转基因玉米BT11品系的环介导等温扩增引物、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN102827939A

    公开(公告)日:2012-12-19

    申请号:CN201210330429.8

    申请日:2012-09-07

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明公开一种转基因玉米BT11品系的环介导等温扩增引物、试剂盒及其应用,所述的LAMP检测所用的引物,其碱基序列如SEQIDNO:2~7;采用LAMP检测技术,结合浊度法或显色法,建立了适用于食品中转基因玉米BT11品系特异性检测标准方法,本发明所述方法操作简单,不依赖昂贵仪器,检测时间在1小时左右,方法灵敏度达到0.5%,检测效率达到传统PCR方法或荧光定量PCR方法,能够应用于检验检疫实际工作,尤其适用于大量样品快速初筛和各种基层实验室食品品质监控,适合作为行业推荐性标准应用推广。

    旋毛虫PCR-DHPLC检测引物、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN103255226A

    公开(公告)日:2013-08-21

    申请号:CN201310202665.6

    申请日:2013-05-27

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种旋毛虫PCR-DHPLC检测引物、试剂盒及检测方法。首先针对旋毛虫的基因序列,设计了检测用引物即SEQ ID NO.1~2,采用PCR-DHPLC法对测动物源性食品中旋毛虫的定性检测。本发明所述试剂盒包括浓度为5U/μL的Taq DNA聚合酶和PCR反应液、dNTP各2.5mM及SEQ ID NO.1~2各10μM。本发明所述方法可检至1个旋毛虫虫体样品的精度。并且检测耗时短,操作简捷,可以节省大量的人力物力,适合快速检测的要求。

    同步检测10种转基因玉米品系的试剂盒、及其使用方法

    公开(公告)号:CN102719533A

    公开(公告)日:2012-10-10

    申请号:CN201210172121.5

    申请日:2012-05-30

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开一种实时荧光RCA技术同步检测10种转基因玉米品系的试剂盒、及其使用方法,属于转基因食品检测技术领域,其通过锁式探针RCA技术与实时荧光PCR技术相结合,建立了实时荧光PCR-锁式通用探针滚环扩增(RCA),针对10种转基因玉米品系分别设计锁式探针SEQ ID NO:1~10,通过滚环扩增技术与待检测样品中的靶标序列互补结合,在连接酶作用下使探针环化;进一步通过滚环扩增的通用引物区,实现环状锁式探针的级联扩增;本发明试剂盒具有高通量、特异性、准确性、高灵敏等特点,锁式探针独特的设计,满足了专化性检测的需要,而且可以结合多种扩增方式及检测标记物,适应多种检测平台,填补了国内外空白。

    单核细胞增生李斯特氏菌核酸标准样品、其建立方法及应用

    公开(公告)号:CN102676506A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201210172208.2

    申请日:2012-05-30

    IPC分类号: C12N15/10 C12Q1/68 C12R1/01

    摘要: 本发明公开一种单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)核酸标准样品、其建立方法及应用,其通过菌株培养、鉴定、核酸标准样品的制备、核酸标准样品的干燥、均匀性和稳定性检查、定性检定、核酸标准样品定值等项工作,获得一种单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)核酸标准样品。本发明解决了国内食品中致病菌核酸标准样品紧缺的状况,对解决食品中致病菌核酸标准样品的制备技术和稳定性保证技术,积极开展我国食品中致病菌分子生物学检测标准样品的研制,添补该测量领域的空白,具有很重要的现实意义,并对开展食品中致病菌分子生物学检测工作,食品致病菌核酸标准样品具有广阔的市场,有较大的经济效益和社会效益。

    转基因玉米标准样品、其建立方法及应用

    公开(公告)号:CN102719534B

    公开(公告)日:2013-10-30

    申请号:CN201210172122.X

    申请日:2012-05-30

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开一种转基因玉米MIR162的标准样品制备、其建立方法及其在检测转基因玉米MIR162中的应用,分别以转基因玉米MIR162或非转基因玉米为原料,将原料研磨、过筛、加水,搅拌、静置、将沉淀物制备成冻干粉;再将二者以科学的比例混合,并重复“加水,搅拌、静置、将沉淀物制备成冻干粉”的过程,分装,0℃~4℃贮存;通过上述方法获得转基因玉米MIR162的标准样品,也可以应用于转基因玉米MIR162的Real-Time PCR检测试剂盒。这对全面深入的研究解决转基因成分检测标准样品的制备技术和稳定性保证技术,积极开展我国转基因产品检测标准样品的研制,添补该测量领域的空白,具有很重要的现实意义。

    转基因玉米标准样品、其建立方法及应用

    公开(公告)号:CN102719534A

    公开(公告)日:2012-10-10

    申请号:CN201210172122.X

    申请日:2012-05-30

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开一种转基因玉米MIR162的标准样品制备、其建立方法及其在检测转基因玉米MIR162中的应用,分别以转基因玉米MIR162或非转基因玉米为原料,将原料研磨、过筛、加水,搅拌、静置、将沉淀物制备成冻干粉;再将二者以科学的比例混合,并重复“加水,搅拌、静置、将沉淀物制备成冻干粉”的过程,分装,0℃~4℃贮存;通过上述方法获得转基因玉米MIR162的标准样品,也可以应用于转基因玉米MIR162的Real-Time PCR检测试剂盒。这对全面深入的研究解决转基因成分检测标准样品的制备技术和稳定性保证技术,积极开展我国转基因产品检测标准样品的研制,添补该测量领域的空白,具有很重要的现实意义。

    用于转基因油菜(籽)实时PCR检测的引物序列和试剂盒

    公开(公告)号:CN1309842C

    公开(公告)日:2007-04-11

    申请号:CN200510046408.3

    申请日:2005-05-09

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 用于转基因油菜(籽)SYBRGreen实时PCR检测的引物序列和试剂盒,给出检测转基因油菜(籽)RT73品系外源结构基因、MS8品系外源结构基因和FatA内源基因的引物序列,最大、最小及优选序列,按引物序列制成的试剂盒,用于转基因产品定量检测和定性检测,具有灵敏度高、避免交叉污染造成假阳性的优点。SYBRGreen实时PCR技术采用完全闭管检测,无需PCR后处理,避免了交叉污染和假阳性。SYBRGreen染料在PCR反应中所要求的极端温度下同样十分稳定,可有效区别特异性产物、非特异性产物以及引物二聚体,以弥补其特异性差,检测技术快速和敏感,使得本方法具有操作简单、省时省力、结果可靠和准确灵敏等优点。

    转基因大豆检测能力验证样品及制备方法

    公开(公告)号:CN1715912A

    公开(公告)日:2006-01-04

    申请号:CN200510046803.1

    申请日:2005-06-30

    申请人: 曹际娟 郑江 赵昕

    IPC分类号: G01N33/02 G01N1/28

    摘要: 转基因大豆检测能力验证样品及制备方法,含有转基因大豆粉0.01~20%重量百分比,样品可以是A、B两个样品组成,2个样品中都均匀、稳定地含有2.8%、3.2%含量的转基因大豆。本项发明采用分割水平设计方法设计了样品中转基因大豆含量,可以有效地防止能力验证活动中各参试实验室间的串通行为,制法科学合理,成功率高,保证了实验室间能力验证样品的均匀性和稳定性。本发明更加全面、准确地反映出各参试实验室测试结果的的重现性和再现性,该组样品不仅可以用于转基因大豆检测的实验室间能力验证活动,同时,也可以做为质控样品用于食品实验室的日常检验工作。

    用于转基因油菜(籽)实时PCR检测的引物序列和试剂盒

    公开(公告)号:CN1699600A

    公开(公告)日:2005-11-23

    申请号:CN200510046408.3

    申请日:2005-05-09

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 用于转基因油菜(籽)SYBRGreen实时PCR检测的引物序列和试剂盒,给出检测转基因油菜(籽)RT73品系外源结构基因、MS8品系外源结构基因和FatA内源基因的引物序列,最大、最小及优选序列,按引物序列制成的试剂盒,用于转基因产品定量检测和定性检测,具有灵敏度高、避免交叉污染造成假阳性的优点。SYBRGreen实时PCR技术采用完全闭管检测,无需PCR后处理,避免了交叉污染和假阳性。SYBRGreen染料在PCR反应中所要求的极端温度下同样十分稳定,可有效区别特异性产物、非特异性产物以及引物二聚体,以弥补其特异性差,检测技术快速和敏感,使得本方法具有操作简单、省时省力、结果可靠和准确灵敏等优点。