针、序列为SEQ ID NO.7~9的黑麦Sec1基因的检测引物和探针和序列为SEQ ID NO.10~12的燕麦Avenin基因的检测引物和探针。基于此,本发明公开了包含上述引物和探针序列的食品致敏原麸质成分实时荧光PCR检测试剂盒及相应的检测方法。本发明的探针和引物特异性强,检测试剂盒及方法简便易用,结果准确,具有很高的特异性和灵敏度。

    染禽流感病鸡及其产品的堆肥处理方法

    公开(公告)号:CN102391029A

    公开(公告)日:2012-03-28

    申请号:CN201110224392.6

    申请日:2011-08-05

    申请人: 曹际娟 王金玲

    发明人: 曹际娟 王金玲

    IPC分类号: C05F17/00

    CPC分类号: Y02W30/43

    摘要: 一种染禽流感病鸡及其产品的堆肥处理方法,是将待处理样品埋入基础堆料中,堆肥发酵12天以上,发酵过程中堆体温度55~60℃持续至少7天,湿度60~70%,pH8.7±0.2。本发明所提供的技术方案利用堆肥过程中产生的高温杀死病原菌、杂草种子、虫卵等。此外,堆体中的土壤微生物可以降解纤维素、木质素等植物的重要组成部分,转化后的产物可以作为肥料,不仅保护环境,提高土壤肥力,增加土壤持水能力,还可以减少有机材料的体积、气味和病原菌,实现了资源的循环利用。并且本发明的方法成本低廉、设备简单、易于操作。

    小麦矮腥黑穗病菌冬孢子的堆肥无害化处理方法

    公开(公告)号:CN102358707A

    公开(公告)日:2012-02-22

    申请号:CN201110224396.4

    申请日:2011-08-05

    申请人: 曹际娟

    发明人: 曹际娟

    IPC分类号: C05F11/08 C05F17/00

    CPC分类号: Y02W30/43

    摘要: 一种小麦矮腥黑穗病菌冬孢子的堆肥无害化处理方法,是将待处理原料堆肥处理6天以上,其中原料含水量60~70wt%,C/N为30~40,堆体内部温度50~60℃。本发明所提供的技术方案利用堆肥过程中产生的高温杀死病原菌、杂草种子、虫卵等。此外,堆体中的土壤微生物可以降解纤维素、木质素等植物的重要组成部分,转化后的产物可以作为肥料,不仅保护环境,提高土壤肥力,增加土壤持水能力,还可以减少有机材料的体积、气味和病原菌,实现了资源的循环利用。

    转基因小麦B73-6-1的检测方法

    公开(公告)号:CN102344965A

    公开(公告)日:2012-02-08

    申请号:CN201110321471.9

    申请日:2011-10-20

    申请人: 曹际娟 徐君怡

    发明人: 曹际娟 徐君怡

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 一种转基因小麦B73-6-1的检测方法,是通过PCR的方法检测序列为SEQ IDNO:12的基因组件,该基因组件中包括序列为SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16的边缘序列。采用本发明的方法可以快速、灵敏地实现对转基因小麦B73-6-1的品系鉴定,该方法特异性强,灵敏度高,快速准确。

    MALDI-TOFMS辅助鉴定霍乱弧菌的方法

    公开(公告)号:CN102253110A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110154469.7

    申请日:2011-06-09

    申请人: 曹际娟

    发明人: 曹际娟

    IPC分类号: G01N27/64 G01N1/28

    摘要: MALDI-TOF MS辅助鉴定霍乱弧菌的方法,包括如下步骤:①选取40~45株霍乱弧菌新鲜培养物,进行样品预处理;②采集所有菌株样品的图谱;③使用BioTyper软件对所得的图谱进行分析统一化得霍乱弧菌标准图谱;④使用同步骤①的方法制备待检测微生物的样品;⑤按照步骤②的方法采集待检测样品的MALDI-TOF-MS图谱;⑥将步骤⑤所得的待检测样品的MALDI-TOF-MS图谱与步骤③所得的霍乱弧菌标准图谱对比,根据匹配分数判定检测结果。本发明成功创建了霍乱弧菌鉴定质谱图数据库及标准图谱,可以实现对霍乱弧菌简便、可微量化、高度自动化的准确鉴定。

    饲料中沙门氏菌和志贺氏菌检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101624624B

    公开(公告)日:2011-11-16

    申请号:CN200910010791.5

    申请日:2009-03-20

    申请人: 曹际娟

    发明人: 曹际娟

    摘要: 饲料中沙门氏菌和志贺氏菌检测试剂盒及其检测方法,该试剂盒中包括一种检测溶液,该检测溶液中含10mM Tris·Cl、50mM KCl、25mM MgCl2、dNTP各2.5mM、Taq DNA聚合酶5U/μL及沙门氏菌和志贺氏菌引物对各10μM;使用本发明的检测试剂盒及检测方法,可以高灵敏度地检测饲料中沙门氏菌和志贺氏菌,并且检侧耗时短,操作简捷,可以节省大量的劳力和财力,适合快速检测的要求。

    虎源性、豹源性DNA的PCR检测引物、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN101845508A

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN201010202970.1

    申请日:2010-06-12

    申请人: 徐君怡 曹际娟

    发明人: 徐君怡 曹际娟

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 虎源性、豹源性DNA的PCR检测引物、试剂盒及检测方法,本发明建立了普通PCR检测对虎源性、豹源性DNA的检测引物、试剂盒以及检测方法。引物序列为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2;基于此,本发明公开了包含上述引物的虎源性、豹源性DNA的普通PCR检测试剂盒及相应检测方法。本发明的引物特异性强,检测试剂盒及方法简便易用,结果准确,具有很高的特异性和灵敏度。