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公开(公告)号：CN108004270A
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201711195597.X
申请日：2017-11-24
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供一种利用双荧光素酶报告基因检测鸭IFN-β启动子活性的方法，包括以下步骤：A、构建含鸭IFN-β启动子靶序列的萤火虫荧光素酶重组质粒；B、将含鸭IFN-β启动子靶序列的萤火虫荧光素酶重组质粒与刺激物、内参质粒及脂质体预混后转染目标细胞；所述内参质粒为海参荧光素酶质粒；C、将转染后的目标细胞进行培养后裂解，检测荧光素酶活性，即得鸭IFN-β启动子活性。该方法操作简单易行，通量高，且具有较高的可重复性和准确度，为研究鸭IFN-β通路提供了有效的检测工具。
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公开(公告)号：CN104845942A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201510198957.6
申请日：2015-04-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了特异性、高效杀灭多种耐药性金黄色葡萄球菌的噬菌体及其制备、用途。本发明从环境中筛选出具有特异性高效裂解多种耐药性金黄色葡萄球菌的噬菌体，裂菌谱广。基于双层琼脂平板法，获得大量具有裂菌活性的噬菌体，确定其裂菌活性、裂菌谱、体外裂菌能力，以及噬菌体的理化特性。该噬菌体特异性强，且不易使细菌产生抗性，也不会对宿主产生不良影响，是解决现在日趋严重的细菌耐药性的一种可行性方法，本发明有望成为一种防控耐药性金黄色葡萄球菌感染的新型抗菌制剂或环境消毒剂。
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公开(公告)号：CN104073478A
公开(公告)日：2014-10-01
申请号：CN201410265205.2
申请日：2014-06-13
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种杀灭革兰氏阳性菌的酶抗生素及其制备、用途；所述酶抗生素为由如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白。本发明从猪链球菌基因组中筛选具有特定裂菌作用的基因，通过构建原核表达载体，获得具有裂菌活性的重组表达产物——酶抗生素，确定其抗菌活性、裂菌谱、裂菌效率，以及影响表达产物活性的最优裂解条件。酶抗生素特异性强，且不易使细菌产生抗性，也不会对宿主产生不良影响，是解决现在日趋严重的细菌耐药性的一种可行性方法。
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公开(公告)号：CN102608324B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201210002342.8
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/64
Abstract: 本发明涉及一种基于多重放大系统的检测玉米赤霉烯酮的方法，包括以下步骤：将ZEN半抗原与OVA偶联，得到偶联物ZEN-OVA，再与biotin偶联，得到偶联物OVA-ZEN-biotin；将抗ZEN单克隆抗体与免疫磁珠结合；将抗体-磁珠结合物加入EP管中，洗涤，将待侧样品的萃取液加入上述EP管中，震荡，去除上清液，洗涤，再加入OVA-ZEN-biotin，震荡，去除上清液，洗涤，再加入SA-HRP，震荡，去除上清液，洗涤，最后加入发光底物，震荡，测定发光值；制作标准曲线，再根据待测样品的发光值，通过标准曲线得到对应的ZEN浓度。本发明采用抗ZEN单克隆抗体，与其他谷物中的真菌毒素无交叉反应，特异性强，减少了假阳性率。
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公开(公告)号：CN102703491A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210162640.3
申请日：2012-05-23
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种高效裂解大肠杆菌的裂菌制剂及其裂解方法、用途。设计引物，采用PCR扩增溶原性大肠杆菌中诱导的裂解性噬菌体的裂解酶基因，获得目的片段，再将目的片段与pET-28a（+）载体连接，得到重组表达质粒，导入大肠杆菌BL21（DE3）表达，获得阳性转化子，通过诱导，表达重组的融合蛋白，纯化诱导得纯化的重组蛋白，筛选具有裂解活性的重组表达蛋白，即得所述裂菌制剂。所述裂解方法为pH 8.0，37℃，采用的还原剂为质量百分比浓度为0.8%的β-巯基乙醇或10mM的半胱氨酸，缓冲液为20mM pH5.2醋酸钠缓冲液。本发明获得的裂菌制剂对多种血清型大肠杆菌的裂解特异性强、裂解效率高，可有效杀灭大肠杆菌。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102608324A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210002342.8
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/64
Abstract: 本发明涉及一种基于多重放大系统的检测玉米赤霉烯酮的方法，包括以下步骤：将ZEN半抗原与OVA偶联，得到偶联物ZEN-OVA，再与biotin偶联，得到偶联物OVA-ZEN-biotin；将抗ZEN单克隆抗体与免疫磁珠结合；将抗体-磁珠结合物加入EP管中，洗涤，将待侧样品的萃取液加入上述EP管中，震荡，去除上清液，洗涤，再加入OVA-ZEN-biotin，震荡，去除上清液，洗涤，再加入SA-HRP，震荡，去除上清液，洗涤，最后加入发光底物，震荡，测定发光值；制作标准曲线，再根据待测样品的发光值，通过标准曲线得到对应的ZEN浓度。本发明采用抗ZEN单克隆抗体，与其他谷物中的真菌毒素无交叉反应，特异性强，减少了假阳性率。
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公开(公告)号：CN102539499A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210002405.X
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N27/30 , G01N33/577 , G01N27/26
Abstract: 本发明公开了一种复合纳米修饰丝网印刷电极及检测伏马毒素B1的方法。所述丝网印刷电极的工作电极上涂覆有多壁碳纳米管-胶体金-壳聚糖混合物膜层。制备过程为：将多壁碳纳米管活化，制备胶体金，利用壳聚糖将多壁碳纳米管和胶体金混合均匀；将混合物涂覆在工作电极表面，37℃干燥成膜，即得。本发明检测伏马毒素B1的方法是鉴于待测样品若有FB1毒素，则与抗FB1抗体竞争结合，使与电极上的FB1-OVA结合的抗体量减少，并由此使电极上HRP-羊抗鼠二抗的量也减少，并影响电流变化值ΔI；然后根据FB1标准品绘制的标准曲线来判定谷物检测样品中FB1的含量。本发明检测对象单一且针对性强，准确率高，灵敏度强。
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公开(公告)号：CN102520179A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110403178.7
申请日：2011-12-07
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种定量检测伏马毒素B1的方法，包括如下步骤：1、制备偶联物FB1-KLH和FB1-OVA；2、制备抗FB1的单克隆抗体；3、制备胶体金，标记抗FB1的单克隆抗体；将标记后的单克隆抗体喷涂到金标垫上；4、在硝酸纤维素膜上进行点样；5、组装成试纸条；6、绘制FB1浓度与显色值的标准曲线，将待测样品的显色值带入标准曲线中，得到待测样品中FB1的含量。本发明检测对象单一且针对性强，准确率高，检测速度快，所需时间短，不需经培训的专业人员就可使用本发明方法来检测，满足粮食储存销售机构、出入境、海关等检验部门快速、正确地判断FB1含量的要求，并且便于基层推广和运用。
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公开(公告)号：CN102520178A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110403176.8
申请日：2011-12-07
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种同时定量检测玉米赤霉烯酮与伏马毒素B1的方法，包括如下步骤：1、制备偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA，FB1-KLH和FB1-OVA；2、制备抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体；3、制备胶体金，标记所述单克隆抗体，将标记后的单克隆抗体喷涂到金标垫上；4、在硝酸纤维素膜上进行点样；5、组装成试纸条；6、分别绘制ZEN、FB1浓度与显色值的标准曲线；将待测样品的显色值带入标准曲线中，得到待测样品中ZEN和FB1的含量。本发明的检测准确率高，检测速度快，所需时间短，不需经培训就可使用，满足粮食储存销售机构、出入境、海关等检验部门快速、正确地判断ZEN和FB1含量的要求。
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公开(公告)号：CN102198265A
公开(公告)日：2011-09-28
申请号：CN201110068767.4
申请日：2011-03-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的应用噬菌体裂解酶降解猪链球菌生物被膜的方法，采用表达菌BL21-lys表达分子量为55kDa的裂解酶LySMP，经过Ni柱纯化得到裂解酶，并在体外用该裂解酶降解利用细胞培养板培养得到的猪链球菌生物被膜。本发明在杀灭猪链球菌SS2-4和SS2-H的同时，也可以破坏生物被膜的结构以达到彻底清除生物被膜的作用。
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