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公开(公告)号：CN119751703A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411985306.7
申请日：2024-12-31
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N7/01 , A61K39/215 , A61K39/385 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物医药领域，特别是涉及一种重组蛋白、核酸分子和重组噬菌体及其应用。本发明提供了氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的重组蛋白和氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示的重组蛋白及其在制备疫苗中的应用。注射利用该重组蛋白制备得到的疫苗能够有效预防冠状病毒感染。本发明选择PEDV S蛋白作为表位设计的候选抗原，选择两种与特异性S蛋白表位相连的靶向肽，选择M13KE噬菌体作为PEDV表位的递送载体，并利用动物实验，来评估PEDV疫苗的效果。结果显示：接种疫苗的小鼠的淋巴细胞对PEDV抗原表现出明显的增殖反应；接种疫苗的小鼠血清中IFN‑γ水平显著升高。
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公开(公告)号：CN118480514A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410519488.2
申请日：2024-04-28
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N7/00 , A61K35/76 , A61K31/19 , A61K9/12 , A61K9/00 , A61P15/14 , A61P29/00 , A61P31/04 , A01N63/40 , A01N37/16 , A01P1/00 , C12R1/92
Abstract: 本发明公开了一种治疗或预防细菌性奶牛乳腺炎的噬菌体消毒产品及其应用，属于动物疫病防治领域。本发明分离到2个肺炎克雷伯菌噬菌体SWPA1和SWPA2，其对分离的肺炎克雷伯菌的裂解谱覆盖率达70％；最佳感染复数为0.1，最适pH为7，在25‑45℃范围内保持接近100％存活率；本发明还制备了肺炎克雷伯菌和大肠杆菌噬菌体鸡尾酒消毒制剂JPW；消毒结果显示，与PAA单独消毒效果相比，JPW与PAA联用能够显著降低奶牛体表及牛场环境中的细菌数。说明JPW与PAA组合消毒模式能够有效降低养殖场环境及乳房表面的细菌数，提高消毒效果，本发明制备的噬菌体鸡尾酒喷雾消毒制剂具有防控养殖场奶牛乳腺炎的潜力。
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公开(公告)号：CN109820835B
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN201910059452.X
申请日：2019-01-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种复合型胞内金黄色葡萄球菌抗菌制剂及其制备和应用。所述抗菌制剂包括载体细菌承载噬菌体的复合物，所述载体细菌为金黄色葡萄球菌，所述噬菌体为金黄色葡萄球菌烈性噬菌体。优选所述载体细菌为金黄色葡萄球菌SH‑5，所述噬菌体为噬菌体SLPW。所述抗菌制剂的制备方法，包括如下步骤：S1、噬菌体的纯化；S2、用载体细菌吸附噬菌体后，得到载体细菌承载噬菌体的复合物。本发明的复合型胞内抗菌制剂能够进入皮肤角质细胞内部，高效杀死细胞内感染的MRSA菌株；经细菌‑噬菌体复合物处理后的感染的角质细胞状态恢复迅速，细胞的促炎性细胞因子和细胞毒性显著下降。
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公开(公告)号：CN109820835A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910059452.X
申请日：2019-01-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种复合型胞内金黄色葡萄球菌抗菌制剂及其制备和应用。所述抗菌制剂包括载体细菌承载噬菌体的复合物，所述载体细菌为金黄色葡萄球菌，所述噬菌体为金黄色葡萄球菌烈性噬菌体。优选所述载体细菌为金黄色葡萄球菌SH-5，所述噬菌体为噬菌体SLPW。所述抗菌制剂的制备方法，包括如下步骤：S1、噬菌体的纯化；S2、用载体细菌吸附噬菌体后，得到载体细菌承载噬菌体的复合物。本发明的复合型胞内抗菌制剂能够进入皮肤角质细胞内部，高效杀死细胞内感染的MRSA菌株；经细菌-噬菌体复合物处理后的感染的角质细胞状态恢复迅速，细胞的促炎性细胞因子和细胞毒性显著下降。
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公开(公告)号：CN109666667A
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201910060337.4
申请日：2019-01-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素及其制备和应用。所述嵌合酶抗生素包括胞质转导肽CTP与金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶JDlys串联的重组蛋白CTP-JDlys。所述嵌合酶抗生素的制备方法包括：S1、设计引物，分别以裂解酶JDlys基因和胞质转导肽CTP基因为模板，扩增JDlys基因片段和CTP基因片段；S2、将扩增得到的JDlys基因构建重组质粒，将扩增得到的CTP基因插入至所述重组质粒中JDlys基因的5`端，构建含目标基因片段CTP-JDlys的重组质粒；S3、将所述含目标基因片段CTP-JDlys的重组质粒经表达、纯化后，获得嵌合酶抗生素蛋白CTP-JDlys。本发明提供的CTP-JDlys蛋白能进入皮肤角质细胞内高效治疗耐药金黄色葡萄球菌引起的小鼠皮肤脓肿。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108384804A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810136202.7
申请日：2018-02-09
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供了一种鸡TBK1基因的小干扰RNA质粒的构建方法，所述构建方法包括如下步骤：S1、设计针对鸡TBK1的两条干扰靶序列；S2、根据步骤S1设计的两条干扰靶序列，分别合成用于构建shRNA片段的两组互补的单链DNA序列，并分别在所述两组互补的单链DNA序列中引入相应的酶切位点；S3、将所述两组互补的单链DNA序列分别经变性退火后，分别形成带有黏末端的双链DNA片段；然后，分别将所述双链DNA片段与载体连接，得到所述鸡TBK1基因的小干扰RNA。我们通过细胞水平实验，证实本发明构建的靶向鸡TBK1小干扰RNA的干扰质粒能高效特异性抑制鸡TBK1基因的表达，为深入研究TBK1在鸡抗病毒先天免疫中的作用提供了平台。
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公开(公告)号：CN102279268A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110215377.5
申请日：2011-07-29
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558
Abstract: 一种生物检测工程技术领域的同时检测玉米赤霉烯酮与伏马毒素的方法，包括如下步骤：1、制备偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA；FB1-KLH和FB1-OVA；2、分别制备抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体；3、制备胶体金，分别标记抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体；将标记后的单克隆抗体喷涂到金标垫上；4、在硝酸纤维素膜上进行点样；5、组装成试纸条；6、将待测样品的甲醇提取上清滴入试纸条的样本槽中，获取硝酸纤维素膜上各点样条带的显色结果，鉴定，得到结果。本发明的方法检测对象针对性强，准确率高；检测速度快，所需时间短，减少了使用两种检测方法检测两种毒素带来的人力、物力的损失，并且便于基层推广和运用。
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公开(公告)号：CN101650368A
公开(公告)日：2010-02-17
申请号：CN200910307803.0
申请日：2009-09-27
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 一种检测技术领域的用胶体金免疫层析试检测玉米赤霉烯酮毒素的方法，包括如下步骤：将ZEN半抗原通过活泼酯法分别与BSA和OVA偶联，得到ZEN的偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA；利用ZEN-BSA作为免疫原，采用常规方法制备抗ZEN的单克隆抗体；用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金，用该胶体金标记经过透析除盐处理的抗ZEN的单克隆抗体；将步骤三所得的已标记的单克隆抗体喷涂到金标垫上，将ZEN-OVA喷涂到T线，兔抗鼠的单克隆抗体喷涂到C线，组装成试纸条，干燥；将待测样品用甲醇提取，离心，取上清，将上清滴入试纸条的样本槽中，获取T线和C线的显色，鉴定，得到结果。本发明可特异性检测ZEN毒素，准确率高，检测速度快，所需时间仅为5～10分钟。
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公开(公告)号：CN100491977C
公开(公告)日：2009-05-27
申请号：CN200610028327.5
申请日：2006-06-29
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种MGB探针多重荧光定量PCR检测大肠杆菌O157的方法，构建重组质粒，设计合成引物和Taqman-MGB探针，进行二重荧光定量PCR，将大肠杆菌O157的rfbE、vt2的一段保守序列进行PCR扩增，获得目的片断，再将目的片断与PMD 18-T Vector连接，得到重组质粒，将重组质粒转化DH5α感受态大肠杆菌细胞，扩大培养，获得高浓度的质粒，将此高浓度质粒作10倍比稀释，作为标准样品，将标准样品和待测样品共同作二重荧光定量PCR，标准样品形成标准曲线，根据标准曲线可计算出待检样品中大肠杆菌O157的含量。本发明使用MGB探针，具有更高的敏感性和特异性，能快速、准确地检测样本中的大肠杆菌O157含量，可同时检测大肠杆菌O157的两个特异性毒力基因，是一种快速、准确的大肠杆菌O157检测方法。
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公开(公告)号：CN117965641B
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202410280064.5
申请日：2024-03-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/70 , C12N15/74 , C12N15/75 , C12N9/02 , C12N15/53 , C12N1/21 , C12R1/19 , C12R1/125 , C12R1/225
Abstract: 本发明涉及基因功能的确定与应用，特别是涉及Dsb家族基因的应用。本发明基于转座子随机插入突变技术，发掘到与噬菌体复制直接相关的功能基因‑Dsb家族基因，尤其是DsbA。本发明发现DsbA基因缺失后发酵菌株呈现噬菌体感染的抗性，但是缺失株的生长特性没有发生改变，提示DsbA基因具备潜在调控噬菌体复制的能力，可在发酵菌控制噬菌体感染，提高发酵效率。进一步通过实验确定DsbA蛋白依赖自身的C49和C52两个关键氨基酸介导的二硫键修饰功能，促进穿孔素Holin蛋白利用自身的C17发生寡聚化，调控Holin蛋白在细菌内膜上的打孔能力，进而促进细菌裂解和子代噬菌体释放。
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